參加動物防疫采樣工作發現的問題與思考

張曉敏 白唯

（陜西省大荔縣動物疫病預防控制中心 715100）

在重大動物疫病監測中采樣工作至關重要。采樣方法、采樣數量及樣品質量直接影響監測結果的準確性和監測結論的科學性。因此，對負責采樣人員如何掌握采樣方法采樣技術多有特定要求，只有符合要求的技術人員才能獲得合格的樣品。

在現在基層防疫工作體系中，由于單位職責劃分和方便工作管理多年來長期形成了一套工作模式。在這套模式中實驗室監測工作大多與采樣分離，主要負責接收樣品和實驗室監測工作，采樣工作由縣級防疫工作人員組織相關技術人員指導基層站人員實施完成。

身為獸醫實驗室實驗工作人員，今年有幸被抽調參加省市對大荔縣春季動物免疫考核驗收工作。采樣監測是每年驗收工作必不可少的一項，也是評價免疫效果最有效的科學依據之一。

1 采樣任務要求

根據上級文件要求，被抽查縣區內隨機抽查4個規模場（1個雞場、1個豬場、1個牛場、1個羊場），每個場采樣15份。1個生豬屠宰場采樣15份；1個家禽屠宰場采樣15份。抽查2個鄉鎮，每個鄉鎮隨機抽查5～10個養殖戶，隨機抽取畜禽血樣各15份，共采集血清60份。

共采集家禽全血樣60份，家畜全血樣90份。

附件對春季重大動物疫病采樣要求：本次檢查采取全血樣品；同一規模場縣區不同日齡的動物采樣；散養采樣每村不少于5戶；采樣材料由各縣準備，家畜樣品每份不少于5ml全血，家禽不少于2ml全血；血樣編號豬A01-A30、牛B01-B30、羊C01-C30、雞D01-D30；采樣時做好消毒和防護，同種動物采樣先到養殖場，再到散養戶。

2 采樣準備及實施采樣

準備防護服、一次性注射器、酒精棉球、一次性手套、非抗凝管等。在采樣工作中嚴格規范操作，采集完成了所要求的樣品種類和數量，并按要求編號，填寫采樣信息表格。但由于氣溫偏高，采集血樣很快凝集，在二次注入非抗凝管時推力對凝集的紅細胞造成破壞引發分離血清部分發生溶血。

3 本次采樣存在問題與思考分析

（1）文件采樣監測的目的和要求不明確。實驗室監測工作依據國家及省農業農村廳制定出臺的 《2021年動物疫病監測方案》，2021年監測方案重點動物疫病監測 （高致病性禽流感、口蹄疫、高致病性豬藍耳病、豬瘟、雞新城疫）包括免疫抗體監測和病原學檢測。結合監測方案，因為文件驗收中包括生豬屠宰場和家禽交易市場，本次采樣除了采集血清樣本還應有病原學樣本泄殖腔、咽喉拭子樣本，頜下淋巴結樣本及食道-咽部分泌物 （O-P液）樣本。但由于文件只要求我們采集畜禽血清樣品沒有要求其他樣品采集工作。

（2）文件中提到防疫驗收工作包含各縣非洲豬瘟防控工作，對非洲豬瘟采樣沒有明確要求。非洲豬瘟采樣要求采集抗凝血。有人對非洲豬瘟采樣和其他血清學采樣要求區別不清晰。

（3）由于氣溫偏高，采集血樣很快凝集，在注入非抗凝管時的推力對凝集的紅細胞造成破壞，導致分離時血清部分溶血。其實將血樣導入非抗凝管的做法，個人認為是不正確的，既增加了工作量，又破壞了血清質量，給實驗室檢測取樣造成極大的不便。

（4）采集血樣應根據檢測目的確定樣品種類，監測免疫抗體 （禽流感、新城疫抗體、口蹄疫抗體、豬瘟抗體）需要采集血清樣品；檢測病原需要采集病原學樣品。

（5）基層獸醫 （特別縣鄉）專業人員嚴重缺乏，年齡老化。據調查2009年畜牧體制改革，大荔縣為健全畜牧體系增強服務職能將鄉鎮獸醫站擴編增強隊伍至90多人。10多年過去了，由于退休雖然編制數不變，但實有在職人員減少至65人。在職人員50歲以上占60%以上。近年來事業單位招考用人體制的推行，基層防疫體系將面臨越來越嚴峻的用人荒。

（6）本次采樣出現問題是由于文件要求血樣為全血，其本意要求現場采樣的用意，并沒有對盛血容器進行具體要求。而所采血樣從一次性注射器二次倒入非抗凝管 （上級要求）主要受上級部門人員誤導，自身缺乏采樣監測知識，造成耗材費力起不到良好的效果。

4 對策與建議

（1）建議上級部門發文安排采樣工作時明確監測目的和任務要求，貫徹完成 《2021動物疫病監測方案》中重大動物疫病的檢測任務。單純針對驗收考核動物防疫效果，只需要采集血清樣品即可；但本次文件上級部門驗收考核的是春季防疫為主，包含重大動物疫病防控全方位工作，理應有病原學樣本。

（2）非洲豬瘟的防控工作主要檢查驗收生豬養殖場對上級畜牧獸醫部門制定的養殖場調運出入環節、飼養環節、定期監測等環節生物安全防控措施的貫徹落實情況。非洲豬瘟檢測屬于分子生物 （病原）學范疇。根據國家病原微生物實驗室生物安全管理條例及實驗室生物安全國家標準規定，非洲豬瘟聚合酶鏈反應 （PCR）的檢測應在國家認可的二級以上實驗室進行檢測。其樣本采集要求EDTA（10%乙二胺四乙酸二鈉）抗凝血，市場上可買到EDTA抗凝血管和非抗凝管兩種。豬前腔靜脈用一次性軟長針管采血直接流入抗凝血管中，輕輕搖動使管中包被的抗凝劑充分混勻，防止凝固，即可得到非洲豬瘟檢測要求的EDTA抗凝血樣品。非抗凝管用于放置血清血樣品，靜置足夠時間可分離血清。

（3）檢測動物免疫抗體血清血樣品的采集用一次性采血管，基層如果沒有采血管可用5ml一次注射器即可。選擇動物合適的部位用一次性注射器采血2～5ml，將采好血的注射器輕輕后拉少許，使血液表面有一定斜面，斜靠靜置30min以上，血清即可析出。這時才可整理帶走，否則急于帶走搖晃會破壞紅細胞而溶血。

（4）動物防疫體系人員缺乏是多年困擾難題之一，主要由于行業歧視、待遇不公、教育受限、招考門檻高等諸多因素造成。要打破困擾，需要用人單位降低門檻，提高待遇，增加招聘崗位及人員數量，吸引專業人才投入畜牧獸醫行業中來。

5 結束語

此文旨在運用自身知識和經驗對失誤情況進行分析，不對之處請指出，以期對日后做好相關工作提供參考。