非洲豬瘟相關(guān)檢測(cè)及豬場(chǎng)生物安全防控技術(shù)

張午平

（山西省忻州市忻府區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 034000）

生物安全主要包括與生物生長(zhǎng)相關(guān)的各種因素，主要包括對(duì)國(guó)家經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)、社會(huì)穩(wěn)定、人體健康所造成的危害及所隱藏的安全隱患。生物病原體能引起動(dòng)物與動(dòng)物之間，動(dòng)物與人之間的各種疾病，影響人們的正常生產(chǎn)生活。非洲豬瘟是一種烈性病毒，也是我國(guó)重點(diǎn)防范的動(dòng)物疫病，該病毒容易在生豬之間交叉感染，傳播速度較快，甚至通過(guò)水源、空氣感染人類，造成巨大的生物安全事故。因此，要不斷采取檢測(cè)方法及相關(guān)的防疫措施，嚴(yán)格控制非洲豬瘟的發(fā)生，保證我國(guó)生物安全。

1 非洲豬瘟的相關(guān)檢測(cè)方法

1.1 分子生物學(xué)檢測(cè)方法

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)能對(duì)微量病原體中的DNA進(jìn)行檢測(cè)，通過(guò)核酸反應(yīng)作用，對(duì)病毒進(jìn)行可視化的檢測(cè)和分析，具有靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確性強(qiáng)的特點(diǎn)，也是進(jìn)行非洲豬瘟檢測(cè)工作常用的方法之一。近年來(lái)，隨著互聯(lián)網(wǎng)技術(shù)及信息技術(shù)的深入發(fā)展，科學(xué)技術(shù)水平不斷提高，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)也在進(jìn)行深入發(fā)展，產(chǎn)生出新一代PCR技術(shù)，微滴數(shù)字PCR與傳統(tǒng)的技術(shù)方法相比，分析結(jié)果更加準(zhǔn)確，無(wú)需制作相關(guān)的數(shù)據(jù)表格及標(biāo)準(zhǔn)曲線，能對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行考核和檢測(cè)，解決在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中的各項(xiàng)問(wèn)題，同時(shí)也可以建立高效納米檢測(cè)方法，提高聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)技術(shù)的精準(zhǔn)度，及時(shí)發(fā)現(xiàn)生豬養(yǎng)殖過(guò)程中潛在的安全風(fēng)險(xiǎn)和危險(xiǎn)，及時(shí)防控非洲豬瘟的產(chǎn)生[1]。

1.2 血清學(xué)檢測(cè)方法

酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)是實(shí)驗(yàn)室中常用的檢測(cè)方法，主要分為抗原檢測(cè)和抗體檢測(cè)，其中抗體檢測(cè)具有較高的靈敏性，檢測(cè)數(shù)據(jù)和檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性較高，主要是從病毒顆粒中提取相關(guān)的蛋白進(jìn)行檢測(cè)，然后進(jìn)行抗體的篩選，觀察抗體的陽(yáng)性反應(yīng)，從而提高檢測(cè)結(jié)果的可靠性。其次，直接免疫熒光實(shí)驗(yàn)法也是血清學(xué)檢測(cè)方法的常用方法之一，主要是將待檢測(cè)的抗原性結(jié)合的抗體用熒光素進(jìn)行標(biāo)記，然后在一定條件下與抗原體進(jìn)行反應(yīng)，將反應(yīng)結(jié)束后的熒光抗體血清在室溫環(huán)境下進(jìn)行干燥切片處理，然后放在顯微鏡下觀察，觀察樣品的顯色情況，然后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析，并作出結(jié)論。該方法具有速度較快，操作簡(jiǎn)單的特點(diǎn)，但并不適合大批量的檢測(cè)樣品，是非洲豬瘟檢測(cè)方法的常用輔助方法之一。再次，間接免疫熒光抗體實(shí)驗(yàn)法首先是將某物體的抗體與感染性病毒的細(xì)胞進(jìn)行結(jié)合，然后用熒光素對(duì)二者進(jìn)行標(biāo)記，在熒光顯微鏡下，通過(guò)激發(fā)熒光物質(zhì)對(duì)抗原的位置作出判斷，從而達(dá)到檢測(cè)非洲豬瘟的效果。該方法具有準(zhǔn)確性高、敏感度高、成本較低的特點(diǎn)，在實(shí)際工作中應(yīng)用較為廣泛。此外，膠體金免疫層析試紙條也是血清學(xué)檢測(cè)方法之一，主要采用化學(xué)反應(yīng)在還原劑檸檬酸鈉的作用下觀察氯金酸水溶液的反應(yīng)及顆粒大小，然后在靜電作用下，形成穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，再將病毒的蛋白與膠體金進(jìn)行結(jié)合。如果在標(biāo)本中能檢測(cè)出特異抗原，就可以通過(guò)一系列的化學(xué)反應(yīng)用檢測(cè)膠體金分析試紙條檢測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果和數(shù)據(jù)，靈敏度較高，操作簡(jiǎn)便，適用于非洲豬瘟抗體檢測(cè)，也適用于非洲豬瘟的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。

1.3 其他檢測(cè)方法

紅細(xì)胞吸附實(shí)驗(yàn)也是非洲豬瘟檢測(cè)的常用方法之一，其原理主要是在體外培養(yǎng)感染非洲豬瘟的巨噬細(xì)胞，然后將紅細(xì)胞與巨噬細(xì)胞進(jìn)行結(jié)合，如果發(fā)生吸附現(xiàn)象就會(huì)在巨噬細(xì)胞外形成玫瑰花環(huán)，從而得出相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。但紅細(xì)胞吸附實(shí)驗(yàn)只適合發(fā)生在疑似疫病的豬群進(jìn)行，是常見(jiàn)的輔助檢測(cè)方法，不是主要的檢測(cè)方法。其次，還可以采用生物傳感器法，將生豬活性材料如DNA、抗體、抗原與理化換能器進(jìn)行有機(jī)的結(jié)合，然后進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)控和檢測(cè)，能快速篩查所需檢測(cè)樣本的質(zhì)量，具有樣本量少、靈敏度高的特點(diǎn)，在非洲豬瘟檢驗(yàn)工作中發(fā)揮了不可替代的作用。該方法能快速處理多個(gè)樣本，單個(gè)檢測(cè)時(shí)僅需5min，具有快速、檢測(cè)成本低的優(yōu)點(diǎn)[2]。

2 豬場(chǎng)生物安全防控技術(shù)

2.1 對(duì)攜帶病源的豬肉產(chǎn)品及豬場(chǎng)飼料和用水的消毒

非洲豬瘟病毒可以在豬肉及主要產(chǎn)品中長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存，其存活率較高，在室溫下該病毒還可以在腌肉中存活較長(zhǎng)時(shí)間。因此，應(yīng)嚴(yán)禁外來(lái)豬肉及豬肉產(chǎn)品進(jìn)入豬場(chǎng)，保證豬場(chǎng)飼料及飲用水的安全。要加強(qiáng)對(duì)非洲豬瘟的防護(hù)工作，首先要合理儲(chǔ)存和調(diào)配生豬飼料，保證生豬飼料不被病毒污染，在進(jìn)行生豬飼料配制時(shí)，禁止將泔水與飼料混合，影響生豬的正常生長(zhǎng)發(fā)育。其次，要加強(qiáng)對(duì)生豬飲用水的消毒工作，非洲豬瘟病毒容易潛藏在水源中，因此，可以用次氯酸鈉滅殺豬瘟病毒的活性，殺死水中的真菌、細(xì)菌及其芽孢，對(duì)飲用水進(jìn)行消毒處理，保證生豬飲用水的質(zhì)量。此外，還可以用次氯酸鈉處理過(guò)的水對(duì)生豬豬舍、水槽及相關(guān)用具進(jìn)行消毒處理，降低病毒活性，保證生豬安全[3]。

2.2 對(duì)豬舍環(huán)境的消毒

要加強(qiáng)對(duì)豬舍的消毒工作，定期對(duì)豬舍環(huán)境進(jìn)行消毒處理，有效降低非洲豬瘟的發(fā)生概率，在生豬養(yǎng)殖過(guò)程中，生豬豬舍是整個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)所的核心，需要定期對(duì)生豬豬舍進(jìn)行全方位無(wú)死角的消毒工作，對(duì)豬舍內(nèi)外環(huán)境及養(yǎng)豬場(chǎng)的院內(nèi)環(huán)境、室內(nèi)環(huán)境進(jìn)行定期清理，可以在豬舍外部、養(yǎng)豬場(chǎng)墻壁及生豬運(yùn)輸?shù)缆穱姙⑾舅⑹宜瑫r(shí)要注重定期的更換消毒液及消毒劑，讓消毒劑能真正發(fā)揮作用。其次，生豬養(yǎng)殖場(chǎng)的所有主要道路及豬舍每天用石灰水處理，豬舍外墻鋪設(shè)生石灰進(jìn)行消毒，每逢陰雨天氣或暴雨天氣還要對(duì)生石灰進(jìn)行填補(bǔ)，保證生石灰能充分發(fā)揮效用。再次，對(duì)豬舍空間進(jìn)行合理的規(guī)劃和設(shè)計(jì)，在豬舍內(nèi)部設(shè)置污染區(qū)、潔凈區(qū)、淋浴間，養(yǎng)殖人員需要經(jīng)過(guò)淋浴間進(jìn)行消毒處理后才能進(jìn)入到生豬養(yǎng)殖區(qū)，防止工作人員從外部帶入病毒，影響生豬的生長(zhǎng)發(fā)育。此外，對(duì)生豬養(yǎng)殖過(guò)程中產(chǎn)生的糞便、廢水等污染物可以采用熱處理的方式，滅活其中病毒的活性，將污染物進(jìn)行處理后排放，從而最大程度減少豬瘟發(fā)生概率，實(shí)現(xiàn)防控工作的目標(biāo)。

2.3 對(duì)豬場(chǎng)人員和車輛進(jìn)行消毒

非洲豬瘟病毒具有較強(qiáng)的存活能力，如果寄生在有機(jī)物中會(huì)延長(zhǎng)病毒的存活時(shí)間，病毒可以通過(guò)衣服、鞋子、設(shè)備、車輛等進(jìn)行傳播，人員流動(dòng)能擴(kuò)散病毒傳播面積，提高病毒擴(kuò)散的效率。因此，要對(duì)豬場(chǎng)相關(guān)人員及車輛進(jìn)行定期消毒，在員工進(jìn)入豬場(chǎng)前，要在指定隔離點(diǎn)進(jìn)行隔離，更換相應(yīng)的衣物和工具，將自己的衣物和鞋子用消毒水浸泡，然后通過(guò)消毒通道進(jìn)入生豬養(yǎng)殖區(qū)，在隔離點(diǎn)還需要對(duì)相關(guān)人員進(jìn)行采樣工作，檢測(cè)是否存在病毒。其次，也要加強(qiáng)對(duì)相關(guān)車輛的檢測(cè)和消毒工作，每次運(yùn)輸生豬后要及時(shí)清潔和處理運(yùn)輸車輛，對(duì)車輛內(nèi)部和外部進(jìn)行全面的消毒和處理，特別注意車輛與生豬進(jìn)行接觸的地方，在生豬運(yùn)輸和生豬搬運(yùn)過(guò)程中，駕駛員也要穿戴相應(yīng)的防護(hù)服，嚴(yán)格遵守生豬運(yùn)輸工作的流程和環(huán)節(jié)，豬場(chǎng)也應(yīng)設(shè)立相應(yīng)的生豬裝載區(qū)，禁止外部駕駛員進(jìn)入生豬養(yǎng)殖區(qū)，影響生豬的生長(zhǎng)發(fā)育。

3 結(jié)論

綜上所述，我國(guó)是世界上生豬養(yǎng)殖規(guī)模和生豬消費(fèi)最大的國(guó)家，對(duì)生豬的需求量較高。因此，養(yǎng)殖戶要加強(qiáng)生豬養(yǎng)殖防控工作，防止生豬感染病毒，影響生豬質(zhì)量，要不斷創(chuàng)新養(yǎng)殖技術(shù)，提高生豬質(zhì)量和產(chǎn)量，滿足社會(huì)和市場(chǎng)的需求。