血清CXCL12、Lp-PLA2 水平與阿爾茨海默癥患者認知功能損害的相關性研究

鄭旭杰 董 悅 潘哲拓

阿爾茨海默癥（AD）臨床癥狀表現為認知障礙、言語障礙及情感淡漠等[1]。研究發現，AD 患者認知功能損害多與神經內分泌、神經變性及炎性損傷有關[2]。趨化因子C-X-C 基序配體12（CXCL12）與各類腦血管疾病的進展有密切關系[3]。脂蛋白相關磷脂酶A2（Lp-PLA2）對腦損傷認知功能有一定調節作用[4]。目前關于血清CXCL12、Lp-PLA2 表達水平與AD 患者認知功能的關系研究鮮有報道。本研究通過檢測AD患者血清CXCL12、Lp-PLA2 的表達水平，探討其與AD 患者認知功能損害的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 以2018 年12 月至2020 年12 月溫州醫科大學附屬康寧醫院精神科收治的80 例AD患者為研究對象（病例組），選擇同期在醫院體檢中心體檢的60 名健康者作為對照組。病例組：男42例，女38 例；年齡64～87（70.12±4.65）歲。對照組：男31 例，女29 例；年齡65～84（69.57±5.61）歲。本研究經醫院倫理委員會審核通過（倫理批件編號：2020KY121）。

1.2 納入及排除標準 納入標準：（1）診斷均符合《2018 中國癡呆與認知障礙診治指南（二）：阿爾茨海默病診治指南》[5]中相關標準；（2）頭顱CT 或MRI 檢查顯示腦萎縮；（3）認知功能障礙和日常生活能力降低病程≥6 個月；（4）患者家屬均知情同意并簽署同意書。排除標準：（1）由其他疾病引起的認知功能障礙者；（2）合并心、肝、腎等器官功能障礙及嚴重軀體疾病者；（3）合并嚴重的血液系統及自身免疫系統疾病者；（4）患有惡性腫瘤及感染性疾病者；（5）主動放棄治療或轉院者。

1.3 方 法

1.3.1 治療方法 參照《2018 中國癡呆與認知障礙診治指南（二）：阿爾茨海默病診治指南》給予患者膽堿酯酶抑制劑治療，治療無效或因不良反應不能耐受時可調換其他膽堿酯酶抑制劑或換作貼劑進行治療，治療過程中嚴密觀察患者可能出現的不良反應。

1.3.2 血清CXCL12、Lp-PLA2 水平檢測 采集所有受試者晨起空腹靜脈血3 mL，置于乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA）抗凝管中，靜置30 min，以3000 r/min 離心10 min（離心半徑為13 cm），收集上層血清，保存于-80 ℃冰箱內待測。使用酶聯免疫吸附測定（ELISA）法分別測定兩組血清CXCL12、Lp-PLA2 水平。研究所用試劑盒均由上海酶聯生物科技有限公司提供，所有操作均嚴格按照試劑盒使用說明書進行。

1.3.3 分組方法[6]使用臨床癡呆量表（CDR）評估患者認知功能，包括記憶力、判斷和解決問題能力、社會事務、家庭生活業余愛好和個人照料6 個項目，得分與認知功能損害程度呈反比。其中輕度組CDR評分≤1 分（45 例），中重度組CDR 評分為2～3 分（35 例）。

1.3.4 影響AD 患者認知功能的相關資料收集 包括[性別、年齡、體質指數（BMI）、病程、文化程度、婚姻狀況、既往史（家族史、吸煙史、飲酒史、腦卒中史、高血壓史、糖尿病史、頭部創傷史）、獨居、體育活動少（1 周運動次數＜3 次，每次時間＜30 min）、社交活動少（1 周與人交談次數＜3 次）、負性生活事件多[漢密爾頓焦慮量表（HAMA）評分為2～4 分]、入院時蒙特利爾認知評估量表（MoCA）評分、簡易精神狀態量表（MMSE）評分]、既往降壓藥服用情況（他汀類藥物、阿司匹林）及入院24 h 內實驗室指標[低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDLC）、三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、總膽紅素（TBIL）、肌酐（Cre）、血小板（PLT）、空腹血糖（FBG）、空腹胰島素（FINS）、血清白蛋白（ALB）、全血白細胞計數（WBC）、血清總蛋白（TP）、超敏C-反應蛋白（hs-CRP）]及血清CXCL12、Lp-PLA2。

1.4 統計學方法 應用SPSS 25.0 軟件進行統計分析。符合正態分布計量資料以均數±標準差（）表示，組間比較采用獨立樣本t 檢驗，計數資料以率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。采用多因素Logistic 回歸分析影響AD 患者認知功能的相關因素；采用Spearman 相關性法分析血清CXCL12、Lp-PLA2水平與影響AD 患者認知功能相關因素的關系；繪制受試者工作特征曲線（ROC）分析血清CXCL12、Lp-PLA2 水平對AD 患者認知功能損害的預測價值。以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 病例組與對照組血清CXCL12、Lp-PLA2 水平比較 病例組患者血清CXCL12、Lp-PLA2 水平均高于對照組（P＜0.05）。見表1。

表1 病例組與對照組血清CXCL12、Lp-PLA2 水平比較（）

表1 病例組與對照組血清CXCL12、Lp-PLA2 水平比較（）

注：病例組為阿爾茨海默癥患者；對照組為健康者；CXCL12 為趨化因子C-X-C 基序配體12；Lp-PLA2 為脂蛋白相關磷脂酶A2

2.2 影響AD 患者認知功能的單因素分析 中重度組獨居、社交活動少、負性生活事件多占比、入院時MMSE 評分、血清CXCL12、Lp-PLA2 水平均高于輕度組（P＜0.05）；中重度組入院時MoCA 評分低于輕度組（P＜0.05）；兩組性別、年齡、BMI、病程、文化程度、婚姻狀況、既往史、體育活動少、既往降壓藥服用情況、LDL-C、HDL-C、TG、TC、TBIL、Cre、PLT、FBG、FINS、ALB、WBC、TP、hs-CRP 比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 影響AD 患者認知功能的單因素分析

2.3 影響AD 患者認知功能的多因素Logistic 回歸分析 將AD 患者認知功能損害情況作為因變量（Y），將單因素分析有差異指標獨居、社交活動少、負性生活事件多、入院時MoCA 評分、入院時MMSE 評分、血清CXCL12、Lp-PLA2 水平作為自變量（X），進行Logistic 回歸分析賦值，賦值結果見表3。經Logistic 回歸分析，結果顯示，獨居、社交活動少、負性生活事件多、血清CXCL12、Lp-PLA2 水平均是影響AD患者認知功能的相關因素（P＜0.05）。見表4。

表3 Logistic 回歸分析法賦值

表4 影響AD 患者認知功能的多因素Logistic 回歸分析

2.4 血清CXCL12、Lp-PLA2 水平與影響AD 患者認知功能的相關因素的關系 血清CXCL12 與獨居、社交活動少、負性生活事件多、Lp-PLA2 均呈正相關（r=0.356、0.361、0.422、0.425，P 均＜0.05）；血清Lp-PLA2 與獨居、社交活動少、負性生活事件多均呈正相關（r=0.347、0.363、0.431，P 均＜0.05）。見表5。

表5 血清CXCL12、Lp-PLA2 水平與影響AD 患者認知功能的相關因素的關系

2.5 血清CXCL12、Lp-PLA2 水平對AD 患者認知功能損害的預測價值 血清CXCL12、Lp-PLA2 預測AD 患者認知功能損害的最佳截斷點分別為1.85μg/mL、28.88 μg/L，ROC 曲線下面積（the area under the ROC curve，AUC）分別為0.786（95%CI：0.688～0.892）、0.779（95%CI：0.687～0.875），敏感度分別為85.71%（30/35）、80.00%（28/35），特異度分別為73.33%（33/45）、71.11%（32/45），二者聯合檢測的AUC 為0.848（95%CI：0.759～0.951），敏感度和特異度分別為77.14%（27/35）、80.00%（36/45）。見圖1。

圖1 血清CXCL12、Lp-PLA2 水平預測AD 患者認知功能損害的ROC 曲線

3 討論

當AD 患者腦內老年斑核心成分β 淀粉樣蛋白在細胞基質沉淀聚集后，會產生很強的神經毒性作用，使周邊神經元變性和壞死，進而影響大腦皮層、海馬、杏仁核、基地前腦膽堿能神經系統及腦干單胺類神經核團，損害患者認知功能[7]。本研究結果顯示，病例組患者血清CXCL12、Lp-PLA2 水平均高于對照組，提示血清CXCL12、Lp-PLA2 水平在AD 患者中呈異常表達。一旦局部腦組織出現缺氧、缺血，血管內皮細胞就會大量合成并釋放CXCL12，導致機體內CXCL12 含量升高[8]。Shen 等[9]發現，腦出血患者血清CXCL12 濃度顯著增加，該指標在一定程度上可反映出血性腦卒中的嚴重程度及預后情況。Lp-PLA2 通過氧化低密度脂蛋白產生大量的溶血卵磷脂和游離氧化脂肪酸，促進各種炎癥因子產生強性致炎物質，大腦中的小膠質細胞和血液中的巨噬細胞受到炎癥刺刺激會釋放出較多的促炎細胞因子，刺激局部產生更多的Lp-PLA2，使機體內其水平顯著升高[10]。張錢林等[11]研究結果亦顯示，血管性癡呆患者血清Lp-PLA2 水平顯著高于非癡呆患者。本研究結果與上述文獻研究結果具有同質性，提示在相關疾病的研究中可重點監測血清CXCL12、Lp-PLA2 水平。

在本研究中，獨居、社交活動少、負性生活事件多、血清CXCL12、Lp-PLA2 水平均是影響AD 患者認知功能的相關因素，且血清CXCL12、Lp-PLA2 水平與獨居、社交活動少、負性生活事件多因素均呈正相關，這與既往研究結果基本一致，表明血清CXCL12、Lp-PLA2 與AD 患者認知功能損害程度具有一定關系[12-13]。當血清CXCL12、Lp-PLA2 水平分別超過1.85 μg/mL、28.88 μg/L 時，預測AD 患者認知功能損害的靈敏度分別為85.71%、80.00%，二者聯合檢測時，其特異度可提高至80.00%，再次表明血清CXCL12、Lp-PLA2 參與AD 患者認知功能損害過程。CXCL12 作為一類具有趨化活性的細胞因子，當局部腦組織缺氧、缺血時，其會與其受體CXCR4 特異性結合，通過破壞血腦屏障誘導炎癥因子向缺血損傷部位聚集，參與神經炎癥反應過程，影響患者認知功能[14]。Lp-PLA2 作為一種血管特異性炎癥酶，可與低密度脂蛋白膽固醇結合形成炎癥信號傳導通路，導致血管損傷，使神經元因缺血而發生壞死，最終導致大腦因結構和功能改變而出現認知功能異常[15]。

綜上所述，血清CXCL12、Lp-PLA2 在AD 患者中呈現異常表達，二者均與患者的認知功能損害具有一定關系，并對患者認知功能損害程度有一定的預測價值。