淫羊藿苷對生殖系統(tǒng)影響的研究進(jìn)展*

李康梅，黎明星，陳泯锜，陳秀榕，段桂嬌，戴明明，何國珍△

1 廣西中醫(yī)藥大學(xué)研究生學(xué)院，廣西 南寧 530200；2 廣西中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院；3 廣西中醫(yī)藥大學(xué)賽恩斯新醫(yī)藥學(xué)院

淫羊藿又稱為淫羊藿素、三枝九葉草、羊合葉等，性溫，味辛、甘，主要歸肝、腎經(jīng)，最早出自《神農(nóng)本草經(jīng)》，主要功效為補(bǔ)腎壯陽，祛風(fēng)除濕，屬于我國傳統(tǒng)補(bǔ)益中藥［1］。淫羊藿主要有5種，分別為心葉淫羊藿、箭葉淫羊藿、柔毛淫羊藿、巫山淫羊藿以及朝鮮淫羊藿［2］。心葉淫羊藿Epmedium brevicornuMaxim.為莖細(xì)圓柱形，莖生葉對生，二回三出復(fù)葉，小葉有長柄基部心形，葉片薄且為革質(zhì)，形狀卵圓形，上表面為黃綠色，下表面為灰綠色，無臭味微苦。心葉淫羊藿生長于海拔650～2100 m 潮濕且背光的灌木叢中。箭葉淫羊藿Epimedium sagittatum（S.Et Zucc.）Maxim.是淫羊藿屬物種中分布最廣泛的一種，不同地區(qū)分布的形態(tài)差異較大。剪葉淫羊藿株高14～90 cm，根狀莖短粗，結(jié)節(jié)狀且延展性差，一回三出復(fù)葉，卵圓形或者卵狀披針形，邊緣有細(xì)刺毛，葉片革質(zhì)，莖生葉形與根出葉極其類似，基部呈歪箭狀心形而先端逐漸變尖。柔毛淫羊藿Epimedium pubescensMaxim.葉片下表面灰色及葉柄密為白色網(wǎng)狀茸毛。柔毛淫羊藿生長于海拔300～2000 m 的灌叢中、山坡或山溝的蔭濕處。巫山淫羊藿Epimedium wushanenseT.S.Ying 根狀莖呈結(jié)節(jié)狀，堅硬，表面較多須根。一回三出復(fù)葉，邊緣有刺齒。巫山淫羊藿生長于海拔300～1300 m的山坡灌草叢中或石縫中，且分布集中在兩個地區(qū)，其中一個為四川的東部和重慶的北部；另一個為貴州東南部及湖南西南部，廣西和陜西也有少量分布但分布區(qū)域比較狹窄。朝鮮淫羊藿Epimedium koreanumNakai，二回三出復(fù)葉，小葉較長為卵形，先端又長又尖，并且葉片較薄為紙質(zhì)。朝鮮淫羊藿生長于海拔200～900 m多蔭的林下或灌叢間。日本沿海岸、朝鮮北部和中國長白山地區(qū)都有分布，在中國主要分布于吉林和遼寧的東部，黑龍江和吉林交界處也有少量分布。朝鮮淫羊藿自身朝向從西南到東北隨著經(jīng)緯度變化而變化。

淫羊藿主要含有黃酮類、多糖類、揮發(fā)油、生物堿及鉀、鈣、鎂等多種微量元素［3］。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，淫羊藿的主要活性成分為淫羊藿苷Icariin，ICA［4-5］，有治療神經(jīng)系統(tǒng)、骨骼系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)疾病以及抗炎、抗腫瘤等作用［6］。本文主要闡述淫羊藿苷對生殖系統(tǒng)的作用，為后續(xù)本課題組的實驗研究提供一定的理論支持。

1 對下丘腦-垂體-性腺軸的影響

下丘腦和垂體位于動物的中樞，下丘腦通過分泌釋放激素和釋放抑制激素，調(diào)節(jié)垂體內(nèi)細(xì)胞的分泌，后者又可以調(diào)節(jié)性腺的分泌和功能活動，從而控制生殖過程，因此下丘腦-垂體-性腺軸是生殖調(diào)控的高級中樞。淫羊藿可作用于這一高級調(diào)控中樞，發(fā)揮其促進(jìn)生殖的作用。章振保等［7］通過實驗證明淫羊藿苷可通過下丘腦-垂體-性腺軸促進(jìn)衰老大鼠分泌睪酮。汪興生等［8］運(yùn)用水提法提取效成分提取，每天SD 灌胃大鼠中藥水提液兩個月，通過血液指標(biāo)檢測LH、FSH 等相關(guān)指標(biāo)，證實淫羊藿可以作用于睪丸的間質(zhì)細(xì)胞，分泌睪酮，通過負(fù)反饋作用于垂體，影響LH 和FSH 分泌。張森［9］對垂體細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)并進(jìn)行PCR試驗，發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷能增進(jìn)垂體前葉細(xì)胞分泌卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone，F(xiàn)SH）以及促黃體生成素（luteinizing hormone，LH），可增進(jìn)垂體細(xì)胞中FSH mRNA以及LH mRNA的表達(dá)。武密山等［10］研究表明對去卵巢模型組大鼠使用50 以及100 mg/kg 的淫羊藿苷醫(yī)治后，大鼠血清E2水平、椎骨骨密度、脛骨以及下丘腦弓狀核ERβ mRNA表達(dá)提升較大，而下丘腦室旁核、視上核ERβ mRNA表達(dá)下降較大。高學(xué)勇等［11］將大鼠分為空白對照組、陰性對照組、模型組、淫羊藿苷治療組，使用放射免疫法和SABC 免疫組織化學(xué)檢測，結(jié)果顯示淫羊藿苷對血清FSH、LH 水平無明顯影響，認(rèn)為可能是由于垂體-性腺軸存在負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制作用的原因，因睪酮水平降低能增進(jìn)腺垂體前葉促性腺細(xì)胞分泌FSH、LH，睪酮水平提高可反作用削弱促性腺細(xì)胞分泌FSH、LH，而FSH、LH的分泌也受GnRH的調(diào)控。張君濤等［12］淘汰游泳后不適應(yīng)的大鼠，將剩余大鼠隨機(jī)分為對照組及不同濃度組進(jìn)行淫羊藿苷-鋅結(jié)合物灌胃，42 天后對大鼠睪丸以及前列腺等進(jìn)行稱重并計算各自指數(shù)，觀察肝或肌組織勻漿中的肝糖原以及肌糖原的含量，結(jié)果顯示不同濃度的淫羊藿苷鋅可以影響大鼠性腺發(fā)育及生育功能，對大鼠性腺發(fā)育及分泌功能均具有促進(jìn)作用。

2 對性激素的影響

大量研究表明，淫羊藿苷有明顯的性激素樣作用，不僅能夠促進(jìn)血清睪酮分泌，還能促進(jìn)雌性內(nèi)分泌系統(tǒng)，上調(diào)雌激素受體（estrogen receptor，ER）的表達(dá)并促進(jìn)體外培養(yǎng)卵母細(xì)胞的成熟和受精，同時認(rèn)為淫羊藿苷可以保護(hù)酒精致雄性小鼠的生殖損傷［11，13-14］。梁志健等［15］將雄性SD 大鼠隨機(jī)分為正常對照組、摘除右側(cè)睪丸組等5 組，分別對各組灌胃給予蒺藜淫羊藿復(fù)合物或純凈水，結(jié)果顯示蒺藜淫羊藿復(fù)合物具有一定的雄激素樣作用，可促進(jìn)睪酮分泌，改善由于睪酮分泌減少所致的性功能障礙，增加精子活率及活力。張森［9］、楊桂梅等［16］研究表明，淫羊藿苷可促進(jìn)成年雌性大鼠FSH、LH和雌激素（estradiol，E2）的分泌。盛文潔［17］也證實了淫羊藿苷可通過提高CYP17、CYP19 的表達(dá)，促進(jìn)大鼠卵巢顆粒細(xì)胞分泌E2和孕酮（progesterone，P）。張孟之等［18］研究表明，淫羊藿苷可促進(jìn)大鼠卵巢顆粒細(xì)胞增殖，升高CYP17、CYP19 mRNA 蛋白表達(dá)，促進(jìn)E2及P 的分泌。卵泡閉鎖主要是由顆粒細(xì)胞比卵母細(xì)胞和基膜細(xì)胞更早出現(xiàn)細(xì)胞凋亡的結(jié)果，而淫羊藿苷可使線粒體凋亡途徑的激活得到克制，使Bax 以及Caspase-3 基因表達(dá)降低，Bcl-2 基因的表達(dá)升高，從而削弱體外培養(yǎng)顆粒細(xì)胞凋亡以及卵泡閉鎖［19］。黃菊［20］研究表明，淫羊藿甙可抑制原始卵泡形成以及啟動，使卵泡的生長發(fā)育周期延長，減少每個周期中優(yōu)勢卵泡的個數(shù)，增加生殖細(xì)胞儲備量，從而使大鼠卵巢衰老延遲。李美玲［21］對加入藥物處理的人類顆粒細(xì)胞樣腫瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)并將其分為不同濃度組，分別檢測顆粒細(xì)胞增殖能力、雌激素、孕激素分泌等，結(jié)果表明淫羊藿苷可明顯促進(jìn)顆粒細(xì)胞雌二醇的分泌，使顆粒細(xì)胞的增殖水平上調(diào)，并在淫羊藿苷濃度為5 ug/L 時促進(jìn)作用最為明顯，認(rèn)為是淫羊藿苷通過使顆粒細(xì)胞芳香化酶基因轉(zhuǎn)錄分子通路上調(diào)而發(fā)揮的作用所致。董若曦［22］研究表明，淫羊藿苷可通過磷酸化激活PI3K/Akt/mTOR 信號通路，使化療損傷性卵巢早衰大鼠的氧化應(yīng)激水平降低，使大鼠卵巢細(xì)胞的凋亡降低，從而使大鼠化療損傷性卵巢早衰得到改善。

3 對性器官的影響

淫羊藿苷除了可以作用于性腺外，還可以直接刺激性器官，對性器官表現(xiàn)出一定的保護(hù)作用。高學(xué)勇［23］研究認(rèn)為，環(huán)磷酰胺可以阻礙睪丸產(chǎn)生精子，使生殖細(xì)胞發(fā)生凋亡，而淫羊藿苷可通過改善睪丸生精小管結(jié)構(gòu)，降低生殖細(xì)胞凋亡，升高血清睪酮濃度，促進(jìn)精子產(chǎn)生。同時，淫羊藿苷對雌性大鼠卵巢和子宮的發(fā)育也有促進(jìn)作用［9］。研究表明，淫羊藿苷可增加卵巢質(zhì)量和子宮的發(fā)育，在30～1000 μg/L 的劑量范圍內(nèi)可促進(jìn)卵泡顆粒細(xì)胞分泌雌二醇［9，13，24］。尤旭等［25］將不同濃度組的SD 大鼠飼養(yǎng)4 個月后處死，采用HE 染色法、黃嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法、免疫熒光法以及Western blotting 法檢測睪丸組織中相關(guān)因子及相關(guān)蛋白的表達(dá)水平，結(jié)果認(rèn)為淫羊藿苷可通過激活Nrf2/HO-1 信號通路使睪丸組織抗氧化能力增強(qiáng)，使自然衰老大鼠睪丸中γ-H2AX、p-p53 和p21 蛋白表達(dá)下降，使自然衰老大鼠睪丸生殖細(xì)胞DNA 損害降低。同時實驗也表明淫羊藿苷可調(diào)節(jié)Sertoli 細(xì)胞自噬水平，激活自噬，減輕Sertoli 細(xì)胞損傷，使衰老所致的大鼠睪丸生精功能衰退減慢［26］。淫羊藿苷可使精索靜脈曲張導(dǎo)致的附睪上皮組織結(jié)構(gòu)和功能損害得到修復(fù)，其機(jī)制可能是通過抑制精索靜脈曲張導(dǎo)致的氧化應(yīng)激來治療的［27］。淫羊藿苷可增進(jìn)未成年雄性大鼠腺垂體、附睪及精囊腺重量的提升，促進(jìn)生殖器官的發(fā)育，提升睪丸Leydig 細(xì)胞睪酮的分泌，促使動物精液分泌［28］。

4 對性功能的影響

章振保等［29］通過利用環(huán)磷酰胺制造生殖系統(tǒng)受損、雄激素部分缺乏的大鼠模型，然后對模型大鼠進(jìn)行淫羊藿甙和菟絲子提取物灌胃，7 天后檢測大鼠血清睪酮、LH、FSH 的含量，同時使用HE 染色和原位末端標(biāo)記法檢測睪丸組織以及陰莖海綿體平滑肌細(xì)胞的變化，結(jié)果表明淫羊藿甙可使陰莖海綿體平滑肌cGMP 濃度升高，使離體培養(yǎng)的陰莖海綿體平滑肌得到很好的松弛，促進(jìn)陰莖勃起功能，認(rèn)為其作用機(jī)制與影響NO-cGMP 通路的活性、提高cGMP水平有關(guān)。楊春［30］、章振保等［7］研究表明，淫羊藿苷可增強(qiáng)陰蒂海綿體平滑肌細(xì)胞NOS 活性，促進(jìn)一氧化氮（nitric oxide，NO）生成，使磷酸二酯酶（phosphodiesterases，PDES）受到抑制，提升NO-cGMP 通路的活性，使性刺激下陰蒂海綿體平滑肌松弛，促進(jìn)陰蒂充血脹大勃起。另外，淫羊藿苷可通過升高機(jī)體雄激素濃度以及下丘腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺（dopamine，DA）、5 羥色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）含量、改進(jìn)陰莖勃起、增加陰莖海綿體內(nèi)皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）含量、使老齡大鼠的性活動能力增加，提升性欲，加強(qiáng)勃起［31］。喬梁等［32］利用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RTPCR）技術(shù)和125I 放射免疫法分別檢測兔陰蒂海綿體中PDE5 mRNA 的表達(dá)以及淫羊藿甙對陰蒂海綿體內(nèi)磷酸二酯酶5（phosphodiesterase 5，PDE5）酶底物cGMP 濃度的影響，認(rèn)為淫羊藿甙可明顯提高陰蒂海綿體內(nèi)的cGMP 濃度，具有顯著的濃度依賴性，其可能是通過PDE5 與NO cGMP 信號通路發(fā)揮作用的。DING 等［33］研究表明，血清睪酮水平和NO濃度、下丘腦DA和5-HT水平以及eNOS、PI3K和磷酸化AKT在陰莖組織中的表達(dá)均高于對照組。淫羊藿苷的作用呈劑量依賴性增強(qiáng)。證明ICA 可以改善雄性小鼠的性功能，可能與下丘腦-垂體-性腺軸和PI3K/AKT/eNOS/NO 信號通路有關(guān)。

5 小結(jié)

隨著社會的不斷發(fā)展，生活壓力的增大，女性生殖健康的問題日益突出，如卵巢早衰，多囊卵巢綜合征等疾病發(fā)病率逐漸上升［34-35］。本研究主要綜述淫羊藿苷對下丘腦-垂體-性腺軸、性激素、性器官、性功能等方面影響，表明淫羊藿苷對生殖系統(tǒng)具有較好的保護(hù)作用，但目前并未徹底明確淫羊藿治療的作用機(jī)制，需要對淫羊藿苷進(jìn)行深入探討，為后續(xù)本課題組的實驗研究提供一定的理論支持，為生殖系統(tǒng)疾病提供更好的診治方法。