ABO血型不合新生兒溶血病與血液檢測指標關系及其診斷價值

李 怡 任曉桃 郭 靜

四川省綿陽市婦幼保健院(621000)

新生兒溶血病(HDN)為母子血型不合溶血病，不僅可破壞胎兒紅細胞，引發溶血，還可伴隨肝脾腫大、貧血、黃疸等一系列病理損害[1]。需盡早診斷，為臨床提供防治依據[2]。產前免疫血液學是常用檢測方式，通過檢測母體血型抗體效價和致敏紅細胞，可預測HDN患病率，但兩種測定條件有限，無法在基層醫院推廣，延誤治療最佳時機[3]。而如何利用基本常規檢查正確判斷HDN是當前研究熱點。血液檢查具有操作簡便、性價比高、適應性廣等優勢，近年有學者[4]將其推廣在HDN檢測中，可預測HDN患病率，為臨床診治提供依據，但血液檢查與ABO血型不合新生兒溶血病相關性仍處于探索階段。本文分析了HDN血型分布情況，探索血液檢查指標預測ABO血型不合新生兒溶血病效能和相關性。

1 資料和方法

1.1 資料

回顧性分析2016年4月-2021年4月本院分娩孕婦的2565例基本資料。孕婦年齡(27.9±3.6)歲，孕周(36.5±2.2)周，體重(65.4±5.5)kg；剖宮產1112例，順產1453例。納入標準：①父親為非O型血，母親不規則抗體篩查為陰性；②新生兒出現黃疸等癥狀。排除標準：①合并嚴重腦缺氧、缺血性疾病；②存在先天性心功能不全。本研究符合《赫爾辛基宣言》的倫理審查。

1.2 檢測方法

抽取新生兒臍帶血和夫妻雙方抗凝血分離紅細胞和血清，進行孕婦不規則抗體篩查和血型鑒定。新生兒溶血進行血清紅細胞抗體稀釋實驗、直接抗球蛋白實驗、游離抗體測定，在檢測孕婦體內IgG抗A(B)抗體效價時使用微柱凝膠抗球蛋白技術。血液指標檢測：對新生兒進行常規血常規、凝血功能監測，使用XT-2000I型號全自動血細胞分析儀(Sysmex公司)、半自動免疫比濁儀(Orion公司)檢測總膽紅素、平均紅細胞血紅蛋白濃度、紅細胞和血小板體積、直接膽紅素、血小板、血紅蛋白、中性粒細胞。新生兒溶血病判定標準[5]：①抗體釋放試驗陽性或直接Coombs試驗陽性；②ABO系統母子血型不合；③血清膽紅素水平升高，部分人群出現蒼白、皮膚瘀斑、胸腔積液、全身水腫、腹水。

1.3 統計學處理

2 結果

2.1 HDN陽性率分布

2565例分娩孕婦，發生HDN 109例(溶血組)，4.2%；其中O-A-A型，3項陽性16例、2項陽性2例)；O-B-B型均為3項陽性；O-AB-A型3項陽性20例，2項陽性3例；O-AB-B型3項陽性17例，2項陽性2例。各血型組合檢測陽性率存在差異(χ2=7.531，P=0.0006)。見表1。

表1 不同AB0血型組合不同抗體檢測HDN陽性分布[例(%)]

2.2 抗價效價與HDN發生關系

IgG抗A(B)抗價效價≥1024者中檢測出的HDN陽性率高于其他抗價效價者(P<0.05)。見表2。

表2 不同ABO抗價效價孕婦HDN陽性分布

2.3 HDN與血液指標

溶血組與非溶血組直接膽紅素、血小板、血小板平均體積、平均紅細胞體積、平均紅細胞血紅蛋白含量、血小板分布寬度比較無差異(P>0.05)，溶血組總膽紅素、平均紅細胞血紅蛋白濃度、中性粒細胞均高于非溶血組，血紅蛋白低于非溶血組(均P<0.05)。見表3。

表3 兩組血液檢測指標水平比較

2.4 HDN發生因素分析

以新生兒是否發生溶血為因變量，將單因素篩查有意義的指標為自變量，采用二元logistic回歸分析。總膽紅素、平均紅細胞血紅蛋白濃度、血紅蛋白、中性粒細胞異常為影響因素(P<0.05)。見表4。

表4 發生HDN時各血液指標二元logistic分析

2.5 相關性分析

經Spearman法分析，HDN與血紅蛋白含量呈負相關性(r=-0.166)，與中性粒細胞、平均紅細胞血紅蛋白濃度、總膽紅素呈正相關性(r=0.297、0.255、0.349)(P<0.001)。

2.6 ROC曲線分析

經ROC曲線分析，總膽紅素、平均紅細胞血紅蛋白濃度、中性粒細胞、血紅蛋白早期預測HDN的AUC，將4項指標納入logistic回歸分析，根據回歸系數值擬合4項聯合診斷的數值計算公式：4項聯合=總膽紅素+(-0.062)/-0.841)×平均紅細胞血紅蛋白濃度+(-0.416)/(-0.841)×中性粒細胞+0.176/(-0.841)×血紅蛋白，經分析，4項聯合早期預測HDN的AUC為0.991。見表5。采用Z檢驗各項檢測的AUC均有差異，4項聯合高于總膽紅素、平均紅細胞血紅蛋白濃度、中性粒細胞、血紅蛋白單獨檢測(Z=1.687、6.261、3.966、10.244，P<0.05)。

表5 各指標預測HDN的價值

3 討論

母嬰血型不合所致的HDN是發生在早期新生兒、胎兒中一種免疫溶血性疾病，大多是因母體血型抗體經過胎盤進入胎兒血循環，并作用于紅細胞引發的溶血，不僅可出現明顯膽紅素生成增多，還可在新生兒娩出后24h加重黃疸，常伴有肝脾腫大、水腫、貧血，嚴重時可誘發膽紅素腦病，造成不可逆神經系統后遺癥，甚至威脅新生兒生命安全。故需盡早診斷，從而控制疾病發展[6-7]。

經調查[8]，ABO系統引起的HDN多發生于O型母親，多是因O型血清中含有免疫性抗B和抗A成分，可生成IgG 7S-r球蛋白，此種蛋白可通過胎盤引起HDN。對此，本研究將0型母親作為調查對象，分析HDN血型分布情況。結果顯示，HDN發生率為4.25%，其中HDN患病率最高，其次O-AB-A型，推測是因胎兒紅細胞中的抗原決定簇A位點較B位點多，故發生溶血A型較B型多，相應的O-AB-A型患病率也高于O-AB-B型者[9]。同時IgG抗A(B)抗價效價≥1024者HDN發生率高于其他階段抗價效價，原因是母體內存在破壞胎兒紅細胞的血型抗體，雖然新生兒不一定會患有HDN，但當抗體效價超過1024時可造成AB0 HDN。李菁[10]學者研究證明血清IgG抗A(B)抗價效價≥1024，可增加HDN患病率。即便血清IgG抗A(B)抗價效價靈敏性較高，但須在標準條件下完成檢測，故限制了該項方法在基層使用[11]。

經二元logistic分析，臨床多種血液指標可作為影響HDN患病率的獨立因素，其中紅細胞血紅蛋白濃度、中性粒細胞、總膽紅素、血紅蛋白4項指標無論經二元回歸分析還是Spearman法分析，均呈現相關狀態。推測原因是HDN大部分因溶血引起，短時間內可導致紅細胞大量被破壞，使得血紅蛋白下降，紅細胞血紅蛋白濃度、總膽紅素、中心粒細胞升高[12]。一方面中心粒細胞增高是因大量血細胞被破壞，導致應激反應邊緣池內大量細胞進入血液循環，使得中性粒細胞增高，由于此項反應發生在血紅蛋白凝聚前，故周圍紅細胞數和血紅蛋白含量呈下降趨勢，中心粒細胞卻明顯增多，因此可將其作為內出血重要依據[13]；另一方面胎兒出現溶血性貧血后，可因血漿容量、紅細胞容積減少或擴張，導致血容量穩定性受到影響，干擾血漿容量代償，使得總膽紅素和紅細胞血紅蛋白濃度增高[14-15]。而直接膽紅素作為黃疸重要評價依據之一，本次研究顯示，兩組新生兒直接膽紅素未見差異性，可能是因本次檢測的新生兒未結束溶血過程，未出現膽汁淤積，故不會引起直接膽紅素明顯升高[16]。從預測角度分析，4項聯合預測HDN效能最高，證明血液指標在早期預測HDN患病率有臨床價值。提示臨床盡早開展相關檢測，為治療HDN提供指導依據，以降低或避免HDN發生[17]。

綜上所述，AB0血型不合的HDN血型主要以0-A-A型為主。而總膽紅素、血紅蛋白、紅細胞血紅蛋白濃度、中性粒細胞等血液指標與HDN存在相關性，具有一定預測價值，可為臨床早期診斷提供參考依據。但本次研究仍存在不足之處，首先HDN病例量較少，其次血液指標僅分析了常用幾類，未探索其與其他血液指標的相關性，故需擴大樣本深入研究。