一例鯉、鯽暴發性出血病的診治

劉家星，陳霞，陳健，歐陽萍，陶麗竹，李良玉，魏文燕，楊馬，唐洪，張小麗

(1.成都市農林科學院，四川 成都 611130；2.四川農業大學魚病研究中心，四川 成都 611130)

一、基本情況

1.養殖情況

本次發病區域位于成都市新津區集中連片養殖池塘，發病池塘主要養殖品種為鯉、鯽，養殖池塘水域面積大小不一，集中連片區域池塘總面積1 000余畝。本次選取發病較為嚴重的1個養殖戶池塘，兼顧周邊養殖場。該養殖戶的養殖池塘面積為40畝，水源為自然降水、地下水以及濕地沉降水。通過現場觀察，池塘水體較為清澈，無漂浮物，在餌料臺附近可見少許漂浮油膜，水面散在性漂浮病死魚；增氧機處于常開狀態。

2.水質檢測

水質檢測時間為14時左右，使用采水器取水面下15厘米水體。池塘水溫10.3℃、溶氧8.8毫克/升、pH 8.04、氨氮1.2毫克/升、亞硝酸鹽0.05毫克/升，氨氮和亞硝酸鹽含量偏高。

3.發病情況

該養殖區域從2021年12月起陸續出現發病情況，最初以鯉魚為主，后期擴散至鯽魚養殖池塘。根據部分養殖戶反饋，最早發現的病例在成都市蒲江縣流水養殖池塘。據了解，本區域內養殖鯉、鯽苗種均購自蒲江一帶苗種繁育場，草魚購自廣東一帶苗種繁育場。

該養殖戶主要養殖品種為鯉、鯽，搭配鰱、鳙和草魚。鯉、鯽均為當年苗種，購自蒲江一帶苗種繁育場，放養大規格苗種5 000尾/畝。2022年1月底該養殖戶進行了1次拉網捕魚，拉網后池塘未進行消毒和采取其他措施。2月初池魚開始發病，初期每天死亡幾尾，后期發展至10～15千克，發病最高期日死亡量達150千克左右。發病個體大小不一，死亡個體鯉均重在600克左右、鯽在400克左右，發病趨勢呈現出典型的“急、快、廣、高”。在進出水口附近可觀察到病死魚沉在池底，部分淺水區域可見病魚在池底呆滯不動或漂浮于水體中，對驚嚇不敏感。

二、解剖學觀察

選取典型發病鯉、鯽進行觀察，鯉體表多見散在充血、出血(圖1a)，鰓蓋前段出現1個較大創口，邊緣潰瘍發白，鰓蓋充血、出血(圖1b)，鰭條及基部充血、出血(圖1c)，腹部可見大范圍充血、出血(圖1d)，肛門紅腫，鱗基部充血、出血、松動易落，有豎鱗現象(圖1e)，鰓絲嚴重充血(圖1f)，血液凝固性變差，易溶血；鯽的口部周圍嚴重充血、出血，并伴有吻部潰爛(圖1g)，鰓蓋周邊可見散在分布潰瘍灶，體表偶見充血、出血點位，鰓絲嚴重充血(圖1h)，鱗松動易落。

現場剖解，鯉未見腹水，精巢發育約Ⅲ期，未見出血點(圖1i)，腹膜上有散在出血點，腎臟腫大、易碎，脾臟腫大、發黑、質地較脆，膽囊充盈呈墨綠色，肝臟腫大、易碎、有典型的放射形絲狀樣(花斑)，腸道未見食物、黏液較多、內壁有散在出血點；鯽卵巢發育約為Ⅳ期，卵巢膜明顯充血，鰾上可見散在出血點，腎臟腫大、易碎，脾臟腫大、發黑，質地較脆，膽囊充盈呈墨綠色，肝臟腫大、易碎，腸道未見食物、黏液較多，內壁有散在充血、出血點。

圖1 患病鯉、鯽典型病變

三、病原學檢測及結果

1.寄生蟲

制作病魚體表黏液涂片、鰓絲壓片、腸黏液涂片、腸黏膜刮片以及血液涂片，在顯微鏡下分別觀察，均未發現寄生蟲，排除寄生蟲感染的可能性。

2.細菌

無菌操作下從病魚肝、脾、腎取樣接種BHI平板，培養后觀察發現，在接種的平板上長出圓形、邊緣光滑、中央凸起的黃白色優勢菌落；對優勢菌落進行革蘭氏染色觀察，結果顯示分離所得的優勢菌均為革蘭氏陰性桿菌，且均為散在排列的短桿狀菌體(圖2)；對細菌分離純化，共得到3株菌株，分別編號為1S、2G和L2S。

圖2 分離菌株革蘭氏染色

對純化后的菌株進行16S rRNA檢測，測序結果在GenBank上進行Blast比對。結果發現，1S序列與溫和氣單胞菌(Aeromonas sobria)序列相似性達97.31%，2G序列和L2S序列與腐希瓦氏菌(Shewanella putrefaciens)序列相似性達97.91%和98.52%。對分離到的3個菌株進行藥物敏感性試驗結果見表1。

表1 分離菌株藥物敏感性試驗結果

3.病毒

根據病魚的病變特征，進行鯉、鯽常見病毒病的PCR檢測。電泳結果顯示，空白對照無條帶，陽性對照均有條帶，被檢測樣品CEV、KHV、SVCV均無條帶出現，判定為CEV、KHV、SVCV陰性。

四、治療建議

1.盡快捕撈死魚

死亡及瀕死魚要統一收集，待相關保險定損人員確定后實施無害化處理，減少進一步交叉傳播的可能性。

2.減少日常投喂

根據發病情況減少日常投喂量，首先降低因過量采食對患病魚造成的負擔，其次降低未被攝入的飼料對水體造成影響的風險。

3.餌料中適當加入植物多糖制劑

拌料投喂黃芪多糖等，以增強魚體的免疫力。不可使用高刺激性殺蟲和消毒藥物，不得隨意使用抗生素等藥物盲目治療。

4.適時開增氧機

根據水體溶氧情況開增氧機，不需要全天開啟，以開四周增氧機為宜。

5.內服外消

在條件允許的情況下，每天向池塘加注少量新鮮、干凈的活水。外用含氯消毒劑全池潑灑，根據藥敏試驗，用氟苯尼考拌料投喂5～7天，使用劑量按照使用說明書。

五、討論

暴發性出血病在鯉科魚中較為常見，表現為體表多部位或體內多器官充血、出血。引起鯉、鯽出血病的病因有多種，較為常見的為病毒和細菌以及二者的混合感染。本例分離得到溫和氣單胞菌和腐敗希瓦氏菌兩種細菌，提示引起本次鯉、鯽暴發性出血病的病因為細菌感染，而非病毒感染所致。

腐敗希瓦氏菌在水產品加工與貯藏相關領域報道較多，少有報道其作為病原菌感染魚類。但有相關研究顯示，腐敗希瓦氏菌是一種人畜共患病原菌，可引起人類軟組織感染、心膜炎等。溫和氣單胞菌是一種淡水養殖中的常見致病菌，該菌可引起魚類出血病和潰瘍病等，其危害程度與嗜水氣單胞菌相當。

值得注意的是，本次調查區域發病前，在苗種購買地也出現過類似發病情況，不排除苗種攜帶病原的可能性。由于誘發水生動物疾病的因素由宿主、環境和病原共同決定，在調查過程中發現養殖池塘水體氨氮和亞硝酸鹽含量偏高，加之發病期間氣溫變動頻繁，這可能造成魚處于應激狀態，抵抗疾病能力下降，最終誘發疾病。