不同殺菌劑對蘋果黑星病菌的毒力測定

王 華，李 鵬

（1.伊犁職業技術學院，新疆伊寧 835000；2.先正達（中國）投資有限公司，北京 100005）

蘋果黑星病菌［Venturia inaequalis(Cooke)Winter］是引起蘋果黑星病的病原真菌，該病菌在蘋果生長季節里能連續不斷地產生大量分生孢子，反復侵染寄主。蘋果樹一旦被蘋果黑星病菌感染，發病迅猛，蔓延快速。目前，蘋果黑星病的防治主要依賴于化學藥劑，隨著殺菌劑的持續施用，在很多地區已發現蘋果黑星病菌對腈菌唑和苯醚甲環唑產生了不同程度的抗藥性[1-3]，導致殺菌效果減弱。

蘋果黑星病發生范圍較廣，在我國黑龍江、吉林、內蒙古、遼寧、河南、河北、甘肅、寧夏、山東、山西、陜西、新疆、四川、云南等地都有分布，尤其在部分地區發生嚴重，已影響到蘋果產業的可持續發展[4-5]。為尋找防治蘋果黑星病更加有效的殺菌劑，本研究篩選了7種殺菌劑，并測定了其對蘋果黑星病菌的室內毒力，以期為田間防治蘋果黑星病藥劑的選擇和輪換提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試菌株：新疆伊犁地區蘋果黑星病菌代表性菌株。

供試藥劑：10%苯醚甲環唑WG，天津市華宇農藥有限公司；50%啶酰菌胺WG，巴斯夫有限公司；50%嘧菌環胺WG、20%氟唑菌酰羥胺SC，先正達作物保護有限公司；80%嘧霉胺WG，煙臺科達化工有限公司；20%吡噻菌胺SC，日本三井化學AGRO株式會社；25%吡唑醚菌酯SC，江西海闊利斯生物科技有限公司。

1.2 試驗方法

采用菌絲生長速率法測定各藥劑對病原菌生長的抑制情況。將稀釋后的藥劑與熔化后的PDA培養基以1∶9的體積比混合均勻，制成含藥平板。每種藥劑設置5個濃度梯度，每個濃度設置3個重復，用加入相同體積無菌水的PDA培養基作為對照。藥劑有效質量濃度見表1。

表1 供試殺菌劑質量濃度梯度

將蘋果黑星病菌培養20 d后，用5 mm滅菌打孔器打取若干菌餅，供毒力測定使用。將菌餅移接至含藥培養基及對照培養基中央，在18℃，光照1 200 lx，12 h黑暗，12 h光照的條件下培養15 d后，用十字交叉法測量菌落直徑并拍照。

1.3 數據分析

按式（1）計算菌絲生長抑制率。使用SPSS19.0軟件基于Probit回歸法[6]對所得數據進行毒力回歸方程分析，得到半數有效濃度（EC50）。

2 結果與分析

2.1 7種殺菌劑對蘋果黑星病菌的抑制效果

試驗結果發現7種供試殺菌劑對蘋果黑星病菌菌絲均有一定的抑制作用，14.280 μg/mL 10%苯醚甲環唑WG、333.300 μg/mL 50%啶酰菌胺WG、500.00 μg/mL 50%嘧菌環胺WG、53.330～533.300 μg/mL 80%嘧霉胺WG、6.666×10-3～6.666×10-2μL/mL 20%吡噻菌胺SC、1.923×10-2～1.923×10-1μL/mL 25%吡唑醚菌酯SC、4.00～40.00 μL/mL 20%氟唑菌酰羥胺SC對蘋果黑星病菌的菌絲抑制率都可達到100.00%。藥劑20%吡噻菌胺SC和25%吡唑醚菌酯SC在有效質量濃度較低時具有很高的菌絲抑制率；10%苯醚甲環唑WG、50%啶酰菌胺WG、25%吡唑醚菌酯SC、20%氟唑菌酰羥胺SC也表現出較好的抑制率，而菌絲抑制率最差的是50%嘧菌環胺WG。

表2 不同殺菌劑對蘋果黑星病菌的抑制效果

2.2 7種殺菌劑對蘋果黑星病菌室內毒力

從表3可知，R2值均大于0.70，說明毒力回歸方程與觀測值擬合程度較好。7種供試殺菌劑中，對蘋果黑星病菌菌絲的EC50值從小到大依次是20%氟唑菌酰羥胺SC、25%吡唑醚菌酯SC、20%吡噻菌胺SC、10%苯醚甲環唑WG、50%啶酰菌胺WG、80%嘧霉胺WG和50%嘧菌環胺WG。毒力最好的是20%氟唑菌酰羥胺SC，EC50值為1.349 9×10-5μL/mL；其次為25%吡唑醚菌酯SC，EC50值為2.967 6×10-5μg/mL；最差是50%嘧菌環胺WG，EC50值為4.316 2 μg/mL。

表3 7種殺菌劑對蘋果黑星病菌室內毒力測定結果

3 結論與討論

目前，世界各地蘋果產區蘋果黑星病菌種群對苯醚甲環唑和腈菌唑已經具有了耐藥性和抗藥性[1-3]，蘋果黑星病菌的抗性突變體能改變氧化酶、呼吸作用等，使黑星病菌對嘧菌酯由敏感變成抗藥。也有研究表明，蘋果黑星病菌的抗藥性同DMI類殺菌劑的施用次數呈線性正相關。本研究選用7種殺菌劑對蘋果黑星病菌進行毒力測定。結果表明，7種殺菌劑在不同濃度下對蘋果黑星病菌均有不同程度的抑制作用。EC50值從小到大依次是20%氟唑菌酰羥胺SC、25%吡唑醚菌酯SC、20%吡噻菌胺SC、10%苯醚甲環唑WG、50%啶酰菌胺WG、80%嘧霉胺WG和50%嘧菌環胺WG。抑菌效果最好的是20%氟唑菌酰羥胺SC，其次是25%吡唑醚菌酯SC，其中20%氟唑菌酰羥胺SC、25%吡唑醚菌酯SC和20%吡噻菌胺SC 3種殺菌劑的抑菌效果都優于生產上常用的10%苯醚甲環唑WG。本研究結果與郭健等[9]的研究一致：氟唑菌酰羥胺和吡唑醚菌酯對蘋果黑星病菌分生孢子萌發具有較好抑制作用。因此，上述藥劑可進行田間試驗以進一步明確防治效果。