“黃連-干姜”藥對用于治療潰瘍性結(jié)腸炎研究進(jìn)展

余 玲

(江西醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校 藥學(xué)院，江西 上饒 334000)

中醫(yī)學(xué)將潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative colitis，UC)歸屬于“痢疾”“腸澼”“泄瀉”“滯下”“下利”等病的范疇，《潰瘍性結(jié)腸炎中醫(yī)診療專家共識意見(2017)》將UC分為7種不同的證型[1]，包括大腸濕熱證、熱毒熾盛證、脾虛濕蘊證、脾腎陽虛證、肝郁脾虛證、陰血虧虛證及寒熱錯雜證。UC的基本病變在腸，病機(jī)特點復(fù)雜，多概括為寒熱錯雜、本虛標(biāo)實[2]。因此，治療時不能純用寒涼藥或溫補(bǔ)藥，應(yīng)當(dāng)根據(jù)病證的寒熱虛實采用寒溫并用、標(biāo)本兼顧的治療方法，如現(xiàn)代中醫(yī)常用烏梅丸治療UC[3]。

其中，“黃連-干姜”藥對是一組常用的寒熱藥對，兩味藥均始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，黃連味苦寒，可用于治療“腸澼”“腹痛”“下利”；干姜味辛溫，可用于治療“腸澼”“下利”。黃連有清熱燥濕、瀉火解毒的功效，主治濕熱痞滿、嘔吐吞酸、濕熱瀉痢等癥，干姜具有溫中散寒、回陽通脈、溫肺化飲的功效，主治腹痛、嘔吐、泄瀉等[4]。可見，黃連、干姜均具有治療痢疾、泄瀉等作用，黃連主治濕熱痢疾，干姜主治虛寒下利，歷代醫(yī)家及現(xiàn)代中醫(yī)臨床多將二者配伍應(yīng)用于治療“痢疾”“下利”等。現(xiàn)代研究表明黃連、干姜均具有抗炎等相關(guān)藥理活性，對UC具有一定的治療作用。

1 “黃連-干姜”藥對配伍引證

黃連-干姜藥對配伍最早源自張仲景《傷寒論》，該書記載了多首“黃連-干姜”配伍的經(jīng)典方劑，如烏梅丸，“主久利”，近年來用于治療UC也取得較好的療效[5]。黃連苦寒清熱，厚腸止利，干姜辛溫散寒，溫中止瀉，一寒一熱，辛開苦降，多用于寒熱錯雜的痢疾、泄瀉，二藥配伍使用能減弱黃連的苦寒之性，緩解其敗胃傷脾[6]。通過查閱收載“黃連-干姜”配伍用于治療“痢疾”“下利”等病的部分文獻(xiàn)，包括對后世影響較大的醫(yī)書古籍以及官方整理匯編的方劑叢書等，并將其組成與用法分列如下。

《外臺秘要》卷二十五引《隱居效驗方》記載：“主下部絞痛，重下，下赤白方。當(dāng)歸，黃柏，黃連，干姜各二兩。右四味，搗篩，煮取烏梅汁服方寸匕，日三。若腹中絞痛加當(dāng)歸，下赤加黃連，下白加干姜，大效神良，秘之。”[7]

《千金方》卷十五記載：“法曲一升，附子，干姜，黃連，黃柏，桂心各三兩，蜀椒半兩，烏梅二升半，大麥糵一升，吳茱萸四兩。上為末，煉蜜為丸，如梧桐子大。食后服十丸，每日三次，三食三服，加至二十丸，亦可至四十丸。主治數(shù)十年痢。”[8]

《太平圣惠方》卷五十九記載：“干姜三分，黃連三分，桂心三分，木香半兩，厚樸一兩半，當(dāng)歸三分。上為細(xì)散，每服二錢，以粥飲調(diào)下，不拘時候。主治膿血痢，腹痛，不欲飲食。”[10]

《圣濟(jì)總錄》卷一七八記載：“干姜一分，黃連三分，人參三分，肉豆蔻一枚，當(dāng)歸三分，厚樸半兩。上為細(xì)散，每服半前匕，以粥飲調(diào)下，空心，午后各一服。主治小兒下痢膿血，腹痛腸鳴。”[11]

《衛(wèi)生總微》卷十一記載姜連丸：“黃連，龍骨，白石脂，川姜，枯礬各一兩。上為末，以粟米粥為丸，如麻子大。每服三十丸，乳食前米飲送下，主治小兒諸利。”[12]

《醫(yī)心方》卷十一引《廣濟(jì)方》記載：“黃連一兩，干姜一兩，熟艾一兩，附子一枚，蜀椒十四粒，阿膠如手指大，上切。以水五升，煮取二升五合，絞去滓，納膠，更上火煎令膠烊，分溫三服。主治雜痢。”[13]

黃連干姜湯，方出《丹溪心法》卷二，名見《醫(yī)統(tǒng)》卷三十六。干姜一錢，當(dāng)歸二錢半，烏梅三個，黃柏一錢半，黃連一錢。上銼，作一服。水煎，食前服。主治痢疾[14]。

《醫(yī)略六書》卷二十八記載：“干姜一兩，黃連一兩，白術(shù)二兩，阿膠二兩，川芎一兩，木香一兩。上為末，烏梅肉三兩，醋煮為丸。每服三錢，白痢，砂仁湯送下；赤痢，砂糖湯送下。主治孕婦赤白痢，脈緊數(shù)者。”[15]

《本草綱目》草部第十三卷引《杜壬方》中記載姜連散：“用宣連一兩，干姜半兩，各為末，收。每用連一錢，姜半錢，和勻，空心溫酒下，或米飲下，神妙。主治氣痢后重，里急或下泄。”[16]

羅光芝等[17]通過中醫(yī)傳承輔助平臺對《中醫(yī)方劑大辭典》進(jìn)行檢索，提取到492首含“黃連-干姜”藥對的方劑，主治疾病為痢疾、泄瀉。由此可見，歷代醫(yī)家包括現(xiàn)代臨床常將黃連與干姜配伍用于治療痢疾、泄瀉等病，這為“黃連-干姜”藥對配伍應(yīng)用于UC的治療研究提供了充足的證據(jù)。

2 “黃連-干姜”有效組分及其有效成分與潰瘍性結(jié)腸炎相關(guān)研究

黃連為毛茛科植物黃連CoptischinensiFranch.、三角葉黃連CoptisdeltoideaC.Y. Cheng et Hsiao或云連CoptisteetaWall.的干燥根莖。黃連化學(xué)成分主要分為生物堿類成分和非生物堿類，周瑞等[18]統(tǒng)計研究發(fā)現(xiàn)，目前已從黃連中分離出133種化學(xué)成分，其中生物堿類是最主要的藥效成分，已知的黃連生物堿類成分共計44種，可分為小檗堿類、原小檗堿類、簡單異喹啉類、芐基異喹啉類和其他生物堿，包括小檗堿、羥基小檗堿、巴馬汀、非洲防己堿、藥根堿、小檗紅堿、黃連堿、8-氧化小檗堿、去氧海拉汀、漢防己堿等。其中，黃連生物堿中以小檗堿的含量最高[19]。

干姜為姜科植物姜ZingiberofficinaleRosc.的干燥根莖，已發(fā)現(xiàn)有效化學(xué)成分百余種，主要包含姜辣素類、揮發(fā)油類、二苯基庚烷類等，其中姜辣素類和揮發(fā)油類是干姜主要生物活性物質(zhì)[20]。干姜揮發(fā)油類包含α-姜烯、β-派烯、β-紅沒藥烯等；姜辣素類主要囊括姜酚類、姜二醇類、姜烯酚類、姜酮姜二酮類等化學(xué)成分[21]，如代表性有效成分主要包括6-姜辣素、8-姜辣素、10-姜辣素、6-姜烯酚、6-姜酮酚等[22]。干姜姜辣素類、揮發(fā)油類物質(zhì)主要存在于干姜油中，可通過超臨界CO2萃取等方法提取獲得，史琪榮等[23]通過GC/MS對干姜超臨界CO2提取得的干姜油進(jìn)行定性分析鑒定出52種成分，主要包括姜烯、α-姜黃烯、β-倍半水芹烯、β-甜沒藥烯、姜酮、β-桉葉醇、二氫辣椒素等成分。

現(xiàn)代研究表明黃連生物堿類、干姜姜辣素類、揮發(fā)油類均具有抗炎、抗氧化等相關(guān)藥理活性[24- 25]，對UC表現(xiàn)出不同的抗炎活性。

2.1 黃連總生物堿及其有效成分與潰瘍性結(jié)腸炎相關(guān)生物活性

小檗堿是用于治療UC最常用的有效成分之一，因抗炎活性較強(qiáng)，可治療多種炎癥性疾病[26]。大量研究表明，小檗堿在治療2，4，6-三硝基苯磺酸(2，4，6-trinitrobenzenesulfonicacid，TNBS)、葡聚糖硫酸鈉(Dextran sulfate sodium，DSS)及乙酸誘導(dǎo)的結(jié)腸炎模型、基因敲除動物模型和LPS誘導(dǎo)的腸道損傷等方面表現(xiàn)出潛在的優(yōu)勢[27]。如Zhai等[28]研究發(fā)現(xiàn)小檗堿作用于DSS誘導(dǎo)的UC小鼠可通過抑制細(xì)胞磷脂酶A2的活性，抑制UC的炎癥反應(yīng)。小檗堿可通過多種途徑緩解UC炎癥反應(yīng)，如Chen等[29]研究發(fā)現(xiàn)小檗堿可通過調(diào)節(jié)腸道菌群來調(diào)節(jié)糞便代謝產(chǎn)物，從而改善5-氟尿嘧啶引起的腸道黏膜炎癥。Li等[30]發(fā)現(xiàn)小檗堿可通過調(diào)節(jié)腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞-腸上皮細(xì)胞-免疫細(xì)胞相互作用發(fā)揮對UC的保護(hù)作用。此外，王佳俊等[31]通過文獻(xiàn)研究，發(fā)現(xiàn)小檗堿可通過調(diào)節(jié)JAK/STAT、NF-κB、PI3K/Akt、MAPK、Nrf2、ERS及MLCK/MLC等多種信號通路，具有保護(hù)腸黏膜屏障、恢復(fù)機(jī)體正常免疫應(yīng)答、抗氧化應(yīng)激等藥理活性，對UC具有良好的治療效果。黃連生物堿代表性成分小檗堿與UC相關(guān)生物活性研究非常豐富，可見其對UC具有突出的藥效作用。

除了小檗堿抗炎作用顯著以外，黃連生物堿中其他成分對UC也表現(xiàn)出顯著的藥效作用。劉文等[32]研究葛根芩連湯治療UC的譜效關(guān)系，發(fā)現(xiàn)發(fā)揮藥效作用是黃連堿、表小檗堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸藥根堿、鹽酸小檗堿等多種成分共同作用的結(jié)果。Zhang等[33]發(fā)現(xiàn)巴馬汀通過抑制色氨酸代謝和調(diào)節(jié)腸道菌群來改善小鼠結(jié)腸炎。Mai等[34]研究發(fā)現(xiàn)巴馬汀通過促進(jìn)線粒體自噬介導(dǎo)的NLRP3炎癥小體失活減輕DSS誘導(dǎo)的UC。香連丸是治療濕熱痢疾的經(jīng)典方劑，研究表明黃連生物堿和木香揮發(fā)油是香連丸治療UC的活性部位[35-36]，Liu等[37]使用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析香連丸定量成分對UC的治療效果，其中黃連堿、小檗堿、巴馬汀、小檗紅堿、藥根堿等與UC相關(guān)。

黃連生物堿活性成分包含于黃連總生物堿提取物中，對UC具有較好的治療作用。蔣曉梅等[38]研究黃連總生物堿對UC模型大鼠的影響，結(jié)果表明黃連總生物堿通過激活PPARγ信號通路、抑制p38MAPK與NF-κB信號通路下調(diào)炎性因子水平發(fā)揮抗炎作用，達(dá)到緩解結(jié)腸組織損傷、促進(jìn)結(jié)腸黏膜修復(fù)的效果。胡元利等[39]通過對小鼠進(jìn)行疾病活動指數(shù)評分、測定結(jié)腸組織丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量、觀察結(jié)腸病理切片等指標(biāo)綜合比較黃連總生物堿與鹽酸小檗堿對UC的治療效果，結(jié)果表明相同劑量下黃連總生物堿比鹽酸小檗堿表現(xiàn)出更好的藥理作用。崔祥等[40]發(fā)現(xiàn)黃連生物堿類成分具有多種代謝作用，能顯著抑制病原菌并促進(jìn)益生菌生長，如抑制腸桿菌、腸球菌等生長，促進(jìn)乳酸菌、雙歧桿菌等生長，發(fā)揮改善腸道微生態(tài)環(huán)境的功能。王鑫喆等[41]通過文獻(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)黃連生物堿能調(diào)控腸道菌群的構(gòu)成，改善腸道菌群失調(diào)，恢復(fù)腸道屏障完整性，對腸道局部疾病有治療作用。

綜上所述，黃連總生物堿及其有效成分具有與UC相關(guān)的生物活性，能夠通過多種途徑發(fā)揮抗炎等藥理作用，對UC具有較好的治療效果。

2.2 干姜油及其有效成分與潰瘍性結(jié)腸炎相關(guān)生物活性研究

干姜姜辣素與揮發(fā)油具有抗炎和抗氧化作用[42]。干姜揮發(fā)油能劑量依賴減輕乙酸誘導(dǎo)的UC的炎癥癥狀[43]。近年來，干姜油中姜辣素類成分抗炎作用研究較為豐富，干姜姜辣素能抑制LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞表達(dá)的炎癥反應(yīng)，具有明顯的抗炎活性[44]。有學(xué)者通過代謝組學(xué)方法研究干姜和炮姜活性物質(zhì)對DSS誘導(dǎo)UC小鼠的干預(yù)作用，并結(jié)合RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞體外抗炎實驗，發(fā)現(xiàn)干姜姜烯酚類抗炎效果較優(yōu)，初步證明姜烯酚類化合物可能是干姜和炮姜發(fā)揮功效作用的物質(zhì)基礎(chǔ)[45]。

在姜辣素類有效成分研究中，6-姜辣素表現(xiàn)出良好的抗炎、抗氧化作用。如DSS誘導(dǎo)的UC小鼠模型中，6-姜辣素可明顯緩解小鼠體質(zhì)量減輕，逐步修復(fù)DSS引起的受損腺體結(jié)構(gòu)，顯著降低腸組織中IL-17、IL-1、TNF-α水平，增加IL-10水平，抑制誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)免疫表達(dá)和髓過氧化物酶(Myeloperoxidase，MPO)及MDA水平，增強(qiáng)抗氧化酶的活性、增加谷胱甘肽(Glutathione，GSH)含量，通過調(diào)節(jié)NF-κB、Wnt/β-catenin信號通路與Th17/Treg的細(xì)胞平衡，并激活腺苷單磷酸激活蛋白激酶(AMPK)發(fā)揮抗炎作用，減輕UC小鼠的炎癥損傷[46-50]，還可通過抗炎、抗氧化作用對UC引起的睪丸損傷發(fā)揮保護(hù)作用[51]。同時，Zhang等[52]研究表明6-姜辣素、8-姜辣素和10-姜辣素都能降低血清中TNF-α和IL-1β水平，及結(jié)腸組織中MPO、MDA水平，提高超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)活力，明顯加快結(jié)腸黏膜損傷愈合，對DSS誘導(dǎo)的UC具有明顯改善作用。

6-姜烯酚通過抑制腸道免疫炎癥、調(diào)節(jié)結(jié)腸上皮細(xì)胞分化平衡、促進(jìn)結(jié)腸黏膜損傷修復(fù)等對UC也表現(xiàn)出較好的治療作用[53]。6-姜烯酚能降低血清中TNF-α和IL-1β水平，其治療UC的機(jī)制與抑制Notch和TLR4/NF-κB信號通路過表達(dá)相關(guān)[54-55]。Hassan等[56]比較6-姜烯酚與免疫抑制劑6-硫鳥嘌呤對DSS誘導(dǎo)的UC的影響，結(jié)果表明6-姜烯酚比6-硫鳥嘌呤表現(xiàn)出更好的治療效果，可能與降低結(jié)腸隱窩中干細(xì)胞標(biāo)志物CD133和CD34表達(dá)水平有關(guān)。Luettig等[57]研究發(fā)現(xiàn)6-姜烯酚通過抑制P3IK/Akt和NF-κB信號通路激活B細(xì)胞，從而抑制TNF-α誘導(dǎo)的Claudin-2(一種形成通道的緊密連接蛋白)上調(diào)及Claudin-1分解，對結(jié)腸屏障具有保護(hù)作用。Zhang等[58]通過制備6-姜烯酚納米粒，可有效靶向結(jié)腸炎組織，通過調(diào)節(jié)促炎因子TNF-α、IL-6、IL-1β及iNOS和氧化調(diào)控因子NF-E2相關(guān)因子2(Nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Nrf-2)和血紅素氧合酶-1(Neme oxygenase-1，HO-1)的表達(dá)水平，減輕UC癥狀、加快UC傷口修復(fù)。Rafeeq等[59]最近研究發(fā)現(xiàn)6-姜酮酚能上調(diào)GSH水平，降低MDA、MPO、IL-6、TNF-α水平，緩解結(jié)腸炎癥，對乙酸誘導(dǎo)的UC大鼠具有保護(hù)作用。Liu等[60]研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸和姜的超臨界CO2提取物對LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞炎癥反應(yīng)和TNBS誘導(dǎo)的大鼠UC模型均表現(xiàn)出抗炎活性。

因此，干姜姜辣素類、揮發(fā)油類這些物質(zhì)具有與UC相關(guān)的生物活性，主要表現(xiàn)出抗炎、抗氧化等藥理作用。

3 結(jié)語

腸道炎癥是UC發(fā)病機(jī)制和并發(fā)癥的主要臨床表現(xiàn)之一，UC與炎癥的嚴(yán)重程度相關(guān)，UC的防治方法有許多，目前依然缺乏完全有效的治療方法。近年來，中醫(yī)藥治療UC的臨床研究報道顯著增多，其中70%的UC患者采用中西醫(yī)結(jié)合治療方法，結(jié)腸切除率遠(yuǎn)低于西方國家，中醫(yī)藥在UC治療領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。因此，深入挖掘中醫(yī)藥治療UC的理論和實踐經(jīng)驗，開發(fā)用于治療UC的新制劑具有重要的意義。其中寒熱藥對黃連、干姜是平調(diào)中焦寒熱的常用配伍，其有效組分黃連生物堿與干姜油及其主要有效成分具有抗炎、抗氧化等與UC相關(guān)的生物活性，同時文獻(xiàn)報道“黃連-干姜”藥對主要有效成分6-姜烯酚、小檗堿聯(lián)合使用治療效果明顯增強(qiáng)，其作用機(jī)制與抑制Notch通路和TLR4/NF-κB通路過表達(dá)有關(guān)，可調(diào)節(jié)結(jié)腸炎癥反應(yīng)和上皮細(xì)胞增殖與分化[61-62]。綜上所述，“黃連-干姜”藥對及其有效組分對潰瘍性結(jié)腸炎具有較好的藥效作用與應(yīng)用前景。