血清NSE、CA-50、proGRP在食管癌術后淋巴結轉移中的水平變化及聯合檢測價值*

田 濤，楊俊省

山東省棗莊市立醫院腫瘤科，山東棗莊 277100

食管癌是臨床常見的消化道惡性腫瘤，據統計，我國食管癌發病率高達21/10萬，且呈逐年升高趨勢[1-2]。手術是臨床治療食管癌的主要手段之一，能通過切除癌變病灶達到治療目的，但由于食管淋巴管分布密集、引流途徑復雜，從而導致術后易發生淋巴結轉移，進而致使預后較差[3]。及早確診淋巴結轉移、明確轉移情況是制訂針對性治療方案的關鍵所在。血清學指標具有取材方便、檢測耗時短等優點，是診斷惡性腫瘤的重要手段，故積極探索較為可靠的血清學指標成為臨床熱點。神經元特異性烯醇化酶(NSE)屬于新型腫瘤標志物，糖類抗原-50(CA-50)是傳統腫瘤標志物，胃泌素釋放肽前體(proGRP)是激素類腫瘤標志物，三者均被用于多種惡性腫瘤診斷中，具有良好的診斷價值[4-5]。但關于三者在食管癌術后淋巴結轉移中的水平變化及聯合檢測價值仍未明確，本研究擬對此進行研究，并進行生存分析，旨在為食管癌的臨床診斷、治療方案的制訂及延長患者生存周期提供參考依據。現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年3月至2020年3月本院收治的食管癌術后淋巴結轉移患者102例作為轉移組(術前無轉移，隨訪6個月發生淋巴結轉移)，其中男75例，女27例；年齡27～72歲，平均(52.31±6.22)歲；病變部位：胸上段8例，胸中段62例，胸下段32例；病理類型：鱗癌91例，腺癌8例，小細胞癌3例；臨床分期：Ⅰ期10例，Ⅱa期59例，Ⅱb期33例。另選同期食管癌術后無淋巴結轉移患者61例作為無轉移組(術前無轉移，隨訪6個月未發生淋巴結轉移)，其中男48例，女13例；年齡25～72歲，平均(51.56±5.89)歲；病變部位：胸上段5例，胸中段39例，胸下段17例；病理類型：鱗癌56例，腺癌4例，小細胞癌1例；臨床分期：Ⅰ期15例，Ⅱa期38例，Ⅱb期8例。兩組年齡、性別、病變部位、病理類型差異無統計學意義(P>0.05)；兩組臨床分期差異有統計學意義(P<0.05)。納入標準：均經胃鏡病理檢查證實為食管癌；均接受手術治療；預計生存期>1年。排除標準：術前已發生淋巴結轉移者；合并其他良惡性腫瘤者；存在心、肝、腎等其他重要臟器嚴重功能不全者；伴有急慢性感染性疾病者；存在自身免疫性疾病者。本研究經本院倫理委員會審批通過。患者及家屬均知情，并簽訂知情同意書。

1.2方法 兩組患者于入院當日采集清晨空腹靜脈血3 mL，離心處理，離心半徑為10 cm，離心速率為2 500 r/min，離心時間為15 min，取上清液，保存于-70 ℃恒溫冰箱內，備用。采用購自德國羅氏公司的全自動電化學發光儀(型號為Roche Cobas E602)及其配套試劑盒檢測血清NSE、CA-50、proGRP水平，嚴格遵循試劑盒說明書進行操作。所有患者均通過門診、電話或微信等方式隨訪1年，剔除失訪病例后統計1年生存率。

1.3觀察指標 (1)兩組血清NSE、CA-50、proGRP水平。(2)血清NSE、CA-50、proGRP對食管癌術后淋巴結轉移風險的影響。(3)血清NSE、CA-50、proGRP對食管癌術后淋巴結轉移的診斷價值。(4)不同淋巴結轉移度、轉移數、轉移域數患者血清NSE、CA-50、proGRP水平。(5)血清NSE、CA-50、proGRP與食管癌術后淋巴結轉移情況的相關性。(6)生存分析。

2 結 果

2.1兩組血清NSE、CA-50、proGRP水平 轉移組血清NSE、CA-50、proGRP水平高于無轉移組(P<0.05)，見表1。

2.2血清NSE、CA-50、proGRP對食管癌術后淋巴結轉移風險的影響 由表1數據計算所有患者血清NSE、CA-50、proGRP的均值分別為22.24 ng/mL、49.81 U/mL、99.13 pg/mL，各指標以≥均值為高水平，<均值為低高水平。危險度分析顯示，血清NSE、CA-50、proGRP高水平患者發生術后淋巴結轉移的風險分別是低水平患者的3.086倍(95%CI：2.115～4.503)、11.855倍(95%CI：5.110～27.504)、2.538倍(95%CI：1.781～3.617)，均P<0.05，見表2。

表1 兩組血清NSE、CA-50、proGRP水平比較

表2 血清NSE、CA-50、proGRP對食管癌術后淋巴結轉移風險的影響(n)

2.3血清NSE、CA-50、proGRP對食管癌術后淋巴結轉移的診斷價值 以轉移組作為陽性標本，無轉移組作為陰性標本，繪制ROC曲線，結果顯示，血清NSE、CA-50、proGRP單獨檢測診斷食管癌術后淋巴結轉移的曲線下面積(AUC)分別為0.735(95%CI：0.660～0.801)、0.835(95%CI：0.768～0.888)、0.815(95%CI：0.746～0.871)，3項指標聯合檢測診斷食管癌術后淋巴結轉移的AUC為0.927(95%CI：0.876～0.962)，大于各指標單獨診斷，見表3、圖1。

表3 血清NSE、CA-50、proGRP對食管癌術后淋巴結轉移的診斷價值

圖1 血清NSE、CA-50、proGRP對食管癌術后淋巴結轉移的診斷價值

2.4不同淋巴結轉移情況患者血清NSE、CA-50、proGRP水平 單因素方差分析顯示，不同淋巴結轉移度、轉移數、轉移域數患者血清NSE、CA-50、proGRP水平差異有統計學意義(P<0.05)。淋巴結轉移度>40%的患者血清NSE、CA-50、proGRP水平均高于淋巴結轉移度在20%～40%及<20%的患者(P<0.05)；淋巴結轉移度在20%～40%的患者血清NSE、CA-50、proGRP水平均高于淋巴結轉移度<20%的患者(P<0.05)。≥4枚淋巴結轉移的患者血清NSE、CA-50、proGRP水平均高于3枚、2枚、1枚淋巴結轉移的患者(P<0.05)，3枚淋巴結轉移的患者血清NSE、CA-50、proGRP水平均高于2枚、1枚淋巴結轉移的患者(P<0.05)，2枚淋巴結轉移的患者血清NSE、CA-50、proGRP水平高于1枚淋巴結轉移的患者(P<0.05)；轉移域數≥2個的患者血清NSE、CA-50、proGRP水平高于1個轉移域的患者(P<0.05)。見表4。

表4 不同淋巴結轉移情況患者血清NSE、CA-50、proGRP水平比較

2.5血清NSE、CA-50、proGRP與食管癌術后淋巴結轉移情況的相關性 Spearman相關分析顯示，血清NSE、CA-50、proGRP與食管癌術后淋巴結轉移度、轉移數、轉移域數呈正相關(r>0,P<0.05)，見表5。

表5 血清NSE、CA-50、proGRP與食管癌術后淋巴結轉移情況的相關性

續表5 血清NSE、CA-50、proGRP與食管癌術后淋巴結轉移情況的相關性

2.6生存分析 隨訪1年，轉移組失訪3例。以ROC曲線獲取的血清NSE、CA-50、proGRP最佳截斷值為界分為陽性與陰性，NSE≥21.92 ng/mL為陽性、NSE<21.92 ng/mL為陰性，CA-50≥45.08 U/mL為陽性、CA-50<45.08 U/mL為陰性，proGRP≥76.15 pg/mL、proGRP<76.15 pg/mL為陰性。K-M曲線分析顯示，轉移組血清NSE、CA-50、proGRP陽性患者1年生存率低于陰性患者(Log-rankχ2=2.704、3.258、2.816，P<0.05)，見圖2。

圖2 轉移組不同血清NSE、CA-50、proGRP水平患者1年生存曲線

3 討 論

相關資料數據統計顯示，胸段食管癌腹腔淋巴結轉移發生率約為26%，頸部淋巴結轉移發生率約為30%，縱膈淋巴結轉移發生率約為34%，防治形勢極為嚴峻[6-8]。同時，國內外研究均證實，食管癌具有術后易發生淋巴結轉移的特點，且術后淋巴結轉移是導致患者術后死亡的重要因素之一，需給予重視[9-10]。因此，積極探索較為可靠的指標早期診斷食管癌術后淋巴結轉移對于提高術后生存率具有重要意義。

NSE屬于細胞內的大分子蛋白質，近年來有報道指出，其血清水平在肺癌、卵巢癌等多種惡性腫瘤中呈異常升高趨勢，可作為惡性腫瘤發生的血清學標志物[11-12]。CA-50是常規糖類抗原類腫瘤標志物，主要在肺部、胃部、肝部、結腸、膽囊、胰腺、子宮等多種器官、組織的糖脂及高分子糖蛋白中分布，參與上述器官、組織的惡性腫瘤發生過程[13-14]。proGRP屬于胃泌素釋放肽的前體結構，在腫瘤組織中呈高表達狀態[15]。相關研究表明，與健康者、食管良性病變患者相比，血清NSE、CA-50、proGRP在食管癌患者中的水平明顯較高，可見三者均參與食管癌發生[16-17]。在此基礎上，本研究結果顯示，轉移組血清NSE、CA-50、proGRP水平高于無轉移組，且高水平患者發生術后淋巴結轉移的風險明顯升高，說明血清NSE、CA-50、proGRP不僅參與食管癌發生過程，還會促進術后淋巴結轉移。分析其原因，主要有以下方面：(1)NSE與腫瘤生長、增殖密切相關，在炎癥及腫瘤生長環境中，NSE會由細胞內大量釋放出來，發揮控制腫瘤細胞生長的作用，還具有上調血管內皮生長因子表達、加速腫瘤內部新生血管生成的作用，從而在食管癌術后淋巴結轉移中發揮促進作用[18]。(2)有報道顯示，細胞發生惡性病變時或激活胚胎期的轉化酶或導致糖基轉化酶失活，從而促使細胞表面糖類結構及抗原性質改變，進而造成糖類抗原過多合成、釋放，形成腫瘤標志物，且隨著腫瘤細胞不斷生長、侵襲、擴散，糖類抗原含量呈逐漸增加趨勢[19]。故CA-50水平在食管癌術后淋巴結轉移中顯著升高。(3)proGRP是新被發現的激素類腫瘤標志物，具有調控細胞周期、減弱上皮細胞分化和成熟能力，導致在惡性腫瘤發展過程中腫瘤細胞由G1期轉化為S期的時間顯著縮短，從而加速癌細胞增殖、轉移，促進淋巴結轉移[20]。提示臨床可將血清NSE、CA-50、proGRP作為診斷食管癌術后淋巴結轉移的血清學指標。本研究進一步分析發現，血清NSE、CA-50、proGRP雖然均對食管癌術后淋巴結轉移具有一定診斷價值，但仍存在較大局限性，故嘗試探討3項指標聯合檢測的診斷價值，結果顯示，3項指標聯合檢測的診斷價值明顯高于各指標單獨診斷，為臨床提供可靠的診斷思路。

本研究還表明，血清NSE、CA-50、proGRP水平隨淋巴結轉移度、轉移數、轉移域數增加呈逐漸升高趨勢，與淋巴結轉移度、轉移數、轉移域數呈正相關，可見血清NSE、CA-50、proGRP還能用于評估食管癌術后淋巴結轉移度、轉移數、轉移域數，有利于制訂針對性治療方案，從而控制淋巴結轉移進展。此外，隨訪1年，轉移組血清NSE、CA-50、proGRP陽性患者1年生存率低于陰性患者，說明上述指標血清水平還會影響生存預后。但本研究未詳細探討血清NSE、CA-50、proGRP對食管癌術后淋巴結轉移患者長期預后的預測價值，今后需作進一步探討與分析，以便為臨床提供更全面的數據支持。

綜上所述，血清NSE、CA-50、proGRP水平升高會顯著增加食管癌術后淋巴結轉移風險，會對生存預后產生不利影響，這3項指標聯合檢測診斷食管癌術后淋巴結轉移的價值較高。