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小麥麩皮膳食纖維的改性研究

2022-12-26 11:12:32周宇朦孫洪浩呂福軍
中國飼料 2022年23期

周宇朦, 孫洪浩, 呂福軍

(遼寧波爾萊特農牧實業有限公司,遼寧沈陽 110122)

小麥麩皮是小麥制粉過程中的副產物,其產量豐富,價格便宜(陸明紅等,2018),含有大量脂肪、蛋白質、維生素等營養物質,以及較多的膳食纖維(Gunenc等,2013;Bonnand等,2010;Nancy等,2005)。超過85%的小麥麩皮都用于發酵和飼料行業(宋碩,2020),是豬日糧中應用最廣泛的纖維原料(肖真明等,2017)。因為家禽缺乏分解這些膳食纖維成分的內源酶,導致小麥麩皮纖維難以被降解,綜合利用率低,因此促進小麥麩皮纖維改性的研究有重要現實意義。

膳食纖維(DF)根據水溶性的不同,被分為可溶性膳食纖維(SDF)和不溶性膳食纖維(IDF)兩種(康琪等,2007)。IDF主要作用于腸道產生機械蠕動作用,而SDF則更多發揮代謝功能,如影響可利用碳水化合物和脂類代謝,降低血脂膽固醇等(王岸娜等,2009;黃才歡等,2006)。常用的DF降解處理有化學處理、生物酶處理法、微生物發酵法和物理法等(向琴,2015)。生物酶法降解主要是使用各種纖維素酶、半纖維素酶、蛋白酶等控制一定的反應條件,對纖維進行酶解,破壞纖維和其他營養物質的交聯結構,提高其可溶性纖維含量和蛋白質等其他營養成分的溶出,從而改變其物理性質(張思耀,2009)。

本研究采用酶解法來實現小麥麩皮DF的改性研究,通過單因素和正交試驗優化酶解的工藝條件,同時考察酶解試驗對小麥麩皮DF功能性質的影響,綜合考慮生產成本、時間成本等,為高附加值開發豬用纖維原料提供試驗數據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料與試劑 麥麩,市售;3種木聚糖酶、1種纖維素酶、2種果膠酶,購自多個廠家;熱穩定α-淀粉酶溶液、蛋白酶、淀粉葡糖苷酶溶液、酸洗硅藻土,均來自Sigma公司;氫氧化鈉、濃硫酸、乙醇、丙酮、重鉻酸鉀洗液、甲醛等均為分析純,購自國藥集團化學試劑有限公司。

1.2 試驗儀器 CP2102電子天平,奧豪斯儀器(常州)有限公司;HJ-6A數顯恒溫磁力加熱攪拌器,常州金壇良友儀器有限公司;FiveEasy Plus pH計,梅特勒-托力多儀器(上海)有限公司;GSP-9080MBE隔水式恒溫培養箱,上海博迅實業有限公司醫療設備廠;101-2AB型電熱鼓風干燥箱,天津市泰斯特儀器有限公司;TGL-16C離心機,上海安亭科學儀器廠;HH-4數顯恒溫水浴鍋,常州智博瑞儀器制造有限公司;752紫外可見分光光度計,上海佑科儀器儀表有限公司。

1.3 單因素試驗

1.3.1 酶解時間對小麥麩皮DF的影響 取原料,每份加60%水,0.6%的復合酶(木聚糖酶:纖維素酶:果膠酶=1:1:1),在45℃培養箱中分別酶解8、15、20 h和24 h。酶解結束后高溫滅酶,85℃烘干粉碎。測定總膳食纖維(TDF)、IDF、SDF、還原糖、持水力和膨脹力。

1.3.2 酶添加種類對小麥麩皮DF的影響 取原料,每份加60%水,0.6%的單酶(3種木聚糖酶,1種纖維素酶,2種果膠酶),在45℃培養箱中酶解20 h。酶解結束后高溫滅酶,85℃烘干粉碎。其余同上。

1.3.3 酶配比對小麥麩皮DF的影響 取原料,每份加60%水,0.6%不同配比的酶,在45℃培養箱中酶解20 h。酶解結束后高溫滅酶,85℃烘干粉碎。其余同上。

1.3.4 酶用量對小麥麩皮DF的影響 取原料,每份加60%水,0%~0.7%的酶,在45℃培養箱中酶解20 h。酶解結束后高溫滅酶,85℃烘干粉碎。其余同上。

1.4 正交試驗設計 在獲得最佳作用條件(還原糖得率最高)的基礎上,進行正交試驗設計,以酶解時間、酶配比和酶用量為試驗因素,以還原糖含量為判斷指標,優化得到適宜的麩皮酶解試驗條件。

1.5 指標測定及方法

1.5.1 膳食纖維 膳食纖維測定參照GB/T5009.88-2014進行。

1.5.2 還原糖 還原糖測定采用DNS比色法。

1.5.3 持水力 持水力的測定參照Esposito等(2005)的方法。稱取1.0 g樣品于烘至恒重的50 mL離心管中,加入30 mL蒸餾水,室溫下搖晃30 min,4000 r/min離心20 min,棄去上清液并用濾紙吸干離心管壁殘留的水分,80℃烘干10 min,略除去表面多余水分,稱重。持水力計算公式如下:

1.5.4 膨脹力 準確稱取1.0 g樣品置于25 mL量筒中,測定干粉體積,加入蒸餾水使總體積至15 mL處,振蕩均勻,使其充分吸收水分,室溫下靜置24 h,讀取量筒中樣品體積數(曹樹穩等,1997)。膨脹力計算公式如下:1.6 數據處理 試驗數據使用Microsoft Excel進行記錄和統計,使用Origin 75軟件進行做圖。

2 結果與分析

2.1 單因素試驗

2.1.1 酶解時間對小麥麩皮膳食纖維的影響 由圖1可見,其他條件相同,酶解0~20 h時,隨著酶解時間的延長,酶解后樣品的TDF、IDF、SDF、持水力和膨脹力下降,還原糖增加。20~24 h時,還原糖開始下降,故確定最佳酶解時間為20 h。使用最佳酶解時間酶解時,TDF減少了5.46%,IDF減少了5.26%,SDF增加了0.99%,持水力減小了1.46%,膨脹力減少了0.9%,還原糖增加了14.05%。

圖1 酶解時間對小麥麩皮膳食纖維的影響

2.1.2 酶添加種類對小麥麩皮膳食纖維的影響由圖2可見,其他條件相同,添加不同的酶進行酶解(木1、木2、木3、纖1、果1、果2)時,酶解后樣品的TDF、IDF、SDF、持水力和膨脹力下降,還原糖增加。從圖中可以看出,在相同酶用量的情況下,酶解效果是纖維素酶>木聚糖酶>果膠酶。使用效果最好的酶酶解時,TDF減少了10%,IDF減少了9%,持水力減小了0.62%,膨脹力減少了0.6%,還原糖增加了11.55%。

圖2 酶添加種類對小麥麩皮膳食纖維的影響

2.1.3 酶配比對小麥麩皮膳食纖維的影響 預試驗時發現,復合酶中是否添加果膠酶對酶解效果無明顯影響,接下來的試驗不再添加果膠酶。由圖3可見,在其他條件相同時,添加不同配比的復合酶進行酶解(木聚糖酶:纖維素酶=7:1、5:1、3:1、1:1、1:3、1:5、1:7)。當木聚糖酶和纖維素酶的比例變化時,纖維指標的變化趨勢相似,都是TDF、IDF、SDF、持水力和膨脹力先下降再上升,還原糖先上升再下降。拐點發生在5:1和1:5處,因為5:1時還原糖含量更高,故確定5:1為最佳酶配比。使用最佳酶配比酶解時,TDF減少了11%,IDF減少了10%,SDF減少了1.1%,持水力減小了0.4%,膨脹力減少了1.2%,還原糖增加了13.39%。

圖3 酶配比對小麥麩皮膳食纖維的影響

2.1.4 酶用量對小麥麩皮膳食纖維的影響 由圖4可見,在其他條件相同時,隨著酶制劑的不斷添加(0、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%、0.7%),酶解后的樣品TDF、IDF、SDF、持水力和膨脹力下降越來越明顯,還原糖增加越來越多。綜合考慮,最后確定最佳酶用量為0.6%。 使用最佳酶用量酶解時,TDF減少了4%,IDF減少了7%,SDF減少了2%,持水力減小了0.7%,膨脹力減少了0.8%,還原糖增加了12.72%。

圖4 酶用量對小麥麩皮膳食纖維的影響

2.2 正交試驗結果與分析 根據單因素試驗結果,選取L9(34)正交試驗設計探討麩皮復合酶酶解的最優工藝參數(李云雁等,2006),正交試驗因素水平見表1,結果分析見表2,方差分析見表3。

表1 試驗處理與設計

由表2可見,在9個試驗結果中,試驗4的還原糖含量最高,為14.62%,其水平組合為A2B1C2,即酶解時間20 h、酶配比1:3、酶用量0.6%。由表2和表3的R值、F值可知,本試驗因素存在顯著性順序,其主要關系為A>C>B,即酶解時間>酶用量>酶配比。

表2 正交試驗結果與分析

表3 正交試驗的方差分析

3 討論

商品飼料禁止添加具有促生長作用的藥物飼料添加劑后,DF對畜禽腸道健康的重要性成為熱點話題。麩皮加入酶制劑改性后,可以提高DF的消化率,提高其他營養素的利用率,并增加腸道微生物的可發酵資源,改善腸道健康(徐運杰等,2021)。在酶解時間的探究試驗中,監測樣品pH的變化,是為了避免酶解時間過長,開始發酵,產生酸和其他有害物質影響品質(劉豪等,2019)。本試驗中,酶解后還原糖含量逐漸上升,20 h后開始下降,可能是因為雜菌生長,發酵消耗了酶解產物(劉豪等,2019)。麩皮中含有高比例的DF,包括非淀粉多糖、木質素和其他不易消化的碳水化合物(郭娜,2013)。非淀粉多糖中有21.9%阿拉伯木聚糖,1.9%果膠,10.7%纖維素,0.4%葡聚糖,0.4%甘露聚糖(苗字葉等,2020)。本試驗中,用多種木聚糖酶、纖維素酶和果膠酶分別酶解,發現對麩皮的酶解效果從大到小是纖維素酶、木聚糖酶、果膠酶。在酶配比試驗中,發現是否添加果膠酶對酶解效果影響甚微,考慮到麩皮只含有1.9%的果膠,并且纖維素酶與木聚糖酶對DF的改性有重要作用(張玉倩,2011),故復合酶中不再添加果膠酶,重點研究木聚糖酶和纖維素酶的添加比例,最大化的發揮酶制劑的作用。在酶解過程中,酶用量也不是越多越好,因為纖維素酶雖然能有效地降解細胞壁,但是當酶濃度增加后,會增加酶的競爭抑制作用(張玉倩,2011),纖維素酶對細胞壁纖維素的降解是有限的。

在酶解試驗的過程中,要盡量使用新鮮麩皮。因為麩皮通氣性差,不易長期保存,易酸敗、發酵等,會造成酶解效果的差異。DF在具有積極營養特性的同時,還會造成飼料的表觀代謝能(AME)值降低和生長緩慢,并不是IDF越低越好,SDF越高越好,要注意配方中DF的設置水平(徐運杰等,2021)。酶解過程中,非淀粉多糖被降解成還原糖,TDF下降,還原糖增加。IDF水解得到可溶性成分,IDF下降,同時一部分可溶性大分子也被降解成為不溶的小分子物質,導致SDF下降(陶顏娟,2005)。麩皮的化學組成特性是含有很多親水基團,具有良好的持水性和膨脹性(陶顏娟,2005)。酶解過程中,膳食纖維的纖維素及半纖維素的長鏈斷裂,微晶纖維素結構破壞,膠效應消失,持水力和膨脹力下降。樣品酶解結束后會經過烘干和粉碎,粉碎后更細的DF溶解度較好,有一部分會溶于水而對持水力、膨脹力沒有貢獻(張玉倩,2011)。同時過度粉碎,會破壞膳食纖維的物理結構,使原先可以吸收自由水的空間減少,從而減少膨脹力和持水力(劉倍毓,2011)。

4 結論

本試驗結果表明,麩皮經過酶解處理后,其TDF、IDF、SDF、持水力和膨脹力都發生下降,還原糖大幅度增加。麩皮最佳酶解條件為酶添加量0.6%,加木聚糖酶:纖維素酶=1:3,酶解時間20 h。

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