母體日糧中添加β-胡蘿卜素和丁酸梭菌對子代鼠生長性能及血清生化指標的影響

李 勝， 白力格扣， 袁非凡， 李寒梅， 陳子賢， 建曉倩，王 華， 張 眉， 郭 潔， 李 潔， 馮蓮英， 叢日華*

（1.陜西省畜牧技術推廣總站，陜西西安 710016；2.西北農林科技大學動物醫學院，陜西楊凌 712100；3.陜西省水產研究與技術推廣總站，陜西西安 710086；4.西安海吉焦生物科技研究院有限公司，陜西西安 710016；5.陜西康大飼料有限公司，陜西咸陽 713700）

母體妊娠期及泌乳期的營養水平對子代的生長發育有著非常重要的作用。丁酸梭菌又名酪酸菌，進入動物機體后會產生多種有益機體的營養物質，能夠調節動物機體腸道微生物生態平衡，可以提高機體對蛋白、脂肪等營養物質的分解吸收，增強動物免疫功能、促進生長性能（張自杰等，2021；趙娜等，2018）。β-胡蘿卜素是動物體內維生素A的重要來源，但是，動物體內不能合成β-胡蘿卜素，必須由食物攝入，β-胡蘿卜素作為維生素及類維生素類飼料添加劑產品具有抗氧化、著色、提高免疫力和繁殖機能，促進細胞間的縫隙聯接等多種生理功能，同時有研究表明，在飼料中添加β-胡蘿卜素可以提高肉仔雞日增重，提高血清和肝臟中抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶活力（李俊營等，2012；任延利等，2007）。目前，兩者單獨或與其他生物活性物質聯合研究的報道較多，但兩者聯合應用對機體的作用研究報道較少。因此，本文的目的主要是通過在母體妊娠期及泌乳期日糧中添加β-胡蘿卜素和丁酸梭菌，研究母體日糧中添加β-胡蘿卜素和丁酸梭菌對后代生長性能以及血清生化指標的影響，為β-胡蘿卜素和丁酸梭菌在臨床生產中的聯合應用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗動物及試驗設計 試驗選擇20只8周齡KM小鼠，雌雄各半，購自成都達碩試驗動物有限公司，于動物室驗室分籠適應性飼養1周后，雌雄合籠交配，雌鼠受孕后隨機分為5組，孕前正常喂養，待雌鼠妊娠第11天起，對照組飼喂普通鼠糧，試驗組1、2、3分別飼喂日采食0.05‰、0.1‰、0.15‰的β-胡蘿卜素和丁酸梭菌（純度≥20%）自制糧，試驗組4只飼喂日采食0.1‰的β-胡蘿卜素自制糧，飼喂至子代鼠21 d時，每組隨機抽取6只小鼠剖檢、采樣。

1.2 試驗日糧 本試驗的標準日糧配方參考了國標GB14924.2-2001試驗動物飼料標準，各原料種類添加量見表1所示。

表1 基礎日糧配方組成

1.3 樣品采集 在子代鼠21 d時，對全部小鼠進行活體稱重，取眼眶血液，置于4℃冰箱過夜，在室驗室將血液樣品通過離心（3500 r/min，10 min）制成血清，送檢進行血清生化指標檢測。采集血液樣本后，將小鼠斷頸處死，解剖取樣。取肝、脾、胃、小腸和大腸各段，并用生理鹽水對胃腸道內容物沖洗后進行稱重，計算器官指數：

1.4 血清生化指標 使用深圳雷杜生命科技Chemray 240自動生化分析儀檢測血清中谷丙轉氨酶（AST）、谷草轉氨酶（ALT）、γ-谷氨酰轉肽酶（γ-GGT）、堿性磷酸酶（ALP）、總膽紅素（TBIL）、直接膽紅素（DBIL）、堿性磷酸酶（ALP）、白蛋白（ALB）、總膽汁酸（TBA）、總膽固醇（T-CHO）、甘油三酯（TG）、高密度膽固醇（HDL-C）、低密度膽固醇（LDL-C）、糖化血清蛋白（GSP）、葡萄糖（GLU）、尿素氮（UREA）、肌酐（CR）、尿素（BUN）含量。

1.5 數據統計與分析 試驗數據采用軟件SPSS 26.0進行統計分析，采用One-way ANOVA進行方差分析，結果以“平均值±標準差”表示。當P＜0.05時，判定具有統計學意義的顯著性差異，當P＜0.01時，判定具有統計學意義的極顯著性差異。

2 結果

2.1 β-胡蘿卜素和丁酸梭菌對子代鼠體重、器官重和器官指數的影響 由表2可知，與對照組相比，試驗組1小鼠體重、肝臟重量、肝臟指數、回腸重量、盲腸重量和胸腺重量極顯著增加了36.36%、77.5%、19.55%、107.14%、116.67%和44.12%（P＜0.01），脾臟重量、盲腸指數顯著增加52.78%、41.71%（P＜0.05）；試驗組2小鼠體重、肝臟重量、肝臟指數、回腸重量和盲腸重量極顯著增 加 了27.27%、52.5%、18.83%、171.43%和61.11%（P＜0.01），回腸指數和胸腺重量顯著增加116.48%和29.41%（P＜0.05），結腸指數顯著降低了37.19%（P＜0.05）；試驗組3小鼠體重、脾臟重量、空腸重量、回腸重量、盲腸重量、胸腺重量、肝臟重量極顯著增加了54.54%、83.33%、50.00%、178.57%、88.89%、61.76%、67.5%（P＜0.01），小鼠回腸指數顯著增加了84.00%（P＜0.05）；試驗組4小鼠肝臟指數和回腸重量極顯著增加了17.64%和107.14%（P＜0.01），肝臟重量、回腸指數顯著增加22.5%、100.88%（P＜0.05）。

表2 β-胡蘿卜素和丁酸梭菌對子代鼠體重、器官重、器官指數的影響

與試驗組1相比，試驗組2小鼠肝臟重量極顯著減少了14.08%（P＜0.01），脾臟重量、脾臟指數、十二指腸重量和盲腸重量顯著減少了32.73%、23.12%、26.47%和25.64%（P＜0.05），回腸指數顯著增加53.84%（P＜0.05）；試驗組3小鼠體重極顯著增加了13.33%（P＜0.01），小鼠肝臟指數顯著減少了9.11%（P＜0.05）；試驗組4小鼠體重、肝臟重量、脾臟重量、盲腸重量和胸腺重量極顯著減少了20.00%、30.99%、47.27%、47.69%和32.65%（P＜0.01），小鼠脾臟指數、十二指腸重量和盲腸指數減少了24.02%、31.37%和34.35%（P＜0.05）。

與試驗組2相比，試驗組3小鼠體重、脾臟重量、脾臟指數、十二指腸重量和空腸重量極顯著升高了21.43%、78.38%、49.61%、53.33%和46.15%（P＜0.01），小鼠胸腺重量、結腸重量顯著升高了25.00%、58.33%（P＜0.05），肝臟指數顯著下降8.56%（P＜0.05）；試驗組4小鼠體重、肝臟重量極顯著降低了14.29%和19.67%（P＜0.01），胸腺重量、盲腸重量和盲腸指數顯著降低了25.00%、29.66%和29.27%（P＜0.05），小鼠結腸指數顯著升高55.55%（P＜0.05）。

與試驗組3相比，試驗組4小鼠體重、胸腺重量、肝臟重量、脾臟重量、脾臟指數、十二指腸重量、空腸重量和盲腸重量極顯著降低了29.41%、40.00%、26.87%、56.06%、33.94%、39.13%、47.37%和40.00%（P＜0.01）。新生小鼠其余各器官重和器官指數均無統計學差異（P＞0.05）。

2.2 β-胡蘿卜素和丁酸梭菌對子代鼠血清生化指標的影響 由表3可見，與對照組相比，試驗組1、2、3小鼠谷丙轉氨酶極顯著降低（P＜0.01）；試驗組3、4小鼠γ-谷氨酰基轉移酶顯著升高了13.21%、10.29%（P＜0.05）；試驗組1總膽紅素顯著降低了46.80%（P＜0.05）；試驗組1直接膽紅素顯著降低了53.23%（P＜0.05）；試驗組1、2、3、4小鼠白蛋白極顯著升高了14.15%、12.55%、21.28%、16.67%（P＜0.01）；試驗組3總膽汁酸顯著升高了69.80%（P＜0.05）；試驗組3血糖極顯著升高了230.00%（P＜0.01）；試驗組1、2、3、4小鼠尿酸極顯著降低了40.73%、41.53%、32.89%、45.12%（P＜0.01）；試驗組1肌酐顯著降低了32.58%（P＜0.05）。

表3 β-胡蘿卜素和丁酸梭菌對子代鼠生化指標的影響

與試驗組1相比，試驗組3小鼠總膽汁酸極顯著升高了113.52%（P＜0.01）；試驗組3肌酐顯著升高了48.08%（P＜0.05）；與試驗組2相比，試驗組3總膽汁酸極顯著升高了105.83%（P＜0.01）；與試驗組3相比，試驗組4總膽汁酸極顯著降低了55.83%（P＜0.01），試驗組4糖化血清蛋白顯著降低了34.67%（P＜0.05）。

3 討論

動物體重是檢測動物生長最直觀的指標。任延利等（2007）和褚千然等（2021）研究表明，添加不同水平的β-胡蘿卜素能夠提高肉仔雞和蛋雛雞的平均日增重。Murano等（2005）試驗表明長期口服β-胡蘿卜素可增加幼齡雪貂的體重。武麗達等（2022）研究表明，飼料中添加丁酸梭菌可有效提高白羽肉雞的日增重。李玉鵬等（2017）研究表明，添加丁酸梭菌的飼糧飼喂斷奶仔豬，可以提高斷奶仔豬的平均增重。在本試驗中，與對照組相比，試驗組1、2、3小鼠體重極顯著升高；與試驗組4相比，試驗組1、2、3小鼠體重極顯著升高；而與試驗組1和試驗組2相比，試驗組3小鼠體重極顯著升高，與上述研究結果相一致。因此在母體飼料中添加1.5‰β-胡蘿卜素和丁酸梭菌可以更好提高新生小鼠生長性能。

胸腺是機體重要的免疫器官，通常胸腺指數也作為評估免疫功能的基礎指標。袁慧坤等（2018）研究發現，在北京鴨中添加丁酸梭菌可以顯著提高胸腺指數。在本試驗中，與對照組相比，試驗組1、3小鼠胸腺重量極顯著升高，試驗組2小鼠胸腺重量顯著升高，與上述研究結果相一致；與試驗組4相比，試驗組1、3小鼠胸腺重量極顯著升高，試驗組2小鼠胸腺重量顯著升高；與試驗組2相比，試驗組3小鼠胸腺重量顯著升高。脾是一個關鍵的外周淋巴器官，在產生免疫反應中起主導作用，脾臟指數是評價動物免疫功能直接、簡單、有效的重要指標（李玉鵬等，2017；Mast等，1999）。 Garcia等（2003）研究表明，飼喂含β-胡蘿卜素的日糧可以增強小鼠的免疫功能。李可等（2015）研究表明，在飼料中添加丁酸梭菌，可以顯著提高脾臟指數和法氏囊指數。劉海艷等（2016）研究表明，在日糧中添加β-胡蘿卜素能明顯增強早期雛雞的免疫器官指數。在本試驗中，與對照組相比，試驗組1小鼠脾臟重量顯著升高，試驗組3小鼠脾臟重量極顯著升高；與試驗組2相比，試驗組1小鼠脾臟重量、脾臟指數顯著升高，試驗組3小鼠脾臟重量、脾臟指數極顯著升高；與試驗組4相比，試驗組3脾臟重量、脾臟指數極顯著升高，與上述研究結果相一致。

肝臟作為關鍵的代謝器官，可調控動物機體的能量代謝和脂代謝。與對照組相比，試驗組1、2、3小鼠肝臟重量極顯著升高，試驗組1、2肝臟指數極顯著升高，試驗組3肝臟指數顯著升高；與試驗組4相比，試驗組1、2、3小鼠肝臟重量極顯著升高；與試驗組2相比，試驗組1肝臟重量極顯著升高；與試驗組3相比，試驗組1、2小鼠肝臟指數顯著升高；因此試驗組1可以更好提高新生小鼠肝臟代謝生長能力。

胃腸道是動物消化、吸收養分的主要器官，常以消化器官的重量和指數來衡量動物的消化吸收功能。丁酸梭菌可以促進畜禽腸道發育，有利于改善腸道的消化吸收功能 （趙敏孟等，2018）。與對照組相比，試驗組2小鼠十二指腸指數極顯著降低，試驗組4小鼠十二指腸指數顯著降低；與試驗組2相比，試驗組1、3小鼠十二指腸重量顯著升高；與試驗組4相比，試驗組1、3十二指腸重量升高。與對照組相比，試驗組3空腸重量極顯著升高，與試驗組4相比，試驗組1、3小鼠空腸重量極顯著升高；與對照組相比，試驗組1、2、3、4小鼠回腸重量極顯著升高，試驗組2、3、4小鼠回腸指數顯著升高。與對照組相比，試驗組1、2、3盲腸重量極顯著升高，試驗組1盲腸指數顯著升高；與試驗組2、4相比，試驗組1盲腸重量顯著升高；與試驗組4相比，試驗組3盲腸重量顯著升高。與對照組相比，試驗組2結腸指數顯著降低；與試驗組2相比，試驗組3結腸重量顯著升高。這與蔣一秀等（2021）研究發現飼料中添加丁酸梭菌可以提高仔鵝空腸和回腸重量研究結果相一致。因此試驗組1、3可以提高小鼠腸道消化吸收能力，提高營養物質與腸道的接觸面積，改善腸道對營養物質的吸收效率。

血清生化指標可以反映動物機體對營養物質的消化吸收以及營養代謝和機體的健康狀態，通過動物血清生化指標可以評估動物的健康狀況和生理代謝水平（趙晨等，2022）。血清中谷丙轉氨酶（ALT）主要分布在肝細胞內，當機體處于健康狀態時血清中谷丙轉氨酶活性較低，如果肝臟受損或損傷，會使血液中ALT的活性升高，所以ALT常作為檢測肝臟損傷的敏感指標之一；ALT在本試驗中與對照組相比，試驗組1、2、3小鼠ALT極顯著下降，因此試驗組1、2、3對小鼠肝臟損傷較小；γ-谷氨酰轉肽酶（GGT）是一種非特異的肝功能指標，與對照組相比，試驗組3、4顯著升高；血清中白蛋白（ALB）含量可以反映動物機體對飼料中蛋白質的消化吸收程度，通過對ALB的測定可以間接反映出動物機體的代謝功能（陳永華等，2012），當體內蛋白質的合成作用增強時，血清中ALB含量較高。盧連強等（2022）研究結果表明，在飼料中添加β-胡蘿卜素和胡蘿卜渣可以提升白蛋白、總蛋白的含量。任延利（2008）研究發現，在飼料中添加β-胡蘿卜素可以顯著提升血清總蛋白和白蛋白的含量。本試驗中，與對照組相比，試驗組1、2、3、4血清ALB含量極顯著升高，與上述研究結果相一致，可能為試驗組飼料蛋白質攝入量高且合成作用強，同樣在生長性能上也表現為試驗組1、2、3體重極顯著高于對照組，表明在飼料中同時添加β-胡蘿卜素和丁酸梭菌可提高小鼠生長性能。葡萄糖（GLU）的含量是動物機體重要的能量來源，GLU在正常范圍內的高低能反映機體能量代謝和糖代謝情況（代二朋等，2022；李巖等，2022），本試驗中與對照組相比，試驗組3小鼠GLU極顯著升高、試驗組1、4小鼠血糖顯著升高，結果表明在飼料中添加1.5‰胡蘿卜素和丁酸梭菌可提高新生小鼠對糖類物質的代謝。尿酸（UREA）可以衡量動物機體的蛋白質代謝水平和飼料氨基酸平衡狀況的直觀指標，UREA含量與體內氮沉積有密切的關系（盧連強等，2022）。在本試驗中與對照組相比，試驗組1、2、3、4血清UREA含量均極顯著下降，可能是由于新生小鼠生長需要大量蛋白質，因此機體會減少UREA的產生增加氮的保留，從而更有利于機體生長的發育。膽紅素是肝臟代謝的重要物質，肝細胞對血液中的膽紅素攝取、結合，當肝細胞受損時血液中膽紅素含量會升高，本試驗中與對照組相比，試驗組1小鼠血清總膽紅素，直接膽紅素顯著下降，與試驗組3、4相比，試驗組1小鼠血清總膽紅素極顯著降低，結果可說明在飼料中添加β-胡蘿卜素和丁酸梭菌不會對肝臟造成影響。本試驗結果顯示，各組小鼠血清生化指標均在正常范圍內，說明在飼料中添加β-胡蘿卜素和丁酸梭菌不會對新生小鼠產生不良反應，并且可以提高子代鼠生長性能、免疫功能，促進體內蛋白質的合成、利用。

4 小結

本試驗結果表明，在飼料中同時添加0.15‰β-胡蘿卜素和丁酸梭菌對于提高子代鼠生長性能、免疫功能、促進蛋白質的代謝合成更為有效。