女性不同生理周期性激素六項參考區間驗證

時秀云　張允標　鄭綺菡

摘要：目的 通過驗證不同生理周期健康女性性激素六項的生物參考區間，證實實驗室所選用的參考區間能夠符合本地人群特征。方法 明確健康女性不同的生理周期并篩選合適的參考人群，實施性激素六項參考區間的小樣本驗證，判斷生物參考區間的適用性。結果 （1）卵泡早期E₂有18例數據通過；（2）卵泡中期E2有18例數據通過；卵泡中期P有18例數據通過；卵泡中期FSH有18例數據通過；卵泡中期LH有18例數據通過；（3）排卵高峰期E₂有20例數據通過；（4）黃體中期E₂有20例數據通過；黃體中期P有18例數據通過；黃體中期FSH有18例數據通過；黃體中期LH有19例數據通過；（5）周期中期高峰FSH有20例數據通過；周期中期高峰LH有18例數據通過；（6）絕經前PRL有19例數據通過；絕經后PRL有19例數據通過；（7）睪酮T有20例數據通過。結論 根據生物參考區間驗證的判斷標準，可知不同生理周期性激素六項的生物參考區間均驗證通過，能夠符合本地人群特征。

關鍵詞：性激素六項；參考區間；驗證；實驗室管理

近年來，由于各種因素造成女性性激素水平異常、月經紊亂、不孕不育的患者增多，故性激素項目的準確檢查尤為重要。而生物參考區間作為性激素項目性能參數之一，更應該適用于受檢人群，避免過度診療。本文按照美國病理家學會（CAP）在實驗室質量管理要求和中國合格評定國家認可委員會（CNAS）在實驗室認可要求[1]中的內容，對女性性激素六項采取小樣本驗證方案進行生物參考區間的驗證。

1材料及方法

1.1 女性不同生理周期劃分

征求臨床醫生意見，明確女性不同生理周期劃分界限，并據此篩選合適的健康人群采集樣本進行性激素項目的檢測。

1.2 臨床樣本篩選要求及健康調查

篩選單縣本地不同年齡段的健康成年女性個體，妊娠婦女除外。篩選的參考個體至少應有良好的生活習慣、無近期服藥史、無高血壓及家族遺傳病史、月經周期規律（月經期滿28～30 d）等，并按照《健康調查表》中的內容填寫相關信息，如是否為月經期和月經期天數（即從月經來潮第一天開始計算），以便事后安排樣本采集事項。

1.3 檢測設備及試劑耗材

采用美國貝克曼化學發光檢測系統DXI800，試劑耗材使用原裝配套。

1.4 方法

1.4.1 檢測系統準備

開始實施參考區間驗證前，需先對檢測系統進行可靠性評價，至少應滿足試驗當天室內質控要求，選用室間質評成績滿意的檢測系統進行檢測。

1.4.2 參考個體準備及樣本采集

首先完成合格參考個體的篩選，然后依據《健康調查表》中的信息對合格的參考個體進行分組，并編制《女性性激素項目生理周期調查表》。樣本采集時需提前1～2 d通知待采集人員，并明確告知采集注意事項。具體患者采集時的注意事項及相關要求可見科室編制的《檢驗項目手冊》。

1.4.3 參考區間驗證方案

參考區間驗證方案的制定可參考行業標準《臨床實驗室檢驗項目參考區間的制定》[2]、CNAS文件《醫學實驗室質量和能力認可準則在臨床化學檢驗領域的應用說明》，及科室編制的《生物參考區間驗證和建立程序》中的內容。一般從參考人群中至少選出20人，剔除離群值后不滿20例需補足，然后對20例樣本進行檢測，并將檢驗結果與待驗證的參考區間限值比較。若落在參考區間限值外的測定值不超過2個，則驗證通過。需說明的是，同一性激素項目在不同的生理周期檢測水平變動較大，試驗時需按照不同的生理周期對不同的性激素項目進行分組檢測，每組至少有20例數據。女性不同生理周期界定及相關性激素項目為卵泡早期（月經第5～7天）檢測E2，卵泡中期（月經第12～14天）檢測E₂、P、FSH、LH，排卵高峰期（月經周期的第14天左右）檢測E₂，黃體中期（月經第22天左右）檢測E₂、P、FSH、LH，周期中期高峰（下次月經來潮前14天）檢測FSH、LH。

另外，泌乳素和睪酮項目檢測水平相對穩定，不以女性生理周期的變化而發生較大波動。故泌乳素和睪酮項目女性參考區間的驗證，會篩選不同年齡段的成年健康女性作為參考人群，同上實施小樣本驗證。

1.4.4 統計學處理

利用EXCEL 2003軟件進行數據處理和統計學分析。

2結果

廠家提供的參考區間如下。卵泡早期E₂：15.16～127.81 pg/ml；卵泡中期E₂：19.86～148.13 pg/ml；卵泡中期P：0.31～1.52 ng/ml；卵泡中期FSH：3.85～8.78mIU/ml；卵泡中期LH：2.12～10.89 mIU/ml；排卵高峰期E₂：29.42～442.62 pg/ml；黃體中期E₂：30.34～274.24 pg/ml；黃體中期P：5.16～18.56 ng/ml；黃體中期FSH：1.79～5.12 mIU/ml；黃體中期LH：1.2～12.86 mIU/ml；周期中期高峰FSH：4.54～22.51 mIU/ml；周期中期高峰LH：19.18～103.03 mIU/ml。卵泡早期E2有18例數據通過；卵泡中期E₂有18例數據通過；卵泡中期P有18例數據通過；卵泡中期FSH有18例數據通過；卵泡中期LH有18例數據通過；排卵高峰期E₂有20例數據通過；黃體中期E₂有20例數據通過；黃體中期P有18例數據通過；黃體中期FSH有18例數據通過；黃體中期LH有19例數據通過；周期中期高峰FSH有20例數據通過；周期中期高峰LH有18例數據通過。見表1～2。

廠家提供的參考區間：絕經前的泌乳素水平為70.808～566.464 mIU/L，絕經后的泌乳素水平為58.088～416.368 mIU/L。由此可知，絕經前PRL有19例數據通過；絕經后PRL有19例數據通過。另外，健康女性睪酮分泌水平不受生理周期及年齡的影響，相對穩定，經驗證有20例數據通過。見表3。

3討論

生物參考區間是解釋檢驗結果正常還是異常的重要依據，是分析檢驗信息的重要參數，實驗室明確檢驗項目的生物參考區間意義重大。受年齡、性別、民族、居住地、體質、生理、生活習慣、遺傳背景、生物學變異等因素影響，實驗室需慎重建立或驗證生物參考區間。

參考文獻

[1] 叢玉隆，馮仁豐，陳曉東.臨床實驗室管理學[M].北京：中國醫藥科技出版社，2004：72-73， 89-102，123-129.

[2] 中華人民共和國衛生部.臨床實驗室檢驗項目參考區間的制定：WS/T 402—2012[S].北京：中華人民共和國衛生部，2012.