柿葉美白面膜制劑工藝的研究

王含笑，張毓珈，李 猛，呂 哲，李東霞

（大連大學醫學院，遼寧 大連 116622）

柿葉為雙子葉柿樹科柿樹屬柿（Diospyros kakiThunb.）的新鮮或干燥樹葉?，F代研究表明，柿子葉的活性成分主要是三萜類、多酚類、揮發性成分等化學成分，具有抗菌消炎、活血降壓、預防貧血、抗氧化等作用，在臨床上主要用于治療咳喘、降低血壓、消渴及潰瘍?？顾ダ系拿廊菪Ч饕怯捎诙喾宇愇镔|，以單寧酸為主，其與自由基發生反應，能產生強大的抗氧化性。研究表明，絕大多數的皮膚老化與自由基產生的損害相關。因柿葉中的多酚類物質對消除自由基作用顯著，故以柿葉提取物為主要原料所制成的面膜可用于祛斑、延緩皮膚的老化。

目前柿葉產品的開發利用較少，且通常是柿葉茶和柿葉飲料等初級產品，利用柿葉中的活性成分開發復方制劑更是稀少。為了對柿葉資源進行進一步開發，充分發揮柿葉單寧的有效作用，以柿葉為主要原料，研制具有抗氧化、美白祛斑功能的面膜。本制劑所用原料來源充足且價格低廉，可為人們提供更加經濟、安全有效的美白面膜選擇。

1 試藥與儀器

1.1 試藥

柿葉產于陜西省華陰市，經大連大學中藥基礎教研室蘇明教授鑒別為柿科植物柿（Diospyros kakiThunb.）的葉。明膠，CMC-Na，甘油，聚丙烯酰胺，尼泊金乙酯，Na2HPO4·12H2O，NaH2PO4·12H2O，L-酪氨酸，丙二醇，無水乙醇，活性炭。

1.2 儀器

電熱恒溫鼓風干燥箱（DHG-9076A，上海市精宏試驗設備有限公司）、分析天平（AL204，梅特勒-托利多儀器上海有限公司）、電子天平（JM2102，余姚紀銘稱重校驗設備有限公司）、調溫電熱套（KDM，山東新華電熱儀器廠）、旋轉蒸發儀（N-1300，東京理化器械株式會社）、恒溫水浴鍋（HH-2，上海梅香儀器有限公司）、離心機（TDL80-2B，北京市醫用離心機）、比例光束分光光度計（U-5100型，日本株式會社日立高新技術）

2 試驗方法與結果

2.1 試驗方法

2.1.1 柿葉提取液的制備

選用干凈柿葉，置50 ℃烘箱內烘干，碾碎至適當粗細，稱取柿葉粉末10 g，按料液比1∶10，取70%濃度乙醇浸泡30 min，加熱回流提取2次，每次40 min，合并提取液。過濾后加入定量活性炭，靜置24 h，過濾至澄清。采用旋轉蒸發儀去除乙醇（30℃，15 r·min-1），用去離子水稀釋至250 mL，得柿葉提取液。

2.1.2 柿葉面膜的制備

分別稱取明膠、CMC-Na和甘油，各加入適量去離子水，80 ℃水浴加熱，將其混合，充分攪拌后水浴保溫；稱取適量柿葉提取液，加入聚丙烯酰胺，滴加少量乙醇，攪拌溶解；稱取適量尼泊金乙酯和香精，加適量水溶解。將上述三種液體混合，并加入適量去離子水混勻， 冷卻至室溫。

2.1.3 單因素試驗

（1）CMC-Na和明膠的含量。按上述方法制備3份面膜，將CMC-Na和明膠按1%、2%、3%比例混合，其他條件一致，觀察面膜形態及流動性，確定最優含量。

（2）聚丙烯酰胺的含量。按上述方法制備3份面膜，將聚丙烯酰胺以0.3%、0.5%、0.7%的比例加入面膜中，其他條件一致，觀察面膜的粘度，確定最優含量。

（3）甘油的含量。按上述方法制備3份面膜，將甘油以3%、4%、5%的比例加入面膜中，其他條件一致，觀察保濕度，確定最優含量。

（4）柿葉提取液的含量。將柿葉提取液分別以8%、10%和12%的比例加入正交試驗所得的最優配方中，進行單因素試驗，通過檢測面膜中酪氨酸酶的抑制率和面膜的pH值，確定柿葉提取液的最佳添加量。

2.1.4 面膜配方的優化

根據單因素試驗結果設計正交試驗，比例如表1。以外觀（光澤度）、挑起（拉絲感、鋪展性）、涂抹（粘稠度、吸收性、保濕度、爽滑感）為考察指標，確定最佳配方。

表1 L9 (33) 面膜配方正交試驗因素水平表

取Na2HPO4·12H2O 2.680 g、NaH2PO4·12H2O 1.380 g，分別用去離子水于50 mL容量瓶中定容，用時等量混勻。

（1）酪氨酸酶溶液的制備。取新鮮的去皮土豆10 g，切塊冷凍。將洗凈的研缽和10 mLPBS放入冰箱冷凍20 min，取出，將土豆和PBS放入研缽充分搗碎，用四層紗布過濾，置離心機中離心（4 500 r·min-1，10 min），取上層清液，用PBS于50 mL容量瓶中定容，得酪氨酸酶溶液。

（2）L-酪氨酸溶液的制備。精密稱取L-酪氨酸0.112 5 g，用PBS溶液溶解并于25 mL容量瓶中定容。

（3）酪氨酸酶活性抑制率的測試。按表2 所示，用移液管精密量取B1、B2、C1、C2四組反應溶液，置37 ℃水浴鍋中，水浴10 min，以B2為B1的參比，C2為C1的參比，分別測出其在475 nm處的吸光度A1和A2，酪氨酸酶抑制率為： 抑制率=（1-A2/A1）×100%，A1未加樣品，A2加入樣品。

表2 酪氨酸酶活性抑制率測試試劑用量

2.1.5 柿葉美白面膜質量檢測

（1）性狀與細膩度。取柿葉美白面膜5g，置于10 mL的燒杯中，觀察其外觀性狀，并涂布于皮膚上，通過感官指標評價其細膩度。

（2）pH值。取柿葉美白面膜1 g，溶解于20 mL去離子水中，加熱微沸，冷卻至室溫后用pH計測定pH值。

（3）耐寒、耐熱試驗。取柿葉美白面膜5 g，裝入10 mL的試管中，平行6組，全部用封口膜封好后，分別置于0 ℃、-10 ℃、-20 ℃恒定溫度的冰箱和30 ℃、40 ℃、50 ℃恒定溫度的水浴鍋中，貯存4 h，觀察經寒、熱變化后，面膜的外觀性狀變化。

（4）保濕性試驗。將載玻片貼上醫用透氣膠帶作為載體，記錄此載體的質量為m，將0.30 g制作完成的面膜均勻涂于膠帶表面，記錄此時玻璃板和樣品的質量m0，將其置于恒溫恒濕放有變色硅膠的干燥器中（相對濕度為48%），4 h、24 h稱量質量mt，計算保濕率。保濕率=（mt-m）/（m0-m）×100%

（5）離心試驗。在常溫狀態下，在3支10 mL離心管中分別加入2 g柿葉面膜，以4 500 r·min-1離心20 min，觀察經離心處理后面膜的變化。

（6）皮膚測試。選取5名前臂內側皮膚健康無創傷的志愿受試者，洗凈受試皮膚部位后，于每名受試者左前臂內側皮膚表面均勻涂敷0.5 g面膜樣品，以右前臂的相同部位作為空白對照，12 h后用溫水洗凈，對比觀察受試部位有無紅腫、起疹等不良現象，連續測試3天。

2.2 試驗結果

2.2.1 單因素試驗結果

（1）CMC-Na和明膠含量對面膜性狀的影響。當CMC-Na和明膠在面膜中的含量為1.0%時，面膜流動性過強，質地略稀；當含量為3.0%時，面膜流動性變差，質地略稠，不易挖取涂抹。故初步確定CMC-Na和明膠在面膜中的含量為2%。

（2）聚丙烯酰胺的含量對面膜性狀的影響。在0.3%~0.7%的范圍內，面膜中聚丙烯酰胺的含量增加，面膜的粘度隨之增加，影響使用感，過多的聚丙烯酰胺會使面膜拉絲而不易斷。故初步確定聚丙烯酰胺在面膜中的含量為0.3%。

（3）甘油含量對面膜性狀的影響。隨著保濕劑甘油含量的增加，面膜的保濕效果并沒有得到明顯的加強。但甘油含量在3.0%時，面膜黏度較差；甘油含量在4.0%和5.0%時，黏度適中。綜合考慮節約成本及粘度適中的原則，初步確定面膜中甘油的含量為4.0%。

2.2.2 正交試驗結果

表3結果可得，各因素對面膜感官評價影響的主次順序為A>B>C，即CMC-Na/明膠對產品感官影響最大，聚丙烯酰胺次之，甘油對其影響最小，并得出最佳配方為A2B1C3。

表3 正交試驗設計與結果

由表4可見，在柿葉提取液含量為8%~12%時，面膜的pH為6.64~6.39，符合QB/T 2872-2017對面膜pH的要求（3.5~8.5）。通過酪氨酸酶活性測試得出，隨柿葉提取液添加量的增加，面膜對酪氨酸酶的抑制率也隨之加強，可達到63.5%~68.7%，因此制得的面膜可以在一定程度上抑制酪氨酸酶的活性，證明其具有祛斑美白的功效，但面膜的粘度和顏色也會隨著柿葉提取液添加量增加而一同增加。綜合考慮面膜粘度適中、節約成本及美觀的原則，選擇10%為柿葉提取液的最佳添加量。

表4 柿葉提取液含量的選擇

2.2.3 面膜質量檢測

按由表5可見，面膜的干燥時間適中，在起到保濕作用的同時，還利于美白祛斑成分的吸收。常溫狀態下，該面膜的pH值符合QB/T 2872-2017關于面膜的規定。在高溫和寒冷狀態前后，其顏色、狀態未改變，表明面膜在寒、熱環境下狀態穩定。離心處理后，未發現明顯分層現象，表明面膜在離心狀態下的性質穩定。

表5 面膜質量檢測結果

5名受試者在經皮膚試驗后，受試左前臂皮膚相比同位置的右前臂皮膚更為水潤，未出現紅腫、皮疹等不良反應，也沒有瘙癢、刺痛、過敏等現象，表明該款面膜性質溫和，對皮膚沒有刺激性。

3 結論

文章以柿葉提取液為原料，研制了一款具有祛斑功效的天然美白面膜，通過正交試驗確定該柿葉美白祛斑面膜以明膠1.5%，CMC-Na1.5%，甘油5.0%，聚丙烯酰胺0.1%，柿葉提取液10%為最佳配方。所制得的柿葉美白祛斑面膜為淡褐色、無刺激性氣味、易涂展、質地細膩無明顯顆粒感，在寒、熱狀態時穩定性良好，各項指標符合QB/T 2872-2017面膜行業的有關規定。對該面膜進行酪氨酸酶活性測試，得出其抑制率可達到66.2%，具有較高的抗氧化能力和良好的保濕活性，且對皮膚無刺激性。