自身免疫性肝病相關自身免疫性肝病抗體譜的檢測及臨床意義研究

渠 晶

(滕州市中心人民醫院 山東 棗莊 277599)

自身免疫性肝病主要因自身免疫系統發生異常進而導致肝膽損傷，引發系列疾病，臨床癥狀主要表現為乏力、嗜睡、黃疸、食欲降低、腹脹等，目前無完全治愈案例，但可通過相關治療進行緩解[1-3]。經相關研究表明，肝病類型的不同和病理特征自身免疫性肝病的特點各不相同，而單一的診斷結果并不能作為判斷病情的依據[4]。而采用ALD抗體譜檢測效果更為顯著，同時也為了更加確定自身免疫性肝病采用抗體譜檢測對免疫肝病的診斷價值，本文主要探討自身免疫性肝病患者通過分析其臨床資料，具體報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

選取2020年1月～2021年12月本院收治的180例自身免疫性肝病患者為研究對象，同時并收集60例健康體檢人群作為對比，其中自身免疫性疾病的類型主要包括AIH(自身免疫性肝炎)60例為AIH組、PBC(原發性膽汁性肝病)60例為PBC組、PSC(原發性硬化膽管病)60例為PSC組，其中AIH組患者中男性和女性分別占38例、22例，年齡為23～64歲，平均年齡為(45.68±5.88)歲，PBC組患者中男性和女性分別占35例、25例，年齡為22～65歲，平均年齡為(46.05±5.62)歲，PSC組中男性和女性分別占36例、24例，年齡為22～66歲，平均年齡為(45.43±5.71)歲；健康體檢組男性和女性分別占34例、26例，年齡為23～67歲，平均年齡為(44.82±5.43)歲；納入標準：所有患者均符合《自身免疫性肝病基礎與臨床》[5]對所有自身免疫性肝炎疾病的診斷依據；所有患者均自愿參與研究；依從性良好；排除標準：患者伴有其它肝臟疾病，如肝腫瘤、酒精肝硬化等；精神障礙疾病。四組患者的性別、年齡等臨床資料對比無顯著差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

所有患者均在空腹狀態下抽取3ml靜脈血，保存于真空采血管中，并作離心分離，分離速度為每分鐘3000r，時間為10min，并將分離出的血清放置于冰箱中，冰箱的溫度設定為20℃。本次研究中所有抗體譜免疫球蛋白試劑盒均由同一公司生產的，且所有檢測流程均按照試劑盒步驟完成。

1.2.1間接免疫熒光法檢測

間接免疫熒光技術的應用主要用來檢測ANA(血清抗核抗體)、AMA(抗線粒體抗體)、SMA(抗平滑肌抗體)，間接免疫熒光法以Hep-2細胞作為細胞基質片并提供抗原來源，將其與大鼠胃基質的冰凍生物薄片以1：100的比例進行血清配比，并將兩種基質均溫水中浸泡30min，洗滌干凈后將羊抗人血清IgG放入后再持續30min進行洗片和封片，并在熒光顯微鏡下觀察結果。判斷ANA或AMA的陽性依據主要觀察組織或細胞內是否出現特異性黃綠色熒光，若存在黃綠色熒光則表示為陽性。

1.2.2免疫印跡法檢測

免疫印跡法主要是以高分辨率凝膠和免疫化學技術相結合的一種雜交技術，主要可用來檢測SLA/LP(抗可溶性肝抗原、肝胰抗原)、LKM-Ⅰ型，其中將五種不同的相對分子質量采用AMA-M2亞型抗原做標本。其比例可依據1：50，將30μl和1.5ml稀釋液進行混合，并觀察膜的反應情況；振蕩孵育可在常溫下進行，持續時間為1h，清洗膜后將抗人IgG滴入，在常溫下晃動1h進行洗膜，可在NBT/BC IP上顯色10min以蒸餾水下結束反應。陽性判斷的標準可根據對照條帶圖對比，若特定區域顯示顏色或顏色較為清晰則為陽性。

1.3統計學方法

2 結果

2.1所有受檢者的血清ANA，AMA抗體測定結果比較

與其它三組對比，健康受檢組的陽性率較低，其中AIH 組患者的血清ANA陽性率高于PBC和PSC組，差異顯著(P<0.05)，而PBC組和PSC組的血清ANA陽性率對比無顯著差異(P>0.05)，PBC組與其它三組對比AMA陽性率較高，差異顯著(P<0.05)，如表1所示。

表1 四組受檢者血清ANA、AMA抗體測定結果的比較[n(%)]

2.2四組受檢者SMA滴度>1/320，SLA/LP與LKM-1抗體測定結果的比較

與其它三組對比，AIH組的SMA滴度>1/320，SLA/LP與LKM-1抗體陽性率較高，差異顯著(P<0.05)，而PBC組、PSC組和健康受檢組的SMA滴度>1/320，SLA/LP與LKM-1抗體陽性率對比無顯著差異(P>0.05)，如表2所示。

表2 四組受檢者SMA滴度>1/320，SLA/LP與LKM-1抗體測定結果的比較[n(%)]

3 討論

自身免疫性肝病的疾病類型較多，依據組織病理學和免疫學可分為AIH、PBC、PSC等，當前，臨床對自身免疫性肝病的發病機制尚未有明確結石，但被臨床學者普遍認為誘發的原因是支持抗原被激活，還有學者認為和病毒感染有很大關聯，肝組織在被乙肝病毒或麻疹等感染后其肝細胞膜則會被白細胞抗原給活化，通過刺激自身B細胞而釋放出更多的抗體，進而對自身肝臟組織造成很大損害，若隨著病情的發展下，會引發肝功能衰竭或肝硬化等嚴重疾病，若不及時治療還會造成患者死亡[6-9]。因自身免疫性肝病的抗體具有一定特異性，且抗體的滴度水平也相對較高，為此自身免疫性肝病患者的診斷科采用自身抗體譜進行檢測[10]。

抗線粒體抗體對檢測原發性膽汁肝硬化具有較強的特異性，并且抗可溶性肝抗原/抗胰抗原也是診斷AIH較強且有效的一種方式，為此，采用自身抗體譜檢測對自身免疫性肝病的早期診治具有重要意義[11-12]。通過不同自身免疫性肝病的不同其對血清AMA水平的影響也存在一定差異，而影響最小的則是AIH。通過本次研究結果發現，與其它三組對比，健康受檢組的陽性率較低，其中AIH 組患者的血清ANA陽性率高于PBC和PSC組，而PBC組和PSC組的血清ANA陽性率對比無顯著差異(P>0.05)，PBC組與其它三組對比AMA陽性率較高；與其它三組對比，AIH組的SMA滴度>1/320，SLA/LP與LKM-1抗體陽性率較高，差異顯著(P<0.05)，而PBC組、PSC組和健康受檢組的SMA滴度>1/320，SLA/LP與LKM-1抗體陽性率對比無顯著差異(P>0.05)；由此表明，臨床采用自身抗體譜檢測可顯著篩查自身免疫性肝病，同時也是作為檢測自身免疫性肝病的重要指標。

綜上所述，臨床采用自身抗體譜檢測肝臟疾病的應用效果較為顯著，主要用于鑒別自身免疫性肝病，而臨床治療的依據可結合自身抗體譜的檢測情況和患者自身癥狀及其它檢測指標決定治療策略，進而才能為治療自身免疫性肝病的效果提供重要參考依據。