藥品微生物檢驗與化妝品微生物檢驗的異同

陳彩霞，李建麗*，阮班展

（1.海南省食品藥品檢驗所海口分所，海南海口 570311；2.海南醫學院，海南海口 571199）

藥品微生物限度檢查是保障藥品質量安全的重要控制措施之一，是《中華人民共和國藥典》指定用于判斷非無菌制劑及其原、輔料受到微生物污染程度的標準方法，包括微生物技術法和控制菌檢查法[1]。化妝品是指以涂抹、噴灑或者其他類似方法，散布于人體表面的任何部位，如皮膚、毛發、指趾甲、唇齒等，以達到清潔、保養、美容、修飾和改變外觀，或者修正人體氣味，保持良好狀態為目的的化學工業品或精細化工產品[2]。近年來，因化妝品感染微生物引發的質量安全問題越發突出[3-5]。《化妝品安全技術規范（2015年版）》中規定化妝品微生物指標主要包括菌落總數、霉菌和酵母菌總數、耐熱大腸菌群、金黃色葡萄球菌以及銅綠假單胞菌等[6]，用于評價化妝品在生產、包裝、運輸各個環節的衛生質量狀況。筆者所在的實驗室同時兼具了藥品及化妝品檢測職能，結合日常工作經驗，筆者對藥品及化妝品微生物檢驗的異同進行深入分析，旨在為從事相關工作的機構與同行提供參考。

1 人員方面的異同

人員是實驗室的第一資源，人員的專業背景、培訓經歷及技術能力是藥品及化妝品微生物檢測結果準確的重要保障。《中華人民共和國藥典（2020年版）》第四部通則9203《藥品微生物實驗室質量管理指導原則》要求，從事藥品微生物檢驗人員應具備微生物學或相近專業的教育背景，檢驗人員必須熟悉檢驗檢測方法、程序、檢查的目的和結果評價，檢驗人員上崗前必須接受崗前培訓并考核合格后持證上崗，且保證持續教育，保證知識和技能不斷更新以滿足要求[7]。化妝品微生物檢驗對人員相關資質要求沒有相應的文件說明，筆者建議，實驗室可以借鑒藥品微生物檢驗人員具體要求，結合化妝品微生物檢驗的特點，制定相應的化妝品微生物檢驗人員的資格條件。

2 儀器設備方面的異同

開展微生物檢測離不開儀器設備，微生物實驗室應配備與微生物檢驗類型、技術能力及工作量相適宜的儀器設備，包括電子天平、高壓蒸汽滅菌鍋、接種環、生物安全柜、超凈工作臺、培養箱、水浴鍋以及微生物鑒定儀等，且實驗室應制定儀器設備管理制度,對儀器設備的采購、安裝、驗收、維護維修、使用登記以及日常監測等各方面進行規范化管理[8]。藥品微生物檢驗與化妝品微生物檢驗使用的儀器類型及管理上沒有差別，對于高壓蒸汽滅菌鍋、培養箱等影響檢測數據準確性的儀器，應在其運行過程中對關鍵參數（如溫度、壓力）進行連續觀察及記錄，對于容易發生交叉污染微生物儀器設備，如生物安全柜、冰箱等應以工作類型及工作量為依據制定相應的清潔和消毒制度，防止交叉污染。

3 物料方面的異同

培養基是微生物檢驗必不可少的物質基礎，培養基的質量直接影響微生物檢測的結果，符合檢驗標準的培養基制備方法、貯藏條件和質量控制是微生物實驗質量控制的關鍵環節。《中華人民共和國藥典》對藥品微生物檢驗用培養基的購買、驗收、配制、滅菌、分裝、貯藏、使用記錄及質量控制等全生命周期均有規定，常規的監控項目包括pH值、適用性檢查或靈敏度檢查試驗等，常用的培養基有胰酪大豆胨瓊脂、沙氏葡萄糖瓊脂、麥康凱瓊脂培養基以及紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基等，不同類型的培養基根據標準要求進行促生長能力、抑制能力及指示能力的測試，培養基使用性檢查所用的試驗菌株也有嚴格的要求[1]。化妝品微生物檢驗與藥品微生物檢驗中培養基質量控制的原理相同，培養基的配制、滅菌等環節基本一樣，但化妝品微生物檢驗沒有要求進行培養基適用性檢查，且化妝品培養基一般含有可以中和防腐劑的吐溫80成分，如菌落總數用到的卵磷脂吐溫80瓊脂，且菌落總數項目檢驗要求在培養基中加入0.5%的TTC溶液，用于區別化妝品中的顆粒與菌落[9]。此外需要注意的是，化妝品微生物檢驗用培養基配制要使用蒸餾水，應注意規范使用TTC[9]，避免微生物培養時出現假陰性現象、抑菌現象和次生菌現象等。藥品微生物檢驗時，對于一些中成藥，如樣品本底有雜質，可以借鑒化妝品使用TTC，從而提高檢驗結果可靠性。

4 檢驗方法方面的異同

從檢驗標準來看，兩種檢驗方法都以我國頒布的相關法規和法典為依據，藥品微生物檢驗方法與化妝品微生物檢驗方法各具特色又相互補充，在實際檢驗應用過程中可以取長補短，互相借鑒。藥品微生物限度檢查主要依據國家藥典委員會編制的《中華人民共和國藥典》檢查藥品的非無菌制劑及原、輔料等的微生物污染程度，并判定其是否超過規定限度。《中華人民共和國藥典》每5年更新一個版本，沒有對動物實驗制定相關規定，目前執行的是2020年版[10]。化妝品微生物檢驗以《化妝品安全技術規范（2020年版）》為依據，檢驗標準的更新時限沒有規律。此外，《中華人民共和國藥典》對藥品微生物檢驗方法投入使用前有嚴格要求，必須進行方法適用性檢查，證明該方法適用于該樣品微生物檢測后方可采用，而現行的化妝品微生物檢驗方法沒有相關規定，這與化妝品生產中大量使用的防腐劑有矛盾之處。《化妝品安全技術規范（2015年版）》中可供選擇的化妝品防腐劑達51種，化妝品中的防腐劑對微生物有一定的抑制作用[11]，雖然化妝品使用的培養基中增加了中和劑，如卵磷脂和吐溫80成分，以去除化妝品中殘留的防腐劑，提高檢出率，但實際檢驗過程中還是會出現假陰性現象。筆者結合多年化妝品檢測經驗，在樣品溶解時適當升溫至40～44 ℃使樣品充分溶解，或增加助溶劑如石蠟等，大大提升了化妝品微生物檢驗結果的準確度。由于化妝品中防腐劑的抑菌能力很強，可以借鑒藥品進行方法學適用性檢查，確定方法的適用性后再運用于日常檢驗工作。

5 環境方面的異同

實驗室環境對微生物檢驗有著很大影響，先進的硬件設施及符合標準要求的實驗環境是保證微生物檢測結果真實性與準確性的重要因素。藥品微生物檢驗對環境的要求非常嚴格。藥品微生物實驗的各項要求必須在專屬區內進行，藥品微生物限度檢查應在不低于D級區下的生物安全柜或B級潔凈區域內進行，A級區和B級區的空氣供給應配備終端高效空氣過濾器，此外，《中華人民共和國藥典》通則“9205藥品潔凈實驗室微生物監測和控制指導原則”（以下簡稱“通則9205”）中還對實驗室的監測項目與監測頻率、人員的進出監測、更衣流程等進行了全面詳細的規定[1]。相對于藥品，化妝品微生物檢驗環境相對寬松，沒有明確的文件要求。目前大部分化妝品檢驗機構在潔凈區域內采用單方向工作流程進行檢驗，實驗室可以參考“通則9205”制定的標準操作規程對化妝品的監測環境進行監測，如實驗室條件允許，筆者認為實驗室應設置獨立的藥品微生物檢測區與化妝品微生物檢測區，如受客觀條件限制，也應做好相應控制措施，降低交叉污染以及假陽性、假陰性結果出現的風險。

6 結語

從人、機、料、法、環5大方面對比分析藥品微生物檢驗與化妝品微生物檢驗發現，二者既有相同點又各自特點，但總體來講藥品微生物檢查法比化妝品微生物檢查法更具嚴謹性與先進性。例如，藥品的方法在使用時必須進行方法學適應性實驗，這是化妝品沒有的，化妝品對菌落計數的各種情況作出的詳細規定是藥品所不具備的。作為同時具備藥品與化妝品微生物檢驗職能的機構，要深入學習兩者之間的關聯性，在實際檢驗過程中靈活運用，互相借鑒、取長補短，推動實驗室管理水平與技術能力上新臺階，為食品化妝品監管提供技術支撐。