血清白細胞介素-12、轉化生長因子-β與急性白血病患者化療效果的關系

尹晗，武玉慧，宋嶺

(信陽市中心醫(yī)院 血液內科，河南 信陽 464000)

急性白血病(acute leukemia，AL)是一種以貧血、發(fā)熱、出血等為主要特征的惡性克隆疾病，病因至今尚未完全闡明，一般認為與遺傳因素、物理因素、化學因素等有關[1]。當前，臨床多采用柔紅霉素、長春新堿等化療藥物治療AL，可殺滅白血病細胞，延長患者生存期。但盡管如此，仍有部分AL患者化療后癥狀未得到顯著改善，甚至出現(xiàn)疾病復發(fā)現(xiàn)象，導致患者生命安全受到嚴重威脅。血清白細胞介素-12(interleukin-12，IL-12)是一種免疫調節(jié)因子，可刺激T細胞增殖，提高T淋巴細胞和自然殺傷細胞活性，在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用[2]。血清轉化生長因子-β(transforming growth factor β，TGF-β)是轉化生長因子家族的多功能細胞因子，具有抑制免疫活性細胞增殖、調節(jié)免疫功能的作用[3]。研究表明，免疫功能紊亂是AL患者病情進展的重要原因[4]。由此，推測血清IL-12、TGF-β可能與AL患者化療效果存在一定聯(lián)系。基于此，本研究旨在探討血清IL-12、TGF-β與AL患者化療效果的關系。

1 資料與方法

1.1 研究對象本研究采用前瞻性研究方法，研究對象來自2019年2月至2021年2月在信陽市中心醫(yī)院接受治療的AL患者。本研究遵循醫(yī)學倫理基本原則，獲得醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準。

1.2 入選標準納入標準：(1)符合急性髓系白血病的診斷標準[5]；(2)入院前未接受過化療；(3)認知功能正常；(4)首次確診；(5)患者簽署知情同意書。排除標準：(1)肝、腎功能異常；(2)合并自身免疫性疾病；(3)存在化療禁忌證；(4)合并惡性腫瘤；(5)合并精神失常；(6)治療期間發(fā)生嚴重毒副反應，無法繼續(xù)完成治療。

1.3 研究方法

1.3.1治療方法 采用標準誘導方案對AL患者進行化療；采用柔紅霉素(深圳萬樂藥業(yè)有限公司，國藥準字H44024361)、阿糖胞苷(哈爾濱萊博通藥業(yè)有限公司，國藥準字H20046101)治療，第1～3天靜脈滴注柔紅霉素，劑量為每日45 mg·m-2；第1～7天靜脈滴注阿糖胞苷按，劑量為每日100 mg·m-2；治療過程中對患者進行補液、止吐、護肝等對癥治療，監(jiān)測患者血象變化，血紅蛋白<60 g·L-1時給予懸浮紅細胞輸注，血小板<10×109L-1或有出血傾向給予血小板輸注。治療1個療程。

1.3.2化療效果評估方法 治療1個療程后，參照《血液病診斷和療效標準》[6]評價AL患者的化療效果。(1)完全緩解。形態(tài)學完全緩解：原始細胞<5%，無髓外白血病持續(xù)存在或無伴奧氏小體的原始細胞，脫離輸血，中性粒細胞計數(shù)>1.0×109L-1，血小板計數(shù)>100×109L-1。細胞遺傳學完全緩解：染色體恢復為正常核型。分子學完全緩解：特殊遺傳學標志或免疫表型轉為陰性。形態(tài)學完全緩解而血細胞計數(shù)未完全恢復：除中性粒細胞、血小板未完全恢復外，滿足完全緩解中的其他標準。(2)部分緩解。血細胞計數(shù)恢復正常，骨髓原始細胞比率為5%～25%(同時較治療前下降50%以上)；若仍見奧氏小體，即使原始細胞<5%也定義為部分緩解。(3)治療失敗。治療失敗分為5型：①耐藥，誘導結束后生存≥7 d，但外周血或骨髓內仍存在白血病細胞；②骨髓抑制期病死，誘導結束后生存≥7 d，病死于骨髓抑制、血細胞減少期間；③原因尚不肯定，誘導結束7 d內病死；誘導治療結束7 d后病死；外周血無原始細胞、未進行骨髓象檢查；未完成第1療程治療；④形態(tài)學復發(fā)；⑤分子或遺傳學復發(fā)。(4)復發(fā)。形態(tài)學復發(fā)：白血病細胞出現(xiàn)于外周血中，原始細胞≥5%或有新的病態(tài)造血。分子和/或遺傳學復發(fā)：已達到細胞遺傳學或分子水平完全緩解的患者又出現(xiàn)細胞遺傳學或分子異常。根據化療效果將患者分為緩解組(完全緩解、部分緩解)、未緩解組(治療失敗、復發(fā))。

1.3.3臨床資料收集方法 記錄患者臨床資料，包括性別(男、女)、年齡、入院時體質量指數(shù)、細胞遺傳學危險分級(低危核型、中危核型、高危核型)、急性髓細胞學病亞型(M1型、M2型、M4型、M5型)。

1.3.4生化指標檢測方法 治療前，所有AL患者空腹8～10 h，采集患者外周肘靜脈血10 mL，分別裝于2支試管中(每支5 mL)，取其中1支試管，放入離心機，以2 500 r·min-1離心(離心半徑15 cm)20 min后，取血清，放于-80 ℃冰箱保存；采用深圳湃爾生物科技有限公司生產的PR-7100型號全自動生化分析儀測定血清IL-12、TGF-β水平；取另1支試管，應用深圳市帝邁生物技術有限公司生產的DP-H10型號血細胞分析儀測定患者治療前白細胞計數(shù)、血小板計數(shù)、血紅蛋白水平。

1.4 評價指標(1)AL患者的化療效果，根據化療效果進行分組(緩解組、未緩解組)；(2)兩組患者性別、年齡、白細胞計數(shù)等資料及血清IL-12、TGF-β水平；(3)血清IL-12、TGF-β水平與AL患者化療效果的關系。

2 結果

2.1 一般資料本研究共納入175例AL患者，剔除7例患者，最終納入168例患者，其中男80例，女88例；年齡56～70歲，平均(62.86±4.81)歲；疾病分型M1型9例，M2型92例，M4型44例，M5型23例。

2.2 化療效果治療1個療程，168例AL患者中完全緩解25例(14.88%)，部分緩解90例(53.57%)，治療失敗39例(23.21%)，復發(fā)14例(8.33%)。

2.3 臨床資料未緩解組血清IL-12水平低于緩解組，血清TGF-β水平高于緩解組(P<0.05)；對比兩組性別、年齡、白細胞計數(shù)、血紅蛋白等資料，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 不同化療效果AL患者臨床資料對比

2.4 血清IL-12、TGF-β與AL患者化療效果的關系分析點二列相關性分析顯示，血清IL-12(r=-0.864，P<0.001)、TGF-β(r=0.835，P<0.001)與AL患者化療效果相關。

2.5 血清IL-12、TGF-β與AL患者化療效果的logistic回歸分析將AL患者化療效果作為因變量(緩解賦值為1，未緩解賦值為0)，將血清IL-12、TGF-β作為自變量，經logistic回歸分析，結果顯示，血清IL-12、TGF-β與AL患者化療效果相關(P<0.05)。見表2。

表2 血清IL-12、TGF-β與AL患者化療效果的logistic回歸分析

3 討論

化療可快速清除AL患者體內白血病細胞，促進患者癥狀緩解，血象及骨髓象恢復正常[7]。但由于AL復發(fā)率較高，約有70%獲得緩解的患者可能復發(fā)并發(fā)展成為難治性白血病，導致患者面臨病死威脅[8]。本研究中，168例急性髓系白血病患者經過1個療程的治療后，治療失敗39例，復發(fā)14例，占比分別為23.21%、8.33%，提示急性髓系白血病化療患者治療失敗及復發(fā)風險較高。因此，盡早明確AL患者化療效果不佳的相關原因，對增強化療療效、提高患者生存率具有至關重要的意義。

研究表明，在疾病發(fā)展階段，AL患者骨髓中造血干細胞、祖細胞往往具有腫瘤細胞特征，可影響免疫功能[9]。血清IL-12是細胞免疫反應中重要的調節(jié)因子，參與初始T細胞向Th1細胞的分化過程。血清TGF-β調節(jié)多種類型免疫細胞的增殖、分化過程，在免疫穩(wěn)態(tài)和免疫耐受中發(fā)揮重要作用。鑒于血清IL-12、TGF-β在免疫調節(jié)中的作用，推測血清IL-12、TGF-β可能與AL患者化療效果存在某種特殊的聯(lián)系。但目前研究對于血清IL-12、TGF-β與AL患者化療效果關系的報道較少。因此，本研究通過觀察血清IL-12、TGF-β在AL患者中的變化情況，探討血清IL-12、TGF-β與AL患者化療效果的關系。

本研究發(fā)現(xiàn)，未緩解組血清IL-12水平低于緩解組，血清TGF-β水平高于緩解組，且進一步經點二列相關性分析及l(fā)ogistic回歸分析顯示，血清IL-12、TGF-β與AL患者化療效果密切相關。血清IL-12可刺激處于靜止或活化狀態(tài)下的自然殺傷細胞、T細胞分泌干擾素γ，而干擾素γ可對白血病細胞生長、轉移起到一定的抑制作用，從而提高化療效果，促進患者疾病轉歸[10]。但當血清IL-12水平降低時，自然殺傷細胞、T細胞產生干擾素γ能力會隨之下降，造成白血病細胞大量增殖，進而加重患者病情，降低化療效果[11]。同時，血清IL-12水平降低、干擾素γ分泌減少可提高血管內皮細胞活性，促使血管內皮細胞大量增殖，為白血病細胞生長和轉移提供有利條件。張魯壯等[12]研究結果顯示，AL患者血清IL-12、干擾素γ水平低于健康人群，且初治和復發(fā)者血清IL-12、干擾素水平低于緩解患者。本研究進一步明確了血清IL-12與AL患者化療效果存在相關性。研究指出，Th17細胞表達下調與調節(jié)性T細胞過度分化引起的白血病細胞增殖是AL患者病情進展的重要因素[13]。而血清TGF-β水平升高可抑制Th17細胞分化，促進調節(jié)性T細胞生長發(fā)育，造成白血病細胞過度生長，導致AL患者疾病復發(fā)，降低化療效果[14]。此外，TGF-β水平升高時，可通過刺激血管生成、免疫抑制、合成細胞外基質等途徑為白血病細胞生長、增殖及轉移提供有利條件，由于白血病細胞過度增殖，AL患者化療效果較差，疾病復發(fā)率高[15]。本研究通過對血清IL-12、TGF-β與AL患者化療效果的相關性進行研究，為AL患者的治療提供了一定理論依據，同時也為治療AL提供了新的靶點。

綜上所述，血清IL-12、TGF-β與AL患者化療效果有關，未來臨床應加強對AL患者血清IL-12、TGF-β水平的檢測，及時調整治療方案，以增強患者化療效果，改善預后。