外周血血管內皮生長因子和硫氧還原蛋白還原酶水平對卵巢癌的診斷價值*

史躍燕，劉紅利，林 蘭，顧益鳳，張小霞

江蘇省南通市腫瘤醫院檢驗科，江蘇南通 226000

卵巢癌、宮頸癌和乳腺癌是女性三大腫瘤，嚴重危害女性健康，卵巢癌的發病率在女性常見腫瘤中并不高[1]，但因其發病隱匿，早期癥狀不明顯，同時缺乏大規模篩查的早期診斷方法[2]，病死率居婦科腫瘤之首[3]，2018年全球卵巢癌死亡病例超過新增病例萬分之六[4]。近年來，隨著檢測技術及靶向藥物等研究不斷深入，卵巢癌的治療也取得了突飛猛進的發展[5]。但早診斷、早治療仍然是提高卵巢癌生存率非常有效的途徑。病理學診斷操作繁瑣且有創傷性，不適用于大規模篩查，腫瘤標志物測定方法簡單，快速且無創，被廣泛用于大規模篩查[6]。目前用于卵巢癌早期篩查的腫瘤標志物主要有糖類抗原125(CA125)和人附睪蛋白4(HE4)，其測定的主要方法主要為電化學發光法，對試劑和設備要求比較高，在偏遠地區和基層很難大規模篩查。血管內皮生長因子(VEGF)和硫氧還蛋白還原酶(TrxR)在卵巢癌外周血中的表達情況鮮有報道，本文主要探討外周血測定VEGF和TrxR作為卵巢癌早期篩查指標的可行性。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2020年9月至2021年8月本院收治的初診住院患者，其中54例為卵巢癌患者，年齡30～85歲，平均60歲，作為卵巢癌組；40例為卵巢良性病變患者，年齡17～84歲，平均45歲，作為良性病變組。另外，將同期于本院體檢的80例體檢健康者作為健康組，年齡32～80歲，平均55歲。所有患者均經病理組織學或細胞學檢查證實，入院前未經任何放化療及抗腫瘤治療。本研究經醫院醫學倫理學委員會批準，所有納入研究者均知情同意。

1.2儀器與試劑 HE4采用羅氏電化學發光儀E601測定，檢測試劑為羅氏公司產品，質控品為上海昆淶生物科技有限公司產品。VEGF采用邁瑞-96A酶標儀進行測定，試劑和質控品均為北京健平金星生物科技有限公司產品。TrxR采用KEA-TR100全自動分析儀(凱熙醫藥股份有限公司)測定，試劑和質控品均為武漢尚宜康健科技有限公司產品。

1.3方法 所有受試者均為清晨空腹抽取靜脈血。HE4和VEGF的檢測標本為靜脈血血清，TrxR的檢測標本為靜脈血血漿(肝素抗凝)，行實驗室質量控制，結果在控后測定結果。HE4的檢測采用電化學發光法；VEGF采用酶聯免疫吸附法(ELISA)測定；TrxR采用分光光度法測定。比較3組外周血HE4、VEGF和TrxR水平，分析外周血HE4、VEGF和TrxR水平與病理特征(卵巢癌FIGO分期[7]、是否轉移和病理類型)之間的關系。

1.4統計學處理 采用SPSS23.0進行統計分析。計量資料呈非正態分布，采用M(P25,P75)表示；多組間比較比較采用Kruskal-WallisH檢驗，進一步兩兩比較采用Nemenyi法；兩組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗；配對樣本用Wilcoxon符號秩檢驗。采用Spearman相關性分析；ROC及AUC用于評價各指標對卵巢癌的診斷價值；以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.13組間外周血HE4、VEGF和TrxR水平比較 健康組、良性病變組和卵巢癌組各指標測定結果見表1，3組間兩兩比較，各項指標差異均有統計學意義(均P<0.05)。

表1 健康組、良性病變組和卵巢癌組各指標檢測結果比較[M(P25,P75)]

2.2外周血VEGF和TrxR水平與病理特征之間的關系 各指標與卵巢癌FIGO分期、是否轉移和病理類型均無相關性(P>0.05)，見表2。

表2 VEGF和TrxR水平與卵巢癌臨床病理特征之間的關系[M(P25,P75)]

續表2 VEGF和TrxR水平與卵巢癌臨床病理特征之間的關系[M(P25,P75)]

2.3Spearman相關性分析 外周血VEGF和HE4(r=0.530,P<0.001)、TrxR和HE4(r=0.581,P<0.001)、TrxR和VEGF(r=0.566,P<0.001)水平呈正相關。

2.4ROC曲線分析 外周血HE4、VEGF和TrxR水平單獨及聯合檢測用于區分卵巢癌和卵巢良性病變的ROC曲線見圖1，診斷價值見表3。TrxR診斷效能優于HE4和VEGF，3項聯合診斷無明顯優勢。外周血HE4、VEGF和TrxR水平單獨及聯合檢測用于區分卵巢癌患者和健康者的ROC曲線見圖2，診斷價值見表4。TrxR診斷效能優于其他兩項，VEGF和TrxR聯合診斷的準確度最高，3項聯合無明顯優勢。

表3 各指標用于區分卵巢癌和卵巢良性病變的診斷效能(%)

圖1 各指標用于區分卵巢癌和卵巢良性病變的ROC曲線

圖2 各指標用于區分于卵巢癌患者和健康者的ROC曲線

表4 各指標用于區分卵巢癌患者和健康者的診斷效能(%)

續表4 各指標用于區分卵巢癌患者和健康者的診斷效能(%)

2.5卵巢癌手術前后患者外周血HE4、VEGF和TrxR水平比較 卵巢癌手術前后，外周血VEGF和TrxR水平比較差異有統計學意義(P<0.05)，HE4水平比較差異無統計學意義(P=0.125)，見表5。

表5 卵巢癌手術前后HE4、VEGF和TrxR水平比較

3 討 論

VEGF是一種血管源性蛋白質,其家族有A～F和胎盤生長因子(PLGF)共7個成員，其中VEGF-C是促進血管形成最重要的因子。VEGF通過與受體之間的相互作用，在腫瘤新生血管形成中起著重要作用，能增加血管通透性、促使細胞外基質變性及新生血管內皮細胞的分裂和增殖，從而促進腫瘤細胞生長和轉移[8-9]。有研究顯示VEGF在上皮性卵巢癌組織中陽性表達率高于良性卵巢囊腺瘤組織，卵巢正常細胞中表達率最低[10]。

TrxR是硫氧還蛋白系統含硒酶部分，參與體內氧化反應的信號傳導，當細胞發生癌變時，高水平TrxR與腫瘤細胞生長和凋亡進程有著密切的關系，在多種原發性腫瘤中過表達，從而維持細胞氧化還原的穩定性，因此可以已成為其診斷和治療的新靶點[11-15]，但其在卵巢癌中的研究罕有報道。

在本研究中，VEGF和TrxR在健康組、卵巢良性病變組和卵巢癌組中的水平依次增高，且與HE4水平有相關性,在區分卵巢癌和良性病變時TrxR的診斷效率優于傳統腫瘤標志物HE4。在區分卵巢癌患者和健康者時，單獨檢測VEGF和TrxR均具有良好的診斷效能，高于HE4。VEGF和TrxR聯合檢測時診斷卵巢癌準確度最高，這說明VEGF和TrxR均可用于卵巢癌早期篩查。有研究表明，卵巢癌FIGO分期越高，VEGF表達率越高，轉移卵巢癌組織表達率也高于未轉移組織[16-17]。但在本次研究中外周血VEGF和TrxR的水平與卵巢癌的病理特征無關，還需擴大標本量做進一步研究。VEGF和TrxR在卵巢癌手術后均明顯降低，HE4血清水平手術前后比較差異無統計學意義(P>0.05)，說明VEGF和TrxR或可用于卵巢癌術后療效觀察。

VEGF和TrxR外周血測定，方法簡便快捷，設備要求低，可用于卵巢癌早期的大規模篩查，同時可用于術后療效監測。