中醫(yī)藥調(diào)控NLRP3炎性小體防治非酒精性脂肪性肝病的研究進展*

夏恩蕊，田格格，王正華，陳文慧，張順貞

(云南中醫(yī)藥大學，云南 昆明 650500)

隨著肥胖發(fā)病率的上升，NAFLD已成為全球最普遍的肝病之一[1]。NLRP3炎癥小體被認為是NAFL進展為NASH的關(guān)鍵因素之一，也是治療NAFLD的潛在靶點[2]，多數(shù)體內(nèi)外研究表明，抑制其活化可以改善NAFLD癥狀[3-15]。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)多種中藥單體、復(fù)方對NLRP3炎癥小體起到了調(diào)控作用。

1 NLRP3炎癥小體與NAFLD

NLRP3炎癥小體(NLRP3 inflammasome)是一種多蛋白復(fù)合物，它主要由NOD樣受體蛋白3(NLRP3)、凋亡相關(guān)斑點樣蛋白(ASC)和半胱氨酸蛋白酶-1前體(pro-caspase-1)組成[16]。在接收到特定刺激后，如病原體相關(guān)分子模式(PAMPs)或損傷相關(guān)分子模式(DAMP)[17]，Toll樣受體、細胞內(nèi)核轉(zhuǎn)錄因子κB(NF-κB)激活，上調(diào)NLRP3、pro-IL-1β表達[18]。凋亡信號分子caspase-8和FAS相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域(FADD)也參與這一過程[19]。此后，若“第二信號”(如溶酶體損傷[20-21]、離子通量改變[17，22-25]、線粒體功能障礙[26])繼續(xù)被觸發(fā)，NLRP3炎癥小體將被激活，促進白介素IL-1β和IL-18的前體(pro-IL-1β、pro-IL-18)剪切為具活性的IL-1β和IL-18，從而引發(fā)炎癥反應(yīng)[7，17]。如圖1。

注：(+)表示促進；↑表示上調(diào)圖1 NLRP3炎癥小體激活“雙信號”模型

NLRP3炎癥小體是NAFLD由單純性脂肪肝發(fā)展至NASH甚至肝纖維化的關(guān)鍵之一[9]。NLRP3激活加劇肝臟的炎癥反應(yīng)，還將促進GSDMD裂解，引起細胞焦亡，乳酸脫氫酶(LDH)、炎癥因子等釋放至胞外[10]。研究發(fā)現(xiàn)，當NAFLD處于初期單純性脂肪肝時，NLRP3炎癥小體相關(guān)指標未出現(xiàn)明顯上調(diào)[27]，但當疾病加重后NLRP3相關(guān)指標顯著升高[28]，并伴隨線粒體功能障礙等[29]，導致NLRP3炎癥小體活化。而NLRP3基因敲除改善了NASH小鼠的肝細胞損傷、炎癥及纖維化[9，30]，且NLRP3抑制劑(如CY-09[8]、MCC950[4])表現(xiàn)出了改善NAFLD的作用。

2 中醫(yī)藥在NAFLD病程中對NLRP3炎癥小體的調(diào)控作用

2.1 中藥單體 目前已有研究證明，部分中藥單體對NLRP3炎癥小體有干預(yù)作用，并可改善NAFLD癥狀，其中，黃芩苷、氧化苦參堿、黃連素、丹皮酚等均來源于清熱類中藥；人參皂苷、紅景天苷、甘草甜素、沙棘多糖等均來源于補虛類中藥；丹酚酸等來源于活血類中藥。

2.1.1 苷類 苷類成分在中藥中分布廣泛，現(xiàn)代研究表明，部分中藥苷類成分對NLRP3 mRNA有下調(diào)作用，對于TXNIP/NLRP3通路有一定的調(diào)節(jié)作用。人參皂苷Rg1[31]、Rg2和Rh1[32]能夠下調(diào)NAFLD小鼠的NLRP3 mRNA。紅景天苷、黃芩苷能抑制肝臟中硫氧還蛋白相互作用蛋白(TXNIP)表達和NLRP3炎性小體活化，從而改善NAFLD[33-34]。

2.1.2 生物堿類 中藥中多種生物堿成分具有抑制NLRP3蛋白表達作用，并能顯著改善動物模型的肝臟炎癥和脂質(zhì)沉積。例如，黃連素[35]、鹽酸小檗堿[36]、氧化苦參堿[37]都能下調(diào)NLRP3蛋白表達，減輕NAFLD造成的肝脂質(zhì)蓄積和炎癥。其中，黃連素可同時減少活性氧(ROS)產(chǎn)生。

2.1.3 黃酮類 研究表明，部分中藥黃酮類單體能對NLRP3炎癥小體組件產(chǎn)生下調(diào)作用，其調(diào)控途徑多樣，并能改善NAFLD癥狀。例如，槲皮素[38]、羥基紅花黃色素A[39]、甘草甜素[40]可抑制NLRP3炎癥小體激活，減輕NAFLD脂質(zhì)沉積和炎性反應(yīng)。但幾種單體作用機制各不相同，槲皮素被證明可通過改善氧化應(yīng)激抑制NLRP3炎癥小體；羥基紅花黃色素A則是通過下調(diào)NLRP3等炎癥小體組件；甘草甜素能激活肝臟FXR-SHP通路，減少膽汁酸合成，可能通過阻斷FXR-NLRP3炎癥通路達到抗炎效果。

2.1.4 其他類單體 多糖類中，沙棘多糖[41]、金釵石斛多糖[42]能夠降低NAFLD動物模型中ASC等炎癥小體組裝部件的表達量，從而抑制NLRP3炎癥小體激活。酚類、醌類、苯丙素類也存在抑制NLRP3炎癥小體的物質(zhì)，如丹皮酚[43]、白藜蘆醇[44]、丹酚酸A[45]等。水飛薊素對NAFLD療效顯著，且能抑制NLRP3炎癥小體的活化通過調(diào)控Nrf2、NAD+/SIRT2通路抑制NLRP3炎癥體激活[46-47]。

2.2 中藥復(fù)方 中醫(yī)藥“多靶點”的特點使其在治療NAFLD這樣的復(fù)雜代謝疾病上有著突出的優(yōu)勢，且近年來在臨床中療效較好。NAFLD在中醫(yī)歸屬于“肝癖”、“脅痛”、“積聚”等范疇，主要病因在飲食不節(jié)、勞逸失度、情志失調(diào)、久病體虛、稟賦不足等，其病理基礎(chǔ)與痰、濕、濁、瘀、熱等有關(guān)，證屬本虛標實，脾虛為本，痰濁血瘀為標，主要證型分為肝郁脾虛證、濕熱蘊結(jié)證、痰瘀互結(jié)證和濕濁內(nèi)停證等[48]。目前，能夠調(diào)控NLRP3炎性小體以防治非酒精性脂肪性肝病的復(fù)方中，以疏肝健脾、清熱化濕的方劑為主。

2.2.1 疏肝健脾 “肝脾同治”理論在《難經(jīng)》、《內(nèi)經(jīng)》中已然成型[49]。五行學說中，肝屬木而脾屬土，木過旺能克土，即木郁土虛，土氣過旺亦能反侮，即土壅木郁，故治肝也應(yīng)兼顧調(diào)脾。具有健脾疏肝作用的中藥復(fù)方臨床使用較多療效較好，研究證實，柴胡疏肝散[50]、四逆散[14，51]、降脂理肝湯[52]、去脂軟肝方(蘭花參、三七、白術(shù)、莪術(shù)、青皮、菊花、山楂)[53]對NAFLD有減少肝臟脂肪堆積之效，并通過下調(diào)NLRP3炎癥小體組件抑制其激活。其中，柴胡疏肝散降脂降酶作用不弱于多烯磷酯酰膽堿膠囊[54]，其與去脂軟肝方還能抑制NF-κB、TLR4，減少了NAFLD的肝臟炎癥因子表達。

2.2.2 清熱利濕 NAFLD部分患者多表現(xiàn)為濕熱內(nèi)蘊。茵陳五苓散可通過下調(diào)Chemerin、CYP2E1及NLRP3蛋白表達，改善NAFLD大鼠肝臟功能[55]。加味澤瀉湯也被發(fā)現(xiàn)能降低TLR4和NLRP3 mRNA表達量、改善腸黏膜屏障。二者同具祛濕化濁之效，常用于治療伴隨濕濁內(nèi)停的NAFLD。YING Y 等[56]與羅遠等[57]的兩項研究表明，葛根芩連湯能下調(diào)NLRP3炎癥小體組件，抑制其組裝活化。

3 小結(jié)

炎癥小體種類繁多，有關(guān)NLRP3炎癥小體的研究目前較多，并且越來越受到科研工作者的關(guān)注。NLRP3炎癥小體是機體免疫系統(tǒng)的一部分，它可通過經(jīng)典途徑、非經(jīng)典途徑等方式被激活，繼而介導下游炎癥因子的釋放，從而促發(fā)機體免疫反應(yīng)，同時也存在多種NLRP3的負調(diào)控機制。NLRP3炎癥小體的激活途徑多樣，涉及物質(zhì)繁多，各條通路之間可相互影響，這也保證了機體對有害刺激的快速識別和應(yīng)對。

但NLRP3炎癥小體引發(fā)的炎癥可以誘發(fā)機體的自我保護，也可以造成器官組織的病變，且影響廣泛，目前發(fā)現(xiàn)NAFLD的發(fā)展與NLRP3炎癥小體高度相關(guān)，使用中藥單體或復(fù)方可在NLRP3炎癥體激活的各環(huán)節(jié)進行不同程度干預(yù)，達到改善NAFLD的目的。目前，對于單味中藥總提取物的NLRP3調(diào)控作用研究較少，對此方面的補足對中醫(yī)藥的研究發(fā)展至關(guān)重要。對NLRP3炎癥小體的研究旨在探究疾病微觀層次的機制，并開發(fā)新的治療方案，但其激活與調(diào)控機制復(fù)雜，尚有廣闊的研究前景。