齒瓣石斛研究進展*

倪 凱，何鵬飛，梁志慶，王胤驍，沈宇明，段興恩

(1.云南省中醫(yī)中藥研究院，云南 昆明 650223；2.龍陵縣富民石斛專業(yè)合作社，云南 龍陵 678300)

石斛屬(dendrobium)約1000多種，我國有74種和2變種，產(chǎn)秦嶺以南諸省區(qū)，云南產(chǎn)58種2個變種，占全國的78.95%[1]，主要分布在滇西南和滇東南。其中，齒瓣石斛是云南地區(qū)藥用石斛資源的主要代表。

齒瓣石斛(dendrobiumdevonianumpaxt.)又名香棍草、大黃草、紫皮蘭，為藥用石斛品種之一，俗稱紫皮石斛。具有養(yǎng)胃生津、滋陰除熱之功效，主要用于熱病傷津或胃陰不足之舌干口渴、陰虛津虧之虛熱不退等癥[2]。

齒瓣石斛已被收載于2005版《云南省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》[3]，齒瓣石斛的干制品，具有口味甘醇、質(zhì)地柔韌、泡發(fā)后粘性強、便于存儲等優(yōu)良特點，已成為云南石斛產(chǎn)區(qū)著力打造，重點發(fā)展的藥用石斛資源[4-5]。

紫皮石斛曾用名齒瓣石斛，是紫皮石斛群里的一個品種，最早于1840年由英國人在印度東北部采到第一份植物標(biāo)本，由英國人Paxt.定學(xué)名為dendrobiumdevonianum，其證實了齒瓣石斛的存在。齒瓣石斛于19世紀(jì)40年代由印度傳入歐洲，作為觀賞植物栽培，為石斛蘭的一種，該植物除印度外，在越南、不丹、老撾、柬埔寨、泰國、緬甸均有分布。19世紀(jì)30年代后期由我國植物學(xué)家吳鉦鎰、蔡希陶等專家調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)了齒瓣石斛在我國廣西西北部、貴州西南部、云南東南部至西部(龍陵等地)、西藏東南部也有分布，并生長于海拔1850 m左右的山地密林樹干上。經(jīng)過核對，該物種與Paxt.所定的拉丁學(xué)名與植物形態(tài)一致，根據(jù)國際命名法將dendrobiumdevonianumpaxt.與中文名字相對應(yīng)。對紫皮石斛進行解剖，因為花唇上有復(fù)式流蘇存在(如齒狀)，因此給予齒瓣石斛的中文命名，這與國際命名法是相一致的。

云南紫皮石斛的種植以龍陵、騰沖一帶居多，其民間稱為“紫皮蘭”“紫草”。得益于有“石斛天然居室”之稱的龍陵得天獨厚的自然環(huán)境，龍陵縣于2008年申請將紫皮石斛龍陵居群定名為“龍陵紫皮石斛”，“龍陵紫皮石斛”地理標(biāo)識證明商標(biāo)獲得國家商標(biāo)局批準(zhǔn)。龍陵縣也被中國中藥協(xié)會授予“中國紫皮石斛之鄉(xiāng)”稱號。

龍陵地區(qū)民間食用紫皮石斛歷史悠久，稱龍陵紫皮石斛為“小吊蘭”。據(jù)《龍陵縣志》記載，龍陵 4000 多年前就有人類在此繁衍生息。本地民間傳說自有人類活動以來人們就一直把“吊蘭花”作為一種藥食兩用食材使用，隨著人類社會的發(fā)展和實踐，不斷發(fā)現(xiàn)“吊蘭花”的藥用功效，并被許多家族列為常備藥。

筆者通過對齒瓣石斛化學(xué)成分、藥理作用、毒理學(xué)研究等方面的相關(guān)進展進行綜述，以期為其多領(lǐng)域的深入研究、資源科學(xué)合理開發(fā)利用以及產(chǎn)業(yè)鏈的持續(xù)發(fā)展提供有益參考。

1 化學(xué)成分

石斛屬植物化學(xué)成分類型多樣，目前對于齒瓣石斛已有相關(guān)研究報道的化學(xué)成分包括：生物堿、多糖、黃酮類、酚酸類、茋類、脂肪酸類，還有氨基酸、微量元素以及其他類成分。

1.1 生物堿 生物堿是石斛中最重要的活性物質(zhì)之一，也是最早從石斛屬植物中分離得到的化學(xué)成分。

現(xiàn)代研究表明，從石斛屬植物中已發(fā)現(xiàn)52個生物堿類化合物，分別為倍半萜類生物堿、八氫中氮茚類生物堿、四氫吡咯類生物堿、酰胺類生物堿和咪唑類生物堿這5種類型[6]。

張愛蓮等[7]從齒瓣石斛中分離得到1個吲哚類生物堿：2，3，4，9-四氫-1H-吡啶駢[3，4-b]吲哚-3-甲酸和2個酰胺類生物堿：N-反-對香豆酰酪胺、N-反-對阿魏酰酪胺。孟志霞等[8]從齒瓣石斛乙醇提取物中分離得到酰胺類生物堿：對羥基苯丙酰酪胺、N-順式-香豆酰酪胺、N-反式-對羥基苯乙基咖啡酰胺。

1.2 多糖 石斛多糖是目前評價藥用石斛品質(zhì)的重要指標(biāo)之一。

Fan等[9]從齒瓣石斛中提取得到酸性多糖(DDPp2)，其由4種單糖組成，摩爾比為甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖∶葡萄糖醛酸= 6.37∶4.99∶1.71∶2.39。Wu等[10]分離得到齒瓣石斛多糖DvP-1，由D-甘露糖和D-葡萄糖以摩爾比10.11∶1組成，主要糖苷鍵為β-1，4-Manp。

現(xiàn)代研究表明，齒瓣石斛多糖主要由甘露糖、葡萄糖組成，還有少量的半乳糖、果糖、木糖和鼠李糖等[11]，在O-2、O-3或O-6位上被乙酰基取代，主要的糖苷鍵是β-1，4-manp[12]。

1.3 黃酮類 黃酮類化合物是齒瓣石斛中除多糖外的另一類主要成分。

廖嫻等[13]從齒瓣石斛莖中分離得到新西蘭牡荊苷Ⅱ、新西蘭牡荊苷Ⅰ、夏佛塔苷等5種黃酮類成分。沈妍等[14]從齒瓣石斛莖中分離得到1種二氫黃酮和4種黃酮苷。

Zhao Ming等[15]學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，齒瓣石斛花中含有紫杉素、木犀草素、山柰酚等6種黃酮類化合物。

1.4 酚酸類 酚酸類化合物系指在一個苯環(huán)上有多個酚羥基取代的芳香羧酸類化合物[16]。研究表明酚酸具有抗菌、抗炎、抗癌、抗氧化、抗紫外線輻射等功效[17]。

孟志霞等[8]從齒瓣石斛95%乙醇提取物中分離得到包括對羥基桂皮酸乙酯在內(nèi)的8種酚酸類成分。楊柳從齒瓣石斛提取物中分離得到石斛酚、對羥基苯甲醛等成分[18]。

1.5 茋類 石斛屬植物中含有大量的芳香族化合物，主要是茋類，即聯(lián)芐類和菲類。該類化合物具有抗菌、抗炎、抗腫瘤、酪氨酸酶抑制等活性[19-20]。

董海玲[21]從齒瓣石斛中分離得到3-羥基-4’，5-二甲氧基聯(lián)芐等10個聯(lián)芐類化合物和2個二氫菲類化合物：2，5-二羥基-4-甲氧基-9，10-二氫菲、2，4，7-三羥基-9，10-二氫菲。吳蕾蕾等從齒瓣石斛莖95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位分離得到5個聯(lián)芐類化合物，其中3，4’，5-三羥基-3’-甲氧基聯(lián)芐在齒瓣石斛中具有一定的專屬性[22]。Wu等[23]從齒瓣石斛莖中分離得到2個新的菲類化合物dendrodevonin A和B。

劉波從[24]齒瓣石斛中分離出聯(lián)芐與苯丙素的雜合物：dendrobiols A-E。

1.6 脂肪酸類 研究發(fā)現(xiàn)，齒瓣石斛花中含棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸、11-二十烷酸、亞麻酸和木質(zhì)酸等7種脂肪酸[15]。Wu等[23]從齒瓣石斛莖中分離出2個脂肪酸類化合物dendrodevonic acid A和B。

1.7 氨基酸及微量元素 羅慧等[25]在齒瓣石斛花中檢測到 16種氨基酸、9種 B族維生素、3種維生素 E、維生素 C和鉀、鈣、磷、鎂等13種礦物質(zhì)。楊麗娥[26]通過齒瓣石斛HPLC特征圖譜分析，共檢測出天冬氨酸、谷氨酸、絲氨酸等16種氨基酸。

1.8 其他成分 孫晶等[27]從齒瓣石斛中分離得到48種脂溶性成分，主要以淚柏醇、烷烴和芳香族物質(zhì)為主。

在齒瓣石斛中，還分離得到腺嘌呤核苷、β-谷甾醇、蔗糖、β-胡蘿卜苷。

2 藥理作用

齒瓣石斛現(xiàn)代藥理作用主要包括：調(diào)節(jié)免疫、抗氧化、抗疲勞、抗腫瘤和抗菌。

2.1 調(diào)節(jié)免疫 研究發(fā)現(xiàn)齒瓣石斛新型多糖DVP-1在免疫激活中，可顯著提高實驗小鼠免疫器官指數(shù)、淋巴細胞增殖以及脾臟中IL-1 β、IL-4、IL-6和TNF-α等細胞因子的mRNA表達水平；對空腸組織黏膜免疫有明顯的促進作用；同時上調(diào)小鼠脾臟中TLR4、MyD88和TRAF6的表達以及TAK1、Erk、JNK和NF-κB的磷酸化水平，實驗結(jié)果表明：DVP-1可通過TLR4/MyD88/NF-κB通路激活免疫，抵抗H1N1流感病毒感染[28]。

齒瓣石斛和鐵皮石斛體內(nèi)外免疫調(diào)節(jié)活性的比較研究表明，齒瓣石斛和鐵皮石斛水提液對脾細胞增殖有明顯的促進作用，且兩者作用效率無差異；口服給予齒瓣石斛或鐵皮石斛不僅能顯著減輕氫化可的松誘導(dǎo)的小鼠白細胞減少和脾臟、胸腺萎縮，而且能顯著增加巨噬細胞吞噬和遲發(fā)性超敏反應(yīng)(DTH)[29]。

Deng等[30]學(xué)者發(fā)現(xiàn)齒瓣石斛多糖可以促進巨噬細胞的免疫功能，包括NO的釋放和吞噬。周濤等[31]學(xué)者發(fā)現(xiàn)，齒瓣石斛水提取物能加強巨噬細胞吞噬功能與淋巴細胞增殖能力，促進免疫細胞因子的產(chǎn)生與釋放，對環(huán)磷酰胺免疫抑制小鼠的免疫功能有增強作用。

Wu等[10]提取分離得到的齒瓣石斛新型多糖DvP-1，可作為TLR4激動劑，誘導(dǎo)ERK、JNK、p38和IκB-α磷酸化，相關(guān)研究揭示了齒瓣石斛的免疫調(diào)節(jié)作用以及DvP-1在治療TLR4功能失調(diào)引起的癌癥和感染性疾病方面的藥用價值。

2.2 抗氧化 齒瓣石斛酸性多糖(DDPp2)對羥自由基、ABTS自由基和超氧陰離子自由基均有很強的清除能力，能顯著提高RAW264.7細胞CAT、SOD和GPX活性，降低MDA含量[9]。

董壽堂等[32]研究發(fā)現(xiàn)齒瓣石斛多糖能提高D-半乳糖所致氧化損傷小鼠血清和肝臟中SOD 活性，降低血清、肝臟中蛋白質(zhì)羰基及 MDA 含量，表明齒瓣石斛多糖具有一定的抗氧化作用。

Wang等[33]提取的齒瓣石斛花多糖(DDFPs)，主要由甘露糖和葡萄糖構(gòu)成，其中的組分DDFPs50表現(xiàn)出很好的抗氧化活性。

2.3 抗疲勞 試驗研究發(fā)現(xiàn)，齒瓣石斛能延長小鼠負重游泳力竭時間，降低小鼠游泳后的血清尿素氮、血清乳酸的含量，提高小鼠體內(nèi)肝糖原的儲備量，揭示了齒瓣石斛的抗體力疲勞作用[34]。

2.4 抗腫瘤 研究發(fā)現(xiàn)齒瓣石斛水溶性多糖，可通過改善特異性和非特異性免疫反應(yīng)，顯著抑制S180荷瘤小鼠移植瘤的生長[35]。

2.5 抗菌 齒瓣石斛無水甲醇和水提取物對金黃色葡萄球菌和白色葡萄球菌具有抑制作用[36]。齒瓣石斛花色苷對枯草芽孢桿菌具有顯著抑菌作用[37]。

3 毒理學(xué)研究

開展毒理學(xué)相關(guān)研究，能為齒瓣石斛食療、保健應(yīng)用及安全性評價提供參考和科學(xué)依據(jù)。目前齒瓣石斛提取物所開展的毒理學(xué)研究主要包括急性毒性、亞慢性毒性、遺傳毒性和生殖發(fā)育毒性。

3.1 急性毒性 以KM種小鼠進行急性毒性實驗，齒瓣石斛浸膏各組在給藥后未出現(xiàn)中毒及死亡現(xiàn)象，未見急性毒性反應(yīng)。紫皮石斛浸膏最大耐受量為52.5590 g/kg生藥，實驗表明紫皮石斛浸膏毒性較小，食用安全可靠[38]。

ICR小鼠經(jīng)口急性毒性試驗，灌胃給予齒瓣石斛(45.0 g /kg)，小鼠未出現(xiàn)中毒癥狀、死亡情況，解剖觀察主要臟器未發(fā)現(xiàn)明顯異常，按急性毒性分級標(biāo)準(zhǔn)判定，齒瓣石斛屬無毒級[39]。

3.2 亞慢性毒性 通過開展相關(guān)試驗發(fā)現(xiàn)，齒瓣石斛在90 d內(nèi)對SD大鼠無明顯亞慢性毒性，安全劑量為18.0 g/kg[40]。

3.3 遺傳毒性 吳月國等[39]開展齒瓣石斛Ames試驗以及小鼠精子畸形試驗和小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗，在試驗濃度下，試驗結(jié)果均為陰性，表明該實驗條件下，齒瓣石斛屬無毒級物質(zhì)，未見遺傳毒性。

3.4 生殖發(fā)育毒性 梅松等[41]開展齒瓣石斛提取物對SD大鼠致畸試驗，試驗未觀察到受試物對大鼠的生殖毒性作用，對胎鼠生長發(fā)育無明顯影響。在本實驗條件下，未發(fā)現(xiàn)齒瓣石斛對SD大鼠的胚胎毒性和致畸毒性。

4 小結(jié)

齒瓣石斛作為法定藥用石斛資源，又是云南地區(qū)主要習(xí)用品種之一，市場占有率逐年遞增。齒瓣石斛種植大縣龍陵縣先后榮獲“中國紫皮石斛之鄉(xiāng)”、“全國石斛產(chǎn)業(yè)知名品牌創(chuàng)建示范區(qū)”等稱號，并成功申報注冊了“龍陵紫皮石斛”地理標(biāo)志、農(nóng)產(chǎn)品地理標(biāo)志和國家地理標(biāo)志保護產(chǎn)品[42]。

同時，鑒于齒瓣石斛的優(yōu)良品質(zhì)和經(jīng)濟價值，有學(xué)者提出將其收入《中國藥典》[12]。云南省已發(fā)布齒瓣石斛食品安全地方標(biāo)準(zhǔn)，已將齒瓣石斛列入食品管理范疇。2017年，齒瓣石斛作為中藥飲片被正式納入云南省醫(yī)保支付范圍，按乙類藥品管理；2019年干石斛作為中藥飲片納入上海醫(yī)保藥品目錄[43]。

可見，以齒瓣石斛作為藥材和食材主要原料的產(chǎn)業(yè)鏈具有巨大的開發(fā)潛力，齒瓣石斛產(chǎn)業(yè)的發(fā)展對于藥用資源的保護和可持續(xù)利用，以及促進地區(qū)經(jīng)濟發(fā)展，幫助農(nóng)民致富，都有著重要意義。