2022年四川省市級獸醫系統實驗室布病檢測能力比對分析

黃雅琳，侯 巍，尹 杰，高 露，李盛瓊，楊天俊，陽愛國

（四川省動物疫病預防控制中心，四川 成都 610041）

目前，獸醫實驗室主要承擔動物疫病病原學監測，動物免疫效果檢測及疫病診斷等工作［1］。為進一步評價和提高四川省各市（州）獸醫實驗室管理水平和檢測能力，需要不定期對實驗室進行檢測能力比對。2022 年6 月，四川省組織開展了全省市級獸醫系統實驗室檢測能力比對工作，以期為全省獸醫系統實驗室的進一步建設和發展提供參考。

1 材料與方法

1.1 比對項目設計 在全省20個市級獸醫實驗室進行布魯氏菌病抗體的檢測比對。

1.2 比對盲樣與試劑 每個比對實驗室設置4個盲樣，盲樣由四川省動物疫病預防控制中心統一測試和發放，試劑由各市級動物疫病預防控制中心自行提供，其中使用A 廠家11 個，B 廠家9個。

1.3 方法 采用相應的國家現行標準（GB/T 18646-2018）進行比對（表1）。

表1 比對項目及方法

1.4 比對結果判定標準 當標準陰性血清不出現凝集、標準陽性血清出現凝集時試驗成立，方可對受檢血清進行判定。出現肉眼可見凝集現象者判定為陽性（＋），無凝集現象且反應混合液呈均勻粉紅色者判定為陰性（-）。

2 比對結果

2.1 市級獸醫實驗室比對結果 詳見表2。

2.2 試劑使用情況比對結果 詳見表3。

表2 市級獸醫實驗室比對結果

表3 不同廠家抗原比對結果

3 討論

通過此次比對結果分析，我們發現造成比對結果不理想的原因可能有以下幾點：（1）實驗試劑對結果影響很大，分別使用A、B兩個廠家試劑檢測盲樣得出的符合率有很大差別，說明選擇敏感性高的試劑很重要，部分實驗會因試劑敏感性的不同而產生不同的結果；（2）實驗過程中的細節把控很重要，實驗過程容易受到許多外界因素影響，包括試劑、檢測樣本的平衡時間和溫度，平板的材質（是否使用玻璃板），凝集反應觀察的時間；（3）實驗人員的觀察能力也很重要，對經驗有一定要求，可能對同樣的結果出現不同的判讀標準，應在日光下觀察，否則容易將弱陽性誤判為陰性。

根據《國家布魯氏菌病防治計劃（2016-2020年）》的相關要求，實驗室檢測是畜間布病防治的重要技術措施，縣級動物疫病預防控制機構應具備開展布病血清學檢測的能力。各市（州）應不斷提高獸醫實驗室檢測能力，以更加高效科學地完成轄區內動物疫病的防治和檢測任務，為本地動物防疫工作提供保證。

目前，血清學檢測方法是現有的診斷布魯氏菌病最廣泛的方法，其中間接酶聯免疫吸附試驗（iELISA）、膠體金檢測試紙條、虎紅平板凝集試驗（RBT）均為動物布魯氏菌病的初篩方法。在國標方法中，iELISA敏感性較高［2］，靈敏性和特異性好，通過酶標儀直接讀數可避免主觀判斷帶來的誤差，但需在實驗室由專業技術人員操作，檢測時間長，不適用于基層大量初篩。膠體金檢測試紙條具有靈敏度高、特異性好、血清用量少、操作簡便、快速等優點，但存在定量問題、質控指標不一等不足之處。RBT是國標規定的初篩方法，具有操作簡便、檢測快速、價格便宜、敏感性高的特點，適用于動物布病檢測的初步篩查，是重要的檢測方法，也是檢測布魯氏菌抗體最常用的方法之一。RBT 是各獸醫實驗室日常監測布魯氏菌病，基層大量初篩的最常見檢測方法，因而作為此次實驗室比對的首選實驗方法。

目前布病的血清學檢測方法中還沒有一種完全具備敏感性高、特異性強、操作簡便、檢測速度快和檢測成本低等優點的檢測方法，在布病檢測的實際臨床應用中，一般是兩種或兩種以上的方法聯合應用，通過對不同檢測方法的結果進行比較分析來驗證結果的準確性。有研究發現，采用RBT 初篩，再用補體結合試驗（CFT）與ELISA 進行聯合診斷，用于陽性畜的撲殺最為理想［3］。

4 結論

此次比對結果說明四川省各市（州）應加強對布魯氏菌病檢測能力的提升，各獸醫實驗室更需要熟練掌握RBT 等檢測方法，注重實驗細節以便獲得準確可靠的實驗結果，充分發揮獸醫實驗室在人畜共患病防控工作中的技術支撐作用。