桑枝的化學成分、藥理活性研究進展及質量標志物預測分析

郭明鑫,吳 霞,沈 穎,胡志強*

1.江蘇大學附屬宜興醫院,宜興 214200;2.廣東藥科大學新藥研發中心,廣州 510006

自古以來,我國是蠶桑大國,桑屬植物資源豐富,主要分布于廣西、貴州、河南等地,具有很高的經濟價值,其中桑葉、桑枝、桑根皮及桑葚均可入藥。桑枝為桑科植物桑(MorusalbaL.)的干燥嫩枝,表面呈灰黃色或黃褐色,春末夏初為最佳采收期,其去葉、切片、曬干即可藥用[1]。關于桑枝的藥用價值始載于《神農本草經》,將其列為中品,《本草撮要》記載:“桑枝,功專祛風濕拘攣”,《本草圖經》和《本草綱要》中亦有相關記載,其微苦,性平,歸肝經,具有行水祛風、利關節等功效,臨床常用于風濕痹病、四肢酸痛麻木、腳氣浮腫和風寒濕痹的治療[2]。相關研究報道,桑枝中主要含有黃酮類、芪類、Diels-Alder型加合物、多羥基生物堿和多糖等。此外,還含有多種維生素、香豆素類、多種氨基酸及揮發油等[3]。桑枝具有降血糖、降血脂、提高免疫力、抗衰老、抗炎及腎保護作用等藥理活性[4]。

我國桑樹資源豐富,主要以養蠶、藥用為主,但蠶桑業利用率低,導致資源浪費。目前,對于桑科植物的根皮及果實化學成分及藥理作用的研究較多且全面,但關于桑枝的化學成分、藥理活性及質量標準研究的相關報道較少。中藥材的“多基源、一味藥”的問題引起廣大學者的關注。目前考察到有15個桑種、5個變種,這使得評價桑枝質量的因素更加復雜[5]。同樣,在2020年版《中華人民共和國藥典》(以下簡稱《中國藥典》)中僅記載桑枝的性狀描述和顯微鑒別,沒有相關化學成分的質量控制內容,因此對桑枝質量控制的研究尚不完善。基于此,筆者在對其化學成分、藥理作用歸納總結的基礎上,結合藥性功效、植物親緣性和化學成分特有性、新的藥效用途、可測成分及化學成分含量變化等方面對桑枝質量標志物(quality markers,Q-marker)進行預測分析,為桑枝質量評價研究提供科學依據。

1 桑枝的化學成分

1.1 黃酮類化合物

桑枝中含有豐富的黃酮類化合物,目前已分離、鑒定化合物98個。主要包括黃酮及黃酮醇類化合物,如環桑素,桑皮酮A、桑皮酮B、桑皮酮C、桑皮酮S、桑皮酮T[6],桑色素,桑色烯及整合素[7]等;二氫黃酮及二氫黃酮醇類化合物,如桑皮酮D、桑皮酮F[7],桑根酮 F、桑根酮H、桑根酮I[8],桑根酮醇C、桑根酮醇D、桑根酮醇E[9]及黑桑素A至黑桑素G[7]等;查耳酮類化合物,如桑酮醇D[6]、異補骨脂查爾酮[10]及2, 4, 2′, 4′-四羥基查耳酮等[6];酮類化合物,如morusignin A、morusignin B、morusignin I、morusignin K[8]。此外,還含有黃烷苷,如7-羥基-8-羥乙基-4′-甲氧基黃酮-2′-O-β-D-葡萄糖苷[6];其他類成分,如8-羥乙基-7, 2′, 4′-三羥基黃酮、7-甲氧基-8-羥乙基-2′, 4′-二羥基黃酮[8]等。

桑枝中黃酮類化合物具有幾類相同的母核,在側鏈基團表現出一定的差異。結構的主要特點為:(1)在5,7,4′位多含有羥基,如norartocarpetin、桑根酮H;(2)結構中含有一個或多個異戊烯基,如桑根酮醇 F、morachalcone B;(3)部分異戊烯基與其鄰位羥基氧形成六元氧雜環,如桑黃酮 A、桑辛素及環桑色烯;(4)結構多含有香葉基團,如桑黃酮 G、notabilisims A。

1.2 芪類化合物

相關研究發現,桑枝中含有大量芪類化合物,主要分為芳基苯駢呋喃類,如桑辛素A至桑辛素Z[6],桑呋喃素A[9],mulberrofuran B、mulberrofuran D、mulberrofuran L、mulberrofuran V及mulberrofuran W至mulberrofuran Z,桑皮苷 C、桑皮苷 F及Wittifuran A至Wittifuran U[7];芳基苯駢呋喃類化合物多以2-苯基苯駢呋喃為母體,在其5,7,4′,6′位多存在酚羥基及異戊烯基,如桑辛素C、桑辛素S[8],還存在一些由異戊烯基與鄰位的羥基環合而成的六元或七元雜環,如桑辛素U[9]等。二苯乙烯類化合物,如白藜蘆醇、氧化白藜蘆醇及桑皮苷A[10-11];芪類聚合物,如andalasin B、macrourin B及白桑八醇[6]。

1.3 Diels-Alder型加合物

在自然界中已經發現了眾多環系復雜、類型多樣的天然Diels-Alder型加合物,如由木賊鐮刀菌產生的伊快霉素、放線菌的代謝產物多殺菌、真菌來源的洛伐他汀及天然倍半萜類與聚酮的各種加合物等[12];研究發現,由異戊烯基與查爾酮的α、β雙鍵發生[4+2]環加成反應生成的加合物是桑枝中的特征化學成分之一[10]。主要由查爾酮與含有異戊烯基的黃酮類化合物環合而成,如桑黃酮N[9]、桑根酮G、桑根酮I、austrilisine及mongolicin D等[6];查爾酮分子間的環合產物,如桑黃酮Q[8];查耳酮與異戊二烯基二氫黃酮(醇)的加合物,如桑根酮 E[7]、cathayanon A、cathayanon B及桑根酮醇J等[3];查耳酮與去氫異戊二烯2-芳基苯駢呋喃類型加合物,如桑呋喃、mulberrofuran C[10];查耳酮與二苯乙烯類型加合物,如桑黃酮 P[7];另外,還存在一些其他類型環加合而產生的加合物,如albanol B[6]、桑根酮B[8]及mongolicin E[9]。

1.4 生物堿類化合物

桑枝中含有多羥基生物堿及其苷類化合物,按照結構類型分為3類:多羥基哌啶類,如1-脫氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin,1-DNJ)、蕎麥堿[8];隨著研究的不斷深入,分離得到了1-DNJ與不同葡萄糖形成的糖苷類化合物,如4-O-α-D-glucopyransyl-l-deoxynojirirnycins、2-O-β-D-glucopyransyl-l-deoxynojirimycins、3-O-β-D-glucopyransyl-1-deoxynojirimycins[10,13]。多羥基吡咯類,如1,4-二脫氧-1,4-亞氨基-D-阿拉伯糖醇[7];多羥基去甲托品烷類,如calystegin B2、2α, 3β-二羥基去甲莨菪烷及2β,3β-二羥基去甲莨菪烷[7,14]等。

1.5 其他化合物

桑枝中的多糖是由葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖及木糖等按照一定順序以α-糖苷鍵連接的吡喃醛糖[15]。通過傅立葉變換紅外光譜(Fourier transform infrared,FT-IR)技術發現不同種屬桑枝多糖功能基團無明顯差異,冷凍干燥后的桑枝多糖表面呈疏松多孔海綿狀[16]。桑枝中還有香豆素類化合物,如傘形花內酯[17]、七葉苷元[7]。萜類化合物主要有葉綠醇、葉黃素、樺木酸及牛膝甾酮等[10]。此外,還含有木脂素、甾體類、α-蒎烯、月桂烯[18]、硒元素以及18種常見的氨基酸等化學成分[19]。

2 桑枝的藥理活性

2.1 降血脂活性

桑枝提取物能顯著降低急性高血脂癥小鼠血清中的三酰甘油(triglyceride,TG)、總膽固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)水平及小鼠血清的動脈硬化指數值,也能明顯降低LDL/HDL比值[20]。研究認為,桑枝的醇提取物對小鼠高脂血癥模型具有降脂作用,可能通過上調7α-羥化酶、卵磷脂膽固醇酰基轉移酶,下調膽固醇酰基轉移酶2和3-羥基-3′-甲基戊二酰輔酶A還原酶等相關通路的表達發揮作用[21]。此外,桑枝乙醇提取物還可降低肥胖模型小鼠的血脂水平,減少肝臟的脂質積累,使參與脂肪生成基因表達的水平降低[21]。喻艷[22]用高通量篩選法測定4個萃取部分對脂肪酶的抑制率和半抑制濃度,結果表明,乙酸乙酯萃取部位對脂肪酶的抑制作用最強,表明對脂肪酶有抑制活性的成分可能屬于黃酮和多酚類化合物。通過對乙酸乙酯萃取部位分離鑒定發現主要是蘆丁、槲皮素、桑色素、氧化白藜蘆醇等黃酮類化合物;槲皮素5-OH和槲皮素7-OH中的O原子或H原子與脂肪酶的4個氨基酸殘基結合形成氫鍵,使脂肪酶的活性殘基被占用,抑制其活性。

2.2 降血糖活性

研究人員用不同溶劑提取的桑枝提取物對糖尿病動物模型進行了研究,結果表明,其能有效抑制小腸α-葡萄糖苷酶的活性,降低糖尿病小鼠的餐后血糖,藥效學研究表明桑枝中的黃酮類成分是降糖的有效成分[23]。不同品種桑枝的提取物,如二倍體和四倍體白桑和魯桑,均可降低糖尿病小鼠的空腹血糖,且各組間無明顯差異[24]。桑枝多糖能通過調節腸道菌群結構,減少志賀氏菌、大腸桿菌、變形桿菌及克雷伯菌的數量,增加雙歧桿菌、腸球菌、乳桿菌及鏈球菌等的數量,從而達到降低血糖的作用[25]。桑枝低聚糖能通過改善胰島素抵抗、改善氧化應激水平、調節腸道菌群等途徑降低糖尿病小鼠血糖,緩解糖尿病小鼠消瘦的狀況,修復結腸與腎臟損傷,從而起到降血糖的作用[26]。

已有研究表明,桑枝中生物堿類成分1-DNJ是良好的α-葡萄糖苷酶抑制劑。在催化口袋內,1-DNJ與α-葡萄糖苷酶相比與麥芽糖等雙糖具有更高的親和力,1-DNJ與α-葡萄糖苷酶以氫鍵結合,抑制雙糖水解和血糖升高[27]。已有研究報道,與1-DNJ相關的衍生物,如N-羥基-1-脫氧野尻霉素、N-甲基-1-脫氧野尻霉素對血糖具有抑制作用[28]。桑枝中的生物堿還可調節腸道微生物,促進腸-胰軸中胰高血糖素樣肽的分泌,間接調節胰島素的分泌[29]。研究發現,桑枝水提取物中的生物堿與黃酮對α-葡萄糖苷酶的抑制活性表現出協同作用,即隨著生物堿及黃酮成分的增加對酶的抑制作用大大提高[15]。

2.3 抗炎及抗病原微生物活性

桑枝提取物對經典的動物炎癥模型,如小鼠耳腫脹、角叉菜膠足跖腫脹、腹腔通透性及肉芽組織增生均表現出顯著的抑制作用。桑枝水提取物可能通過調控低氧誘導因子-1α/血管內皮生長因子/基質金屬蛋白酶(hypoxia inducible factor-1α/vascular endothelial growth factor/matrix metalloprotei-nases,HIF-1α/VEGF/MMPs)信號通路,抑制血管新生、血管翳形成及細胞外基質的降解,從而發揮對佐劑性關節炎大鼠骨破壞的保護作用。桑枝中的Diels-Alder型加合物,如桑根酮C、桑根酮D、桑皮酮G,可通過抑制選擇性磷酸二酯酶4抑制劑(selective phosphodiesterase 4 inhibitors,PDE4)的活性來抑制炎癥細胞[30]。另外,桑皮酮G可殺死遠緣鏈球菌、血鏈球菌以及引起牙周炎的牙齦卟啉單胞菌等致病菌[7]。桑黃酮C和mulberrofuran G對腎小球腎炎模型小鼠具有治療意義,對金黃色葡萄球菌具有很強的抑制作用[31]。采用桑枝總黃酮干預γ-干擾素(γ-interferon,IFN-γ)和脂多糖協同誘導的RAW264.7細胞炎癥模型,結果發現,桑枝總黃酮呈劑量依賴性降低細胞上清液中一氧化氮(nitric oxide,NO)含量并且無細胞毒性,通過絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信號轉導通路抑制誘導型一氧化氮合酶(nducible nitric oxide synthase,iNOS)基因和蛋白的表達從而降低NO的含量,提高細胞總抗氧化能力,同時下調環氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、白細胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白細胞介素-6(interleukin-6,IL-6)等炎癥介質而發揮抗炎作用[32]。

桑枝多糖預防性給藥能改善小鼠腎缺血再灌注損傷,其機制可能與通過抑制Toll樣受體-p38絲裂原活化蛋白激酶(toll-like receptor-p38 mitogen activated protein kinase,TLR4/p38MAPK)通路而減輕炎癥反應有關[33]。桑枝多糖能顯著降低鏈脲佐菌素誘導的糖尿病模型小鼠的血糖和血清糖化蛋白、TC、尿素氮、肌酐和24 h尿蛋白。此外,糖尿病模型小鼠腎組織中白細胞介素-1(interleukin-1,IL-1)和白細胞介素-1R(interleukin 1R,IL-1R)的蛋白水平明顯降低,核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)的內源性表達下降,對減輕腎內炎癥有一定的意義[34-35]。桑枝中芪類物質,如氧化的白藜蘆醇能進入白色假絲酵母菌(C.albicans)、大腸桿菌(E.coli)、金黃色葡萄球菌(S.aureus)菌株體內,通過改變菌株的細胞形態、破壞細胞壁、抑制生物膜的形成,影響菌株的生長與繁殖,進而發揮抑菌作用[36]。

2.4 免疫調節活性

桑枝中的多糖類成分具有調節免疫的作用,桑枝多糖可顯著提高免疫低下小鼠的吞噬指數,增強網狀內皮細胞的吞噬功能和小鼠遲發型變態反應能力,增強T細胞活性[37]。桑枝提取物對體外B-16黑色素瘤細胞的酪氨酸酶和黑色素合成有抑制作用,在體內其對豚鼠黑色素生成具有抑制作用[38]。桑枝乙醇提取物對遲發型超敏反應小鼠的耳腫脹具有顯著抑制作用,對小鼠血清溶血素水平有顯著的增強作用[39]。桑枝水提取物能顯著促進免疫器官的發育并提高小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬率和吞噬指數[40]。桑枝多糖可增強正常小鼠因2,4-二硝基氟苯引起的小鼠遲發性變態反應,增強免疫器官的發育和脾臟淋巴細胞的增殖能力,對免疫抑制試驗小鼠的免疫功能也有一定的增強作用[41]。

2.5 其他藥理活性

桑枝多酚(包括桑皮苷A、桑黃素、蘆丁、花青素及氧化白藜蘆醇[36,42])具有較強的抗氧化活性。桑枝提取物能顯著降低由衣霉素誘導的NIT-1胰腺β細胞凋亡,增加葡萄糖刺激后胰島素分泌;改善糖尿病小鼠胰腺β細胞的丟失,通過改善線粒體功能,抑制胰腺β細胞的凋亡,有效地改善胰島素抵抗[43]。桑枝乙醇提取物能降低由高脂飲食誘導的肥胖小鼠的體質量、肝臟質量和附睪脂肪組織質量,可顯著降低肥胖小鼠的血脂水平[22]。桑枝總黃酮干預肝損傷模型小鼠時,能使小鼠血清中丙氨酸氨基轉移酶、天冬氨酸氨基轉移酶、堿性磷酸酶含量明顯減少,白蛋白和總抗氧化力水平顯著增高,對肝損傷中肝細胞脂肪變性、腫脹壞死以及炎性細胞浸潤等均具有不同程度的緩解作用。進一步研究發現,桑枝總黃酮抑制肝纖維化的機制可能與抑制肝星狀細胞增殖及抑制轉化生長因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)信號途徑有關[44]。桑枝乙醇提取物能有效恢復由氧酸鹽誘導的腎臟mURAT1、mGLUT95和mOAT1的表達變化,通過降低血清尿酸水平及增加尿酸排泄量等改善腎功能[45]。桑枝多糖對糖尿病小鼠腎臟損傷有一定的保護作用,其機制可能是通過增加腎皮質沉默信息調節因子1(silent information regulator 1,SIRT1)、叉頭轉錄因子(forkhead transcription factor,FOXO1)的蛋白表達,增強組織的抗氧化能力[46]。從桑枝中分離得到的桑辛素M、桑辛素C對A549和MCF7細胞株均有明顯殺傷力[47]。桑枝多糖對SGC-7901細胞凋亡有促進作用,并在S期誘導細胞周期停滯[48]。此外,桑枝能增加腦缺血再灌注小鼠超氧化物岐化酶的活性,改善腦血流,減輕對血腦屏障的損傷,對腦缺血再灌注損傷具有抑制作用[45]。

3 桑枝Q-marker的預測分析

根據2020年版《中國藥典》記載,桑枝在春末夏初采收,去葉,曬干。不同產地、不同采收季節的桑枝其化學成分類型大體相似,但含量存在差異。《中國藥典》在鑒別項下僅記載性狀描述和顯微鑒別項目,無相關化學成分的質量控制內容,難以體現桑枝的整體價值。隨著中藥Q-marker概念的提出,歸納總結存在于藥材中固有的、與中藥的功能屬性密切相關的化學物質,作為反映中藥有效性的標志性物質進行質量控制。因此,對桑枝的Q-marker進行預測分析,可進一步建立科學的桑枝質量控制方法。

3.1 基于植物親緣學及化學成分特有性的Q-marker預測分析

桑屬是溫帶、暖溫帶植物,在北半球的亞熱帶地區到南半球的熱帶地區都有間歇性地分布。在中國西南地區,如云南、貴州、川藏地區,有豐富的桑屬物種。由于桑屬植物地理分布廣、生態環境復雜,可以異花授粉、無性繁殖,形成許多過渡類型。在不同的生態條件下,經過長期的自然選擇和人工培育,形成了許多種、變種和亞種。全世界桑屬植物約有30種和10變種,我國是世界上桑種最多的國家,考察到共有15個桑種、5個變種。藥用桑枝可能來源于華桑、黑桑、雞桑及變種的鬼桑、垂枝桑等多種桑樹[49]。Diels-Alder加合物是另一種多酚,桑屬植物中大部分含有類黃酮基團,類黃酮單元中的C-2和C-3可被苯基類植物及其類似物取代。由黃酮異戊二烯基與查爾酮的α,β雙鍵發生[4+2]環加成的Diels-Alder型加合物是桑屬植物特有的化學標志物。

3.2 基于傳統性味功效的Q-marker預測分析

中藥的性、味、歸經是中藥的基本屬性,也是臨癥治法、遣藥組方的指導依據,也應作為Q-marker確定的依據之一。桑枝微苦,平,歸肝經,祛風濕,利關節。現代研究表明,生物堿、苷類及苦味質是中藥苦味的主要來源[50]。在《中國藥典》中記載的206種苦味藥物中,苦寒藥中含生物堿的藥物最多,占以生物堿為主成分藥物總數的75%[51]。根據以上分析,應將生物堿成分作為桑枝Q-marker選擇的重要參考依據。

中藥功效是對其有效性的概括,也是臨床用藥的依據。古代的諸多本草著作中記載:“桑枝,功專祛風濕拘攣”“桑枝療遍體風癢干燥,兼療口干”,可治療寒濕痹、四肢拘攣、腳氣浮腫之病癥[3]。桑枝中黃酮類成分具有明顯的抗炎、鎮痛作用,與其傳統功效中“祛風濕拘攣”一致,認為是其主要的藥效物質基礎,可考慮作為Q-marker。

3.3 基于新的藥效用途的Q-marker 預測分析

歷代醫藥典籍記載桑枝常用于治療風濕痹痛、四肢酸痛麻木等疾病。根據傳統中醫藥理論,結合現代藥理研究技術和方法,確定了桑枝中降血糖的有效成分。中國原創降糖天然藥物桑枝總生物堿片于2020年3月獲批上市,是我國十余年來獲批的首個創新中藥,也是糖尿病治療領域唯一的活性成分天然藥物[52]。桑枝中的1-DNJ經提取、分離、純化后可作為α-葡萄糖苷酶抑制劑治療糖尿病,具有成分明確、機制清楚、靶點清晰的優勢[53]。1-DNJ可抑制白色前脂肪細胞分化過程中的脂肪生成,并通過激活腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)促進白色前脂肪細胞向米色脂肪細胞的轉換,為1-DNJ治療肥胖相關疾病提供了新的機制[54]。現代研究發現,桑枝有降血脂的新藥效,可顯著降低模型大鼠血清中TG、TC、LDL水平。桑枝醇提取物乙酸乙酯部位對脂肪酶的抑制作用最強,分離鑒定發現主要是蘆丁、槲皮素、桑色素、氧化白藜蘆醇等黃酮類化合物[22]。以上成分在現代藥理研究中發現了新的藥效、用途,可作為桑枝Q-marker的選擇。

3.4 基于化學成分的可測性Q-marker 預測分析

采用高效液相色譜法(high performance liquid chromatography,HPLC)測定桑枝中黃酮類成分的含量,結果發現,桑枝中桑皮苷A及桑黃素的含量較高,可作為黃酮類成分的指標成分進行質量分析[55]。用HPLC融合化學計量學方法建立桑枝藥材的特征指紋圖譜,12批桑枝指紋圖譜有18個共有峰、4個特征峰,樣品之間化學成分含量及相似度相差很大,其中以桑皮苷A、桑皮苷F、反式氧化白藜蘆醇、反式白藜蘆醇、桑辛素M在桑枝提取液中為含量較高的組分[56-57]。由此可知,桑皮苷A、桑辛素、桑黃素及氧化白藜蘆醇可考慮作為桑枝的質量控制成分。

桑枝中多含有水溶性多羥基生物堿,常見的提取方法有溶劑法、離子交換樹脂法、酶解法、超聲波提取法、微波提取法以及超臨界流體萃取等[58]。基于生物堿解離常數(pKa)與氨基酸等電點(pI)的差異,優化樹脂的pH值,減少氨基酸吸附提高陽離子樹脂吸附選擇性,提高生物堿分離純化效果[59]。孫蓮等[60]建立了HPLC法測定不同產地桑枝中1-DNJ的含量,結果顯示,不同產地桑枝中1-DNJ的含量不同且方法簡單易行,可用于桑枝的質量控制與評價。由于生物堿本身不具有紫外吸收特性,采用液相串聯質譜法測定DNJ的含量,該法無需衍生,操作方便,測定結果準確[61]。利用化學合成法將1-DNJ轉化成沸點較低的酯類物質,用氣相法快速檢測[62]。由此可知,1-DNJ可以作為桑枝的質量控制成分。

3.5 基于化學成分含量變化的Q-marker 預測分析

黃酮類物質是桑枝中含量豐富且發揮功效的主要活性成分。然而,在中藥質量控制研究中,常需要考察產地、采收季節、部位和炮制方式等因素對含量測定的影響。桑枝中黃酮類成分的分布有以下特點:不同桑樹品種的桑枝中總黃酮含量差異明顯;夏伐后半年生枝條與冬伐后1年生枝條,桑枝中總黃酮含量都有隨桑樹枝條生長而降低的現象;月齡相同,下半年桑枝中總黃酮的含量高于上半年;生長2年、1年的桑枝總黃酮的含量相近,而生長半年以內桑枝總黃酮含量較低[63]。

桑枝中多含有水溶性多羥基生物堿,研究發現,無論是夏伐后半年生枝條還是冬伐后1年生枝條,桑枝中總生物堿含量都是隨著桑樹枝條的生長而增加[64]。1-DNJ是桑枝中一種降血糖功效較好的天然活性物質,因其藥理活性好、含量高而被廣泛深入研究。桑枝中的1-DNJ含量因品種、成熟程度、生長季節的不同有很大差異,如老枝條中的1-DNJ含量高于嫩枝,桑枝皮層含量高于桑枝木質層含量,冬季含量高于夏季含量[65]。

綜上所述,桑枝中的黃酮類、生物堿類成分與其藥效密切相關,是其主要藥效物質基礎,可作為Q-marker,可進一步深入研究桑枝中含有黃酮類化學物質組分,基于不同產地的成分含量差異,建立專屬的測定方法,保證質量評價和質量控制的科學性。

4 結論

桑枝資源豐富、藥用歷史悠久、臨床療效確切且無毒性。通過現有文獻可知,黃酮類成分和生物堿是桑枝主要的特征性化學成分,同樣也是桑枝相關藥效的物質基礎。質量控制方面主要采用單指標成分、多指標成分的質量控制以及指紋圖譜等方法,這些質量控制手段為桑枝的臨床安全使用提供了有效支持。其中,黃酮類成分,如桑皮苷A、桑色素、桑辛素;芪類化合物,如氧化白藜蘆醇;生物堿類成分,如1-DNJ,均可作為桑枝的Q-marker。

隨著桑枝的使用范圍越來越廣泛,還需注意以下問題:①我國桑樹資源豐富、種類繁多且分布廣泛,不同地區環境的差異使得桑枝中特征性物質的含量差異明顯;②當桑枝被剪下后,植物體為了抵御外界刺激,其利用自身體內糖苷合成大量次生代謝產物,這為質量分析增加了難度。鑒于以上考慮,用某單一成分無法衡量桑枝質量的優劣。因此,應采用新型質量評價模式與傳統方法相結合,如DNA指紋和DNA序列分析技術、一測多評技術、基于支持向量機(support vector machine,SVM)的“內外結合”中藥質量控制模式等技術手段為桑枝質量控制提供技術支撐。

總之,該綜述從化學成分、藥理活性及Q-marker預測分析方面為桑枝的質量控制提供科學依據。