外周血淋巴細胞的VCS 參數與系統性紅斑狼瘡疾病活動性的相關性

馬瀟馳，張金彪（通信作者）

河北省滄州中西醫結合醫院實驗診斷科 （河北滄州 061001）

系統性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）是一種臨床常見的自身免疫性疾病。淋巴細胞參與的細胞免疫功能紊亂及細胞凋亡異常是SLE發病的重要原因，尤其是T 淋巴細胞凋亡增多，其產生的大量DNA、核小體等均可能成為自身抗原，刺激B 淋巴細胞活化[1]。在SLE 的發生、發展過程中常伴隨著淋巴細胞數量、形態及內部結構的變化，原因可能與SLE 的疾病活動性相關[2]。血細胞分析儀的淋巴細胞VCS 參數[包括淋巴細胞體積（lymphocyte volume，LV）、淋巴細胞電導率（lymphocyte conductivity，LC）、淋巴細胞光散射性（lymphocyte scatter，LS）]能對各類淋巴細胞的形態變化進行充分的表達和描述[3]。本研究通過觀察不同活動期SLE 患者及健康對照組的外周血淋巴細胞VCS 參數，旨在探討不同疾病狀態下的淋巴細胞形態及內部結構的變化情況，尋找對疾病診斷和活動性判斷有價值的參數，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018 年1 月至2021 年3 月河北省滄州中西醫結合醫院風濕免疫科收治的134 例SLE 患者作為研究對象，根據系統性紅斑狼瘡疾病活動指數（systemic lupus erythematosus disease activity index，SLEDAI）評分將患者分為活動組（83 例，SLEDAI評 分≥10 分）和 緩 解 組（51 例，SLEDAI 評 分<10 分），另選取同期的健康體檢者60 名作為對照組。活動組男16 例，女67 例；年齡21～68 歲，平均（36.53±13.56）歲；平均病程（7.23±3.78）年。緩解組男10 例，女41 例；年齡22～66 歲，平均（37.18±13.11）歲；平均病程（8.23±4.14）年。對照組男11名，女49 名；年齡 22～67 歲，平均（36.78±13.31）歲。3 組性別、年齡比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。本研究經醫院醫學倫理委員會批準。

納入標準：SLE 患者的臨床資料完整，符合1997 年美國風濕病協會推薦的SLE 診斷標準[4]，自愿參加本研究且已簽署知情同意書。排除標準：合并其他自身免疫性疾病和炎癥疾病的患者；合并嚴重心血管疾病的患者；合并惡性腫瘤的患者；合并其他嚴重的原發性疾病的患者；近期有輸血史的患者。

1.2 方法

采集3 組清晨空腹靜脈血2 ml，采用EDTAK2 抗凝，利用Beckman-Coulter LH750 全自動血細胞分析儀檢測淋巴細胞VCS 參數，記錄LV、LC、LS 及各參數的平均分布寬度（standard deviation，SD），試劑為儀器原裝配套試劑。

1.3 觀察指標

比較3 組的LV、LC、LS 及各參數的SD。

1.4 統計學處理

采用SPSS 24.0 統計軟件進行數據分析，計量資料以±s表示，多組間比較采用方差分析，兩組間比較采用LSD檢驗；相關性分析采用Pearson檢驗；繪制ROC 曲線，分析LV 診斷SLE 活動期的價值，并確定最佳截斷值；P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組外周血淋巴細胞VCS 參數及各參數的SD 比較

活動組的LV 高于緩解組和對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）；活動組的LC 低于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）；活動組的LVSD、LC-SD、LS-SD 和緩解組的LV-SD、LS-SD均高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05），見表1。

表1 3組外周血淋巴細胞VCS 參數及各參數的SD 比較

2.2 外周血淋巴細胞VCS 參數與SLE 疾病活動性的相關性

Pearson檢驗結果顯示，活動組的LV 與SLE疾病活動性成正相關（r=0.586，P<0.05），見圖1；其余參數與SLE 疾病活動性均無相關性，見表2。

圖1 活動組LV 與SLE 疾病活動性的相關性

表2 外周血淋巴細胞VCS 參數與SLEDAI 的相關性

2.3 LV 診斷活動期SLE 的ROC 分析

根據活動組和對照組的LV 數據繪制ROC 曲線。ROC 分析結果顯示，LV 診斷活動期SLE 的曲線下面積為0.848（95%CI為0.780～0.915），最佳截斷值為85.29 fl，此時約登指數為0.688，診斷靈敏度為77.1%，特異度為91.7%，見圖2。

圖2 LV 診斷活動期SLE 的ROC 曲線

3 討論

VCS 技術是在白細胞檢測通道，保持白細胞與體內相同的狀態下，應用電阻抗原理對淋巴細胞VCS 參數進行檢測。VCS 參數包括LV（反映細胞體積大小）、LC（反映細胞內部結構，如細胞核質比例、細胞內化學成分等）、LS（提供細胞形態及胞核結構等信息）[5]。淋巴細胞VCS 參數在細菌、病毒等感染性疾病中的應用已有廣泛報道[6-7]。

SLE 是一種慢性遷延性、反復發作的自身免疫性疾病，疾病可分為活動期與緩解期。處于不同疾病時期的患者，其治療方案的選擇亦有差別，因而尋求與SLE 疾病活動性相關的指標尤為重要[8]。目前，SLE 疾病活動性的判斷主要依據SLEDAI 評分[9]。SLEDAI 評分是將各系統的復雜表現及實驗室檢查結合起來，根據患者的病情逐條進行評分[10]，此方法受評估者主觀因素的影響較大，且操作比較復雜，影響其推廣應用。SLE 疾病的活動性與淋巴細胞大小、形態及內部結構的變化相關，這種變化比較微小，很難通過顯微鏡觀察，但卻可以通過VCS 參數發現，加之VCS 參數為定量檢測參數，受人為因素影響小，結果更加準確，且參數的檢測可通過全自動血細胞分析儀自動化進行，操作較為簡單。

本研究結果顯示，活動組的LV、LV-SD、LCSD、LS-SD 較高，而LC 較低，說明SLE 活動期患者淋巴細胞的體積大小、形態及細胞內部結構均發生了明顯改變，原因可能與T 淋巴細胞凋亡增多及B 淋巴細胞異常活化有關。凋亡細胞主要表現為細胞形態改變，胞膜氣泡化、細胞核固縮、染色體DNA 分解成有規律的片段；活化的B 淋巴細胞常表現為細胞體積增大，胞漿量增多，副染色質增多[11]，故反映細胞體積的LV 明顯增大；細胞核固縮、胞漿量增多，故反映細胞核質比例的LC 明顯降低。3個參數的離散程度均明顯增大，說明SLE 活動期患者的細胞形態變化差異較大。此外，Pearson檢驗結果顯示，活動組的LV 與SLE 疾病活動性成正相關（r=0.586，P<0.05）；ROC 分析結果顯示，LV 診斷活動期SLE 的曲線下面積為0.848（95%CI為0.780～0.915），最佳截斷值為85.29 fl，此時約登指數為0.688，診斷靈敏度為77.1%，特異度為91.7%，表明以85.29 fl 為臨界值診斷活動期SLE 的價值最高。

綜上所述，外周血淋巴細胞的VCS 參數可以反映SLE 患者體內淋巴細胞的形態及內部結構的變化，LV 與疾病活動性密切相關，對判斷SLE 患者是否處于活動期具有較好的參考價值；加之VCS參數來源于血常規分析，具有客觀、快速、結果準確等優點，對判斷SLE 患者疾病活動性具有較好的應用前景。