Ki-67、Bcl-6、Bcl-2 及TEFM在彌漫大B 細(xì)胞淋巴瘤中的表達(dá)及預(yù)后意義

孫曉梅，梅 雯，何 冰，羅中貴，孫如麗，熊 偉，趙 一*

（1.楚雄彝族自治州人民醫(yī)院病理科，云南楚雄 675000；2.大理大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，云南大理 671000）

彌漫大B 細(xì)胞淋巴瘤（diffuse large B cell lymphoma，DLBCL）是淋巴造血系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性淋巴瘤之一，是非霍奇金淋巴瘤最常見(jiàn)的類型，占非霍奇金淋巴瘤的30%～40%〔1〕。DLBCL 具有高度侵襲性和異質(zhì)性，可發(fā)生于結(jié)內(nèi)或結(jié)外任何部位，病情進(jìn)展快、惡性程度高。若同一病例出現(xiàn)MYC 與Bcl-2 異位或MYC 與Bcl-6 異位稱其為“雙打擊”淋巴瘤；若MYC、Bcl-2、Bcl-6 三者基因重排同時(shí)陽(yáng)性，則稱其為“三打擊”淋巴瘤，“雙打擊”淋巴瘤和“三打擊”淋巴瘤惡性度高、化療效果和預(yù)后均較差〔2-3〕。利妥昔單抗聯(lián)合CHOP（以下簡(jiǎn)稱“RCHOP”）化療方案大大提高了DLBCL 患者的完全緩解率及5 年生存率，但由于DLBCL 具有異質(zhì)性、復(fù)雜免疫表型及分子遺傳學(xué)等，部分難治性復(fù)發(fā)患者的治療效果并不理想，仍然嚴(yán)重影響著患者生存率〔4〕。目前對(duì)于難治性復(fù)發(fā)患者，干細(xì)胞移植是一種有效的治療方法，由于許多患者不符合干細(xì)胞移植條件，限制了它的應(yīng)用〔5〕。因此，研究DLBCL 發(fā)病機(jī)制及預(yù)后相關(guān)指標(biāo)對(duì)于治療方案的選擇具有重要的指導(dǎo)意義。

線粒體轉(zhuǎn)錄延伸因子（mitochondrial transcription elongation factor，TEFM）又稱為C17orf42，是對(duì)細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞增殖及凋亡調(diào)節(jié)具有重要作用的蛋白因子，在線粒體DNA 的轉(zhuǎn)錄過(guò)程中起正調(diào)控作用，TEFM 為mtDNA 復(fù)制提供引物，在線粒體轉(zhuǎn)錄延伸和抗轉(zhuǎn)錄終止中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用，對(duì)細(xì)胞能量代謝至關(guān)重要〔6〕。王唯斯等〔7〕基于生物信息數(shù)據(jù)庫(kù)分析發(fā)現(xiàn)TEFM mRNA 在腦膠質(zhì)瘤中高表達(dá)，其表達(dá)量與世界衛(wèi)生組織分級(jí)、病理類型具有相關(guān)性，提示TEFM 基因在細(xì)胞內(nèi)的功能可能類似于細(xì)胞癌基因。DLBCL 在能量代謝方面存在明顯異質(zhì)性，線粒體與DLBCL 的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程密切相關(guān)，或許能為DLBCL 的治療提供理論指導(dǎo)和新的策略〔8〕。研究〔9〕表明，BCR 信號(hào)通路、Bcl-6 和自噬等調(diào)節(jié)BCR-DLBCL 亞型細(xì)胞的有氧糖酵解過(guò)程，高度活化的線粒體功能基因和高表達(dá)的脂肪酸代謝關(guān)鍵基因等調(diào)節(jié)OxPhos-DLBCL 亞型細(xì)胞的氧化磷酸化過(guò)程。Ki-67 為淋巴瘤增殖活性指標(biāo)，Bcl-6 是凋亡抑制因子，功能與Ki-67 相似。Bcl-6 基因突變和染色體易位是腫瘤發(fā)生的基礎(chǔ)，異常表達(dá)Bcl-6 可直接調(diào)節(jié)細(xì)胞分化、增殖和凋亡，促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)。Bcl-2 是一種抗凋亡分子，其過(guò)表達(dá)使細(xì)胞抵抗正常凋亡，從而具有致瘤作用。TEFM 是一種促進(jìn)細(xì)胞增殖、抑制細(xì)胞凋亡的蛋白因子，在線粒體基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用。Ki-67、Bcl-6 及Bcl-2均對(duì)DLBCL 細(xì)胞增殖及凋亡起重要調(diào)控作用，它們是否與其他腫瘤增殖因子如TEFM 相互作用共同參與DLBCL 的發(fā)生、發(fā)展有待進(jìn)一步證實(shí)。基于此，本研究旨在探討Ki-67、Bcl-6、Bcl-2 及TEFM 在DLBCL 中的表達(dá)及其與患者臨床病理特征的相互關(guān)系，為DLBCL 的臨床診斷和治療提供理論依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象收集楚雄彝族自治州人民醫(yī)院DLBCL 病理組織樣本41 例和反應(yīng)性增生淋巴組織樣本42 例，記錄上述樣本對(duì)應(yīng)患者的臨床病理參數(shù)信息和預(yù)后信息。診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2017 年世界衛(wèi)生組織修訂的《造血與淋巴組織腫瘤分類（第4版）》（中文譯名）〔10〕，所有入選病例均為初診病例，手術(shù)前均未經(jīng)過(guò)化療和放療。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)活檢組織病理學(xué)確診為DLBCL 者；②臨床病歷資料完整者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①并發(fā)其他惡性腫瘤者；②蠟塊組織過(guò)少者；③年齡小于18 歲者。

1.2 試劑一抗為兔抗TEFM 抗體（Gene Tex 公司，克隆號(hào)：822004102）；Ki-67（批號(hào)：20220413）、Bcl-6（批號(hào)：20220719）、Bcl-2（批號(hào)：20220916）、DAB 顯色試劑盒（批號(hào)：20220804）均購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司；二抗（批號(hào)：20210519）。

1.3 免疫組織化學(xué)方法3 μm 石蠟切片后68 ℃烤箱烘烤2 h，分別使用TO 透明（Ⅰ）、TO 透明（Ⅱ）脫蠟（各10 min），然后依次在無(wú)水乙醇（Ⅰ）、無(wú)水乙醇（Ⅱ）、95%乙醇（Ⅰ）、95%乙醇（Ⅱ）中浸潤(rùn)（各3 min），在85%乙醇中浸潤(rùn)2 min 后使用蒸餾水沖洗2 min。將切片放入乙二胺四乙酸緩沖液中高溫修復(fù)抗原后滴加3%過(guò)氧化氫溶液于玻片中阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性，10 min 后使用磷酸鹽緩沖溶液（phosphate buffered saline，PBS）沖洗3 次，每次沖洗5 min，滴加一抗，37 ℃孵育1 h；PBS 沖洗3 次，滴加二抗，37 ℃孵育30 min；PBS 沖洗3 次后DAB顯色5 min，蒸餾水沖洗終止顯色；使用Mayer 蘇木素輕度復(fù)染細(xì)胞核3～5 min，蒸餾水沖洗后PBS 返藍(lán)，沖洗脫水后吹干載玻片，中性樹膠封片，PBS 代替一抗作為陰性對(duì)照。

1.4 判讀標(biāo)準(zhǔn)Bcl-6、Bcl-2、TEFM 采用定性判斷，隨機(jī)選取10 個(gè)高倍視野，根據(jù)著色強(qiáng)度和視野中陽(yáng)性細(xì)胞所占比例進(jìn)行評(píng)分〔11〕。著色強(qiáng)度評(píng)分：無(wú)著色計(jì)0 分，淺黃色計(jì)1 分，棕黃色計(jì)2 分，棕褐色計(jì)3 分；陽(yáng)性細(xì)胞所占比例評(píng)分：＜25%計(jì)1 分，25%～50%計(jì)2 分，＞50%計(jì)3 分。將著色強(qiáng)度評(píng)分和陽(yáng)性細(xì)胞所占比例評(píng)分相乘：0～1 分為陰性，2～4分弱陽(yáng)性，5～8 分為中等陽(yáng)性，9～12 分強(qiáng)陽(yáng)性，其中，陰性和弱陽(yáng)性歸為低表達(dá)，中等陽(yáng)性和強(qiáng)陽(yáng)性歸為高表達(dá)。Ki-67 采用定量判定，將陽(yáng)性細(xì)胞所占比例≥50%歸為高表達(dá)，＜50%歸為低表達(dá)。所有病理結(jié)果均經(jīng)2 名以上病理學(xué)專家采用雙盲法診斷。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 24.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，比較Ki-67、Bcl-6、Bcl-2 及TEFM 蛋白在反應(yīng)性增生淋巴組織與DLBCL 組織間的表達(dá)差異用χ2檢驗(yàn)；探究Ki-67、Bcl-6、Bcl-2 及TEFM 蛋白表達(dá)水平與DLBCL 臨床病理特征的關(guān)系用χ2檢驗(yàn)及Fisher 確切概率法；考察TEFM 與Ki-67、Bcl-6、Bcl-2表達(dá)的相關(guān)性用Spearman 秩相關(guān)分析，相關(guān)系數(shù)R＞0 表示正相關(guān)，R＜0 表示負(fù)相關(guān)，R=0 表示零相關(guān)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Ki-67、Bcl-6、Bcl-2 和TEFM 蛋白表達(dá)情況對(duì)DLBCL 組織和反應(yīng)性增生淋巴組織樣本進(jìn)行Ki-67、Bcl-6、Bcl-2 和TEFM 蛋白表達(dá)差異分析。結(jié)果顯示，與反應(yīng)性增生淋巴組織相比，Ki-67、Bcl-6、Bcl-2 蛋白在DLBCL 組織中高表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；Ki-67、Bcl-6 和TEFM 定位于細(xì)胞核，Bcl-2 定位于細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)。在反應(yīng)性增生淋巴組織中，Ki-67 僅在生發(fā)中心高表達(dá)，而DLBCL 由于淋巴結(jié)構(gòu)被腫瘤細(xì)胞取代而遭到破壞，無(wú)正常淋巴結(jié)結(jié)構(gòu)，和反應(yīng)性增生淋巴組織相比，Ki-67 在腫瘤部位彌漫強(qiáng)陽(yáng)性（≥75%）表達(dá)。在反應(yīng)性增生淋巴組織中，Bcl-2 生發(fā)中心陰性，而在DLBCL 組織中可表現(xiàn)為彌漫陽(yáng)性表達(dá)，成為非生發(fā)中心起源的標(biāo)志物。在反應(yīng)性增生淋巴組織中，Bcl-6 通常表達(dá)于生發(fā)中心，而在DLBCL 組織中，同樣表現(xiàn)為彌漫陽(yáng)性表達(dá)，是腫瘤細(xì)胞非生發(fā)中心起源的標(biāo)志物。TEFM 蛋白在反應(yīng)性增生淋巴組織中和DLBCL 中表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1、圖1。

表1 Ki-67、Bcl-6、Bcl-2 和TEFM 蛋白在DLBCL 組織和反應(yīng)性增生淋巴組織中的表達(dá)情況

圖1 Bcl-2、Bcl-6、Ki-67 和TEFM 蛋白在反應(yīng)性增生淋巴及DLBCL 組織中的表達(dá)情況

2.2 Ki-67、Bcl-6、Bcl-2 和TEFM 蛋白表達(dá)水平與DLBCL 臨床病理相關(guān)性分析通過(guò)對(duì)DLBCL 患者預(yù)后影響因素統(tǒng)計(jì)分析可知，DLBCL 患者Ki-67、Bcl-6、Bcl-2 和TEFM 蛋白表達(dá)水平與年齡、性別、B 癥狀、乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）數(shù)值、結(jié)外器官受累情況及復(fù)發(fā)情況均無(wú)相關(guān)性（P ＞0.05），DLBCL 組織中TEFM 及Ki-67 蛋白表達(dá)水平與原發(fā)部位相關(guān)（P=0.049＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 Ki-67、Bcl-6、Bcl-2 和TEFM 蛋白表達(dá)水平與DLBCL 臨床病理相關(guān)性分析

2.3 TEFM 與Ki-67、Bcl-2、Bcl-6 表達(dá)的相關(guān)性分析通過(guò)統(tǒng)計(jì)分析TEFM 與Ki-67、Bcl-2、Bcl-6 表達(dá)的相關(guān)性可知，TEFM 蛋白表達(dá)與Ki-67、Bcl-6表達(dá)呈正相關(guān)（P＜0.05，R＞0）。見(jiàn)表3。

表3 TEFM 與Ki-67、Bcl-2、Bcl-6 表達(dá)的相關(guān)性分析

2.4 影響DLBCL 患者預(yù)后因素分析治療結(jié)束后隨訪3 年，DLBCL 患者生存21 例，生存率為51.22%（21/41）。單因素分析結(jié)果顯示，DLBCL 患者3 年生存率與性別、B 癥狀、LDH 數(shù)值、結(jié)外器官受累情況、復(fù)發(fā)情況和原發(fā)部位無(wú)相關(guān)性（P ＞0.05），與Ki-67、Bcl-2 和Bcl-6 表達(dá)情況亦無(wú)相關(guān)性（P＞0.05），僅與患者年齡有相關(guān)性（P＜0.05），年齡≥60歲的患者生存率較低，僅為28.57%。見(jiàn)表4。

表4 影響DLBCL 患者預(yù)后因素分析

3 討論

DLBCL 是非霍奇金淋巴瘤最常見(jiàn)的類型，多表現(xiàn)為單個(gè)或多個(gè)淋巴結(jié)或結(jié)外部位快速生長(zhǎng)的異質(zhì)性及侵襲性腫瘤。雖然大多數(shù)DLBCL 患者可以通過(guò)6～8 個(gè)周期的R-CHOP 化療方案治愈，但仍有部分難治性復(fù)發(fā)患者。隨著高通量測(cè)序和精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展，對(duì)DLBCL 形態(tài)學(xué)、免疫表型譜及分子發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí)逐漸擴(kuò)大，多種異常基因被發(fā)現(xiàn)，從分子水平研究有關(guān)預(yù)后和潛在治療靶點(diǎn)標(biāo)志物對(duì)于DLBCL 精準(zhǔn)診療有重要指導(dǎo)意義。

Ki-67 蛋白是一種與腫瘤細(xì)胞增殖密切相關(guān)的核蛋白，存在于細(xì)胞周期的所有活躍階段，但在靜止細(xì)胞G0 期中不存在，目前Ki-67 的表達(dá)作為評(píng)價(jià)淋巴瘤增殖活性的指標(biāo)已廣泛應(yīng)用于臨床，Ki-67 與DLBCL 亞型相關(guān)的結(jié)果仍存在爭(zhēng)議〔12-13〕。研究表明，Ki-67 表達(dá)水平是DLBCL 化療患者不良生存率的一個(gè)預(yù)測(cè)因素〔14-16〕，Ki-67 高增殖指數(shù)（80%）與DLBCL 患者總體生存率縮短顯著相關(guān)，與治療不良反應(yīng)相關(guān)性不顯著〔17〕。周穎等〔18〕回顧性分析接受R-CHOP 化療方案的DLBCL 患者Ki-67的表達(dá)及其與預(yù)后的相關(guān)性，結(jié)果表明Ki-67 低表達(dá)組的總生存時(shí)間（overall survival，OS）和無(wú)進(jìn)展生存期（progression free survival，PFS）明顯長(zhǎng)于高表達(dá)組，Ki-67 的表達(dá)水平是影響OS 的獨(dú)立預(yù)后因素。Tang 等〔19〕采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)了274例DLBCL 組織中Bcl-2 和Ki-67 的表達(dá)發(fā)現(xiàn)，Bcl-2/Ki-67 指數(shù)與DLBCL 患者的OS 和PFS 縮短顯著相關(guān)，特別是對(duì)于生發(fā)中心B 淋巴細(xì)胞樣亞型的DLBCL，Bcl-2 和Ki-67 共表達(dá)的患者生存率明顯降低；Pǎtra?cu 等〔20〕同樣發(fā)現(xiàn)Bcl-2、Ki-67 陰性表達(dá)患者的OS 和無(wú)病生存期較長(zhǎng)。吳紅衛(wèi)等〔21〕分析58 例DLBCL 患者Ki-67 表達(dá)水平，結(jié)果顯示Ki-67 表達(dá)水平與性別、年齡、LDH 數(shù)值、結(jié)外病變、臨床分期及國(guó)際預(yù)后指數(shù)評(píng)分無(wú)關(guān)，Ki-67 高表達(dá)組與低表達(dá)組相比預(yù)后較差。

Bcl-2 是線粒體介導(dǎo)凋亡通路中的關(guān)鍵蛋白，具備穩(wěn)定線粒體膜通透性作用，是一種抗凋亡分子，在靜止的B 淋巴細(xì)胞和T 淋巴細(xì)胞上表達(dá)，但在正常的生發(fā)中心細(xì)胞上不表達(dá)〔22〕。Bcl-2 在22%～80%的DLBCL 中表達(dá)，Bcl-6 和Bcl-2 陽(yáng)性率已被報(bào)道與不良預(yù)后相關(guān)〔23〕。在“雙打擊”淋巴瘤中以C-MYC、Bcl-2 基因同時(shí)異常最常見(jiàn)，C-MYC 及Bcl-2 基因異常表達(dá)可增強(qiáng)DLBCL 侵襲性，影響患者近期療效和預(yù)后〔24〕。有研究〔25-28〕表明Bcl-2 蛋白可以作為DLBCL 患者預(yù)后因子，Bcl-2 和Bcl-6 在DLBCL 中高表達(dá)，Bcl-2 和Bcl-6 陽(yáng)性表達(dá)與患者近期療效與預(yù)后不良相關(guān)，對(duì)患者監(jiān)測(cè)病情發(fā)展、治療方案選擇有現(xiàn)實(shí)意義〔29〕，Bcl-2 和Bcl-6 蛋白表達(dá)水平與DLBCL 患者的OS 和無(wú)病生存期顯著相關(guān)〔30〕。基因擴(kuò)增和易位是導(dǎo)致DLBCL 中Bcl-2蛋白過(guò)表達(dá)的共同機(jī)制，但Bcl-2 蛋白在DLBCL 中的表達(dá)及對(duì)患者生存率的影響仍存在爭(zhēng)議。此外，Bcl-2 蛋白過(guò)表達(dá)對(duì)生發(fā)中心來(lái)源的DLBCL（GCBDLBCL）和活化B 淋巴細(xì)胞來(lái)源的DLBCL（ABCDLBCL）預(yù)后價(jià)值有所不同。Bcl-6 是一種編碼95 kDa 的Kruppel 型鋅指蛋白，Bcl-6 蛋白是成熟B 淋巴細(xì)胞在生發(fā)中心反應(yīng)過(guò)程中所需的轉(zhuǎn)錄抑制因子，可影響淋巴濾泡生發(fā)中心B 淋巴細(xì)胞的反應(yīng)和增生，對(duì)生發(fā)中心的發(fā)育和維持至關(guān)重要，而生發(fā)中心是產(chǎn)生有效的體液免疫反應(yīng)所必需的。Bcl-6基因突變和染色體易位是腫瘤發(fā)生的基礎(chǔ)，Bcl-6已成為DLBCL 的關(guān)鍵治療靶點(diǎn)，其功能與Ki-67相似，Bcl-6 的異常表達(dá)可直接調(diào)節(jié)細(xì)胞的分化、增殖和細(xì)胞凋亡來(lái)影響DLBCL〔31〕。此外，Bcl-6 基因還通過(guò)調(diào)節(jié)其他基因（如C-MYC、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子和Bcl-2）的表達(dá)來(lái)調(diào)節(jié)腫瘤的生長(zhǎng)〔32-33〕。除Ki-67、Bcl-2 和Bcl-6 表達(dá)水平與DLBCL 患者預(yù)后密切相關(guān)，Snuderl 等〔34〕認(rèn)為年齡是影響患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，高齡患者預(yù)后較差。本研究結(jié)果顯示，DLBCL 組織中Ki-67、Bcl-2 和Bcl-6 表達(dá)水平明顯高于反應(yīng)性增生淋巴組織，與既往研究〔30〕結(jié)果相符，進(jìn)一步分析Ki-67、Bcl-2 和Bcl-6表達(dá)水平與影響DLBCL 患者預(yù)后的影響因素可知，三者的蛋白表達(dá)量與性別、年齡、B 癥狀、LDH數(shù)值、結(jié)外器官受累情況及復(fù)發(fā)情況均無(wú)相關(guān)性，Ki-67 蛋白表達(dá)水平與原發(fā)部位相關(guān)，結(jié)外表達(dá)水平高于結(jié)內(nèi)，其內(nèi)在聯(lián)系及機(jī)制有待進(jìn)一步探究。此外，單因素分析結(jié)果顯示，DLBCL 患者3 年生存率與性別、B 癥狀、LDH 數(shù)值、結(jié)外器官受累情況、復(fù)發(fā)情況和原發(fā)部位均無(wú)相關(guān)性，僅與患者年齡有相關(guān)性，年齡≥60 歲的患者3 年生存率較低，與既往文獻(xiàn)〔34〕報(bào)道一致。

TEFM 是線粒體基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控中的重要蛋白因子，促進(jìn)細(xì)胞增殖，抑制細(xì)胞凋亡，在線粒體基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用〔8〕。研究〔19，35-36〕提示TEFM 基因在細(xì)胞內(nèi)的功能可能類似于細(xì)胞癌基因，有研究結(jié)果表明，肝癌組織中TEFM 蛋白和mRNA 表達(dá)水平顯著上調(diào)，且TEFM 基因的高表達(dá)與預(yù)后不良相關(guān)，此外TEFM mRNA 表達(dá)水平與性別、血清甲胎蛋白水平、血管浸潤(rùn)程度顯著相關(guān)〔35〕。Wan 等〔36〕研究表明TEFM 是促進(jìn)肝癌生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的重要致癌基因，TEFM 表達(dá)升高通過(guò)激活ROS/ERK 信號(hào)促進(jìn)肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移，其表達(dá)水平增加與肝癌患者預(yù)后不良有關(guān)。TEFM 基因在DLBCL中的表達(dá)水平如何，以及是否與其他腫瘤增殖因子如Ki-67、Bcl-6、Bcl-2 相互作用共同參與DLBCL發(fā)生、發(fā)展目前尚無(wú)文獻(xiàn)報(bào)道。本研究結(jié)果顯示，DLBCL 組織與反應(yīng)性增生淋巴組織樣本中的TEFM 表達(dá)水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，進(jìn)一步分析TEFM 表達(dá)水平與影響DLBCL 患者預(yù)后的影響因素可知，其蛋白表達(dá)量與性別、年齡、B 癥狀、LDH數(shù)值、結(jié)外器官受累情況及復(fù)發(fā)情況均無(wú)相關(guān)性，TEFM 表達(dá)水平與原發(fā)部位相關(guān)，具體原因有待進(jìn)一步考究，且TEFM 表達(dá)與Ki-67、Bcl-6、Bcl-2 表達(dá)呈正相關(guān)，三者的異常表達(dá)如何調(diào)節(jié)細(xì)胞的分化、增殖和細(xì)胞凋亡來(lái)影響DLBCL 有待后續(xù)進(jìn)一步研究。由于本研究樣本量有限，在大樣本中是否存在這樣的內(nèi)在聯(lián)系及其內(nèi)在機(jī)制有待進(jìn)一步更深入的探討。是否可以通過(guò)檢測(cè)TEFM 的表達(dá)情況，為DLBCL 患者尋找新治療方案提供理論依據(jù)仍需進(jìn)一步研究。

綜上所述，Ki-67、Bcl-6、Bcl-2 在DLBCL 患者中高表達(dá)，TEFM 表達(dá)與Ki-67、Bcl-6、Bcl-2 在DLBCL 進(jìn)展的過(guò)程中可能具有協(xié)同作用，Ki-67、Bcl-6、Bcl-2 可作為DLBCL 預(yù)后不良的重要指標(biāo)，也可作為預(yù)測(cè)患者預(yù)后的有效指標(biāo)。DLBCL 的精準(zhǔn)治療依賴于分子標(biāo)志物的指導(dǎo)，隨著高通量技術(shù)的飛速發(fā)展，對(duì)于DLBCL 療效和預(yù)后分子標(biāo)志物的多項(xiàng)研究均取得了不錯(cuò)的成果。DLBCL 作為高度異質(zhì)性的惡性腫瘤，目前常規(guī)病理檢測(cè)往往不能為臨床治療提供足夠的信息，將傳統(tǒng)臨床病理因素與新型生物標(biāo)志物聯(lián)合起來(lái)，對(duì)于研究DLBCL 發(fā)生、發(fā)展中的分子機(jī)制及精準(zhǔn)靶向診療有重要意義。