薄層色譜技術在中藥檢驗中應用的研究進展＊

張曉丹，劉宏，鄒洪平，黃昊，鄧淑晶

（廣州白云山光華制藥股份有限公司，廣東 廣州 510285）

0 引言

薄層色譜法自《中華人民共和國藥典》（簡稱《中國藥典》）1985年版后的歷版藥典均有收載。《中國藥典》2020年版一部收載品種2 711個，其中超過50%的品種應用了薄層色譜鑒別方法，薄層色譜分析是各級藥品檢驗機構、藥品生產經營部門質檢人員檢驗中藥的強制性檢驗項目［1］。薄層色譜技術是一種經典的中藥分析技術，其受測試樣品種類限制很小，適用范圍廣［2-3］。多年來，薄層色譜技術在中藥上的應用開發研究趨于多元化，尤其在中藥成分的鑒別和定量分析方面，涌現出許多高質量的學術研究成果［4-5］。目前，對薄層色譜技術在中藥檢驗應用方面的研究主要集中在以下3個方面：一是對現有的中藥薄層色譜鑒別方法的優化，如改進樣品制備方法、優化展開劑和顯色劑等；二是建立新的中藥成分薄層色譜鑒別方法，例如建立藥典中未曾規定的中藥薄層色譜系統；三是聯合其他技術手段進行更全面的中藥檢驗分析。本文介紹、分析薄層色譜技術在中藥檢驗方面的應用研究情況，尤其是中藥定性鑒別和定量分析方面的研究進展，以期為相關學者提供研究方向和思路。

1 薄層色譜在中藥快速鑒別中的應用

隨著色譜技術的發展及檢驗質量的提高，目前《中國藥典》中的絕大部分中藥是利用薄層色譜法進行檢驗的，利用薄層色譜法可對一些強揮發性、無紫外線吸收的藥物組分進行定性及定量檢測，還可以對中藥進行分離和分析鑒定。薄層色譜技術可用于快速鑒別中藥材的產地及真偽，以及鑒別藥材中的非法添加。

不同產地的中藥材所含的化學成分存在微小差別，可用薄層色譜技術方便地鑒別出不同產地的中藥。巢穎欣等［6］應用薄層色譜技術反映廣陳皮藥材的鑒別信息，通過分析廣陳皮特有的2-甲氨基-苯甲酸甲酯斑點作為快速鑒別廣陳皮與其他產地陳皮的有效手段。

薄層色譜除了用于不同產地中藥的鑒別，也可用于偽中藥的鑒別。孔娟等［7］發現，在相同的色譜條件下，不同產地何首烏及其偽品的薄層色譜圖均有明顯差異，可憑此快速、高效地鑒別何首烏的真偽。

在中藥中非法添加色素一直是影響中藥發展的阻礙之一［8］，薄層色譜技術在中藥非法色素鑒別上也有很好的應用。李啟艷等［9］用薄層色譜法快速篩查中藥中的29種非法添加色素，發現各色素分離效果較好，可采用薄層色譜法解決中藥中多色素染色的問題。

2 優化現有中藥材薄層色譜方法

隨著薄層色譜法在中藥鑒別中的廣泛應用，一些原有的鑒別體系逐漸顯現出不足，如供試品制備過程復雜、展開劑與顯色劑對生態環境不友好、顯色特征性不強等。目前，中藥研究者的很多工作是圍繞優化現有中藥薄層色譜鑒別體系中的各項條件展開。

2.1 單方藥材鑒別條件優化

趙曉梅等［10］深入研究澤瀉藥材的物質基礎，構建多指標定性、定量評價系統，并選擇合適的指標，完善澤瀉藥材及飲片的質量標準，最終給《中國藥典》2020年版提供了澤瀉的來源、鑒別（薄層）、浸出物（鹽澤瀉）、含量測定等項目的修訂建議。荊曉燁等［11］研究發現，現行版的《中國藥典》中降香標準的薄層色譜鑒別仍使用三氯甲烷、甲苯、甲醇等有毒有害試劑，因此從綠色環保、生態友好的角度出發，研究運用天然低共熔溶劑提取樣品，利用改進的無毒或低毒的薄層展開系統對中藥降香進行薄層色譜鑒別，為降香綠色質量標準的制定提供了參考。

2.2 復方制劑多組分鑒別

一些中藥復方制劑通常含有多味藥材且各藥材組成比例懸殊，成分比單味藥復雜，一般采用多個薄層色譜鑒別項控制其質量。復方制劑的薄層定性鑒別一直是一件費時、費力的工作。馮文明等［12］建立了“一板多藥”薄層色譜鑒別方法，可同時對小柴胡顆粒中的柴胡、黃芩、甘草3味藥材進行鑒別，操作簡單、快速，專屬性強，完善了小柴胡顆粒的質量標準。

3 新建中藥材薄層色譜方法

中藥品類繁多，隨著人們對中藥研究的不斷深入，原有中藥材中被發現的新中藥成分也會越來越多，對應的鑒別方法也需要完善。對于一些現行藥典中還沒有質量控制體系的中藥材成分，也需要逐漸建立起科學可控的質量體系。

3.1 建立單味中藥材鑒別新方法

羅健菱等［13］發現苦皮藤藥材尚未有完善可行的質量控制體系，并且2020版《中國藥典》中也未收載其質量標準，故系統地建立苦皮藤薄層色譜鑒別項的各個條件，并確定最佳的薄層色譜條件。張穎等［14］建立薄層色譜法鑒別地黃及其炮制品，根據糖類成分在生地黃與熟地黃中的差異，對地黃不同的炮制品進行薄層鑒別方法研究，建立可區別生地黃、熟地黃的薄層色譜鑒別方法，為地黃飲片的質量評價提供參考。

3.2 建立復方中藥制劑鑒別新方法

復方中藥由多味中藥按照一定的比例混合而成，原則上復方中藥中的各味藥材均需建立各自的質量控制標準，一般每一味中藥都會有其特征鑒別項。研究者對中藥進行系統研究后發現，原有復方中藥鑒別項的不足，建立一套新的薄層色譜鑒別項，完善了復方藥劑的質量控制標準。魏艷蕓等［15］發現桂附地黃丸（濃縮丸）的質量標準相對滯后，鑒別項下僅對粉末入藥的牡丹皮、附子（制）、肉桂、山藥進行顯微鑒別，而浸膏入藥的主藥熟地黃無任何鑒別方法，因此對熟地黃進行研究，建立一套熟地黃的薄層色譜鑒別方法，可為桂附地黃丸（濃縮丸）的質量評價提供參考。

4 薄層色譜聯用技術應用

在中藥檢驗中只應用薄層色譜法存在一定的局限性（靈敏度不高），薄層色譜只適合快速進行一些簡單的定性分析。為更全面地檢驗分析中藥中的復雜化學成分，各類高效的現代化學分析檢測技術被引入中藥分析中，如薄層色譜與質譜、紅外、高效液相、拉曼、核磁共振等一種或多種檢測分析技術聯用。

4.1 薄層色譜與質譜聯用

質譜是一種基于測量離子質荷比（質量—電荷比）的分析方法，具備高特異性和高靈敏度的特點。薄層色譜與質譜的聯用形式主要可分為3類：一是接口儀器的間接聯用；二是質譜對薄層板的原位檢測；三是質譜對薄層分離過程的實時監測［16］。

郭依俐等［17］結合薄層板分離中藥成分快速、高效的特性和質譜分析成分的特異性，將薄層色譜和串聯質譜聯用，將粗葉懸鉤子的薄層板上的各成分斑點提取濃縮后逐個進入質譜進行分析，可便捷地得到斑點中化合物一級質譜和二級質譜的信息。

薄層色譜和質譜聯用技術作為一種新型分析技術，常用來定性或定量分析生物活性樣品或提取物中的未知化合物。張強等［18］探索質譜在中藥分析中的應用效果，一是實現了肉桂和川芎薄層色譜分析后層析板上化合物的原位快速鑒定，成功鑒定了川芎中的香豆素和桂皮醛，以及藁本內酯、蛇床內酯和洋川芎內酯A等成分；二是對肉桂藥材中的香豆素進行定量測定，得到香豆素的含量數據。

4.2 薄層色譜與高效液相色譜聯用

應用薄層色譜技術可以進行化合物的簡單分離，得到相對較純的組分，但由于分辨率不高，對于一些性質或結構類似的物質還不能完全分離。此時，需要借助更靈敏和精確的分離分析手段，高效液相色譜技術聯合薄層色譜技術可應用于此種情況的分析。陳培英等［19］對經過薄層色譜分離后的硅膠板上的幾個熒光點應用高效液相色譜進行分離和分析發現，每一個熒光點均又出現了2～3個色譜峰，表明每個熒光點中還包含有結構或性質相似的不同化合物。高效液相色譜除了用于高分辨定性分析有效成分，還有許多研究報道其應用于定量分析中藥中的有效成分。

4.3 薄層色譜與拉曼光譜聯用

拉曼光譜是一種靈敏性高、特異性好的無損分析方法。薄層色譜與拉曼光譜聯用將使薄層色譜的成分分離功能和拉曼光譜獲取特征信息的功能合二為一，能精密區分中藥中結構類似的化合物，并減少一些微量有效成分的丟失［20］。

顧曉玲［21］應用薄層色譜和拉曼光譜的聯用技術分析中草藥黃連中的有效成分（主要含有異喹啉類生物堿，如小檗堿、黃連堿、巴馬汀和藥根堿），發現聯用方法可以很好地區分異喹啉類生物堿中的4個目標分析物，尤其是通過拉曼強度比值（I708/I728）可以分析鑒別出一個斑點中的2個結構類似物（小檗堿和黃連堿），并且4個目標物具有很低的表面增強拉曼光譜檢測限，表明該方法靈敏度非常高。

5 結語

中藥材復雜成分的檢驗是中藥質量控制的關鍵內容。隨著我國中藥的發展與壯大，中藥質量研究的很多基礎工作需要基于中藥有效成分的檢驗展開。薄層色譜檢驗方法已經成為藥典規定的法定中藥檢驗方法，現有中藥材成分薄層色譜分析方法各項條件的優化和未知中藥薄層色譜方法的開發是一項基礎工作。同時，隨著中藥檢驗技術和現代化學分析方法的發展，多種檢測方法的高效聯用技術是未來中藥檢驗和應用研究的重要方向。建立科學且全面的中藥檢驗方法能為我國中藥的發展提供保障。