富馬酸依美斯汀緩釋膠囊制備工藝與體外釋放度研究

張洪模，吳小春，何勇，岳志偉，黃進，郭正義

（四川德峰藥業有限公司，四川 眉山 620000）

富馬酸依美斯汀化學名為1-（2-乙氧基乙基）-2-（4-甲基-1-高哌嗪基）苯并咪唑雙富馬酸鹽，屬第2 代組胺H1受體拮抗劑，由日本Kanebo-Kowa 公司聯合開發，于1993 年8 月在日本首先上市［1］。與同類藥物相比，富馬酸依美斯汀可選擇性地作用于H1受體，具有選擇性高、起效快、不良反應少等優點，臨床用于治療過敏性鼻炎和慢性蕁麻疹，劑型為口服緩釋膠囊（規格為1 mg 和2 mg）［2］，并收載于《日本藥典（18 版）》（JP18）［3］。根據原國家食品藥品監督管理局《關于開展仿制藥質量一致性評價工作的通知》（國食藥監注〔2013〕34 號）要求，對2007 年修訂的《藥品注冊管理辦法》實施前批準的基本藥物和臨床常用仿制藥，分期、分批進行質量一致性評價［4］，且公布了參比制劑［5］。目前，未見關于富馬酸依美斯汀緩釋膠囊的制備工藝報道，僅有富馬酸依美斯汀緩釋片的制備工藝報道［6］。微丸型緩釋膠囊較常規緩釋片外觀精美、載藥范圍寬、釋放穩定、局部刺激性小、生物利用度高，故應用廣泛［7-8］。為此，本研究中對富馬酸依美斯汀緩釋膠囊的制備工藝進行初步研究。現報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

DPL-Ⅱ型多功能包衣制粒機（重慶精工制藥機械有限責任公司）；LC-2030C 型液相色譜儀（日本島津公司）；708-DS 型溶出度儀（美國安捷倫公司）；XPE26型微量分析天平（美國梅特勒-托利多公司，精度為百萬分之一）。

1.2 試藥

富馬酸依美斯汀對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號為100888-200901，含量為99.9%）；富馬酸依美斯汀原料藥（四川德峰藥業有限公司，批號為210101，含量為100.0%）；蔗糖丸芯（美國卡樂康公司，批號為ST515676，粒徑為0.71～0.85 mm）；羥丙基纖維素（HPC，型號為LF，批號為192427），乙基纖維素（EC，型號為N10，批號為45380），均購自美國亞什蘭公司；硬脂酸鎂（遼寧澳達制藥有限公司，批號為20210203）；檸檬酸三乙酯（TEC，蚌埠豐原涂山制藥有限公司，批號為210701），3#明膠空心膠囊（蘇州膠囊有限公司，批號為12870573）；參比制劑（日本興和株式會社，批號為RE0R）；95%乙醇為食用級，乙腈為色譜純，水為自制純化水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 緩釋膠囊制備

載藥微丸：攪拌狀態下，將10 g 富馬酸依美斯汀原料藥緩慢加入930 g 純化水中，攪拌至完全溶解，再緩慢加入40 g HPC-LF，持續攪拌4 h，靜置過夜，完全溶脹，再加入硬脂酸鎂20 g，攪拌1 h，即得上藥層包衣液（噴液過程中持續攪拌）。取蔗糖丸芯（粒徑為0.71～0.85 mm）800 g，置多功能包衣制粒機料斗中，設置風量70 m3/h、霧化壓力0.2 MPa、物料溫度40 ℃、噴液速率3 g/min 進行噴液，觀察流化情況，隨時調整參數，使噴液量和干燥量保持動態平衡，噴霧結束后干燥2 min，收料，過篩，取18～30目微丸，即得載藥微丸。

緩釋膠囊：攪拌狀態下，將HPC-LF 20 g、EC-N10 100 g 緩慢加入870 g 95%乙醇中，持續攪拌2 h 至完全溶解，靜置過夜，完全溶脹，再加入TEC 10 g，攪拌1 h，即得緩釋層包衣液。取載藥微丸，置多功能包衣制粒機料斗中，設置風量80 m3/h、霧化壓力0.2 MPa、物料溫度35 ℃、噴液速率4 g/ min 進行噴液，觀察流化情況，隨時調整參數，使噴液量和干燥量保持動態平衡，噴霧結束后干燥1 min，收料，過篩，取18～30 目微丸，加入過篩后微丸質量0.1%的硬脂酸鎂，混勻，裝入3#明膠空心膠囊，即得富馬酸依美斯汀緩釋膠囊。

2.2 體外釋放度檢測

色譜條件［3］：色譜柱為Boston Phlex C18柱（150 mm ×4.6 mm，5 μm）；流動相為［0.39%磷酸二氫鈉-0.25%十二烷基硫酸鈉溶液（用磷酸調pH 至2.4）］-乙腈（50∶50，V/V）；流速為1 mL/min；檢測波長為280 nm；柱溫為40 ℃；進樣量為100 μL。

線性關系考察［9］480：取富馬酸依美斯汀對照品2.012 mg，精密稱定，加鹽酸（pH 1.2）溶解并定容，作用對照品貯備液（質量濃度10.06 μg/mL）；精密量取對照品貯備液適量，置合適容量瓶中，配制成質量濃度分別為0.100 6，0.201 2，0.503 0，1.006 0，2.515 0 μg/ mL的系列對照品溶液，按擬訂色譜條件進樣測定，以富馬酸依美斯汀質量濃度（X，μg/mL）為橫坐標、峰面積（Y）為縱坐標進行線性回歸，得回歸方程Y=128 906.5X-631.4（r=0.999 92，n=5）。結果表明，富馬酸依美斯汀質量濃度在0.100 6～2.515 0 μg/mL 范圍內與峰面積線性關系良好。

溶出度測定方法：取樣品，照2020 年版《中國藥典（四部）》0931 溶出度與釋放度測定法（槳法），以鹽酸（pH 1.2）900 mL 為溶劑，轉速為50 r/min，分別于0.5，1.0，1.5，4.0，6.0，12.0 h 時精密量取溶出液10 mL，并立即精密補加同溫度等體積的溶出介質，棄去初濾液，取續濾液，作為供試品溶液。精密量取對照品溶液（質量濃度2.012 0 μg/mL）和供試品溶液各100 μL，按擬訂色譜條件測定累積釋放度。JP18 要求0.5 h 釋放度為10%～40%、1.5 h 釋放度為35%～65%、6.0 h 釋放度超過75%［3］。

2.3 流化床底噴包衣主要工藝參數考察

風量：投料量是決定風量大小的重要因素。800 g蔗糖丸芯投料空白試驗結果顯示，載藥丸、緩釋丸風量分別為70 m3/h 和80 m3/h時，微丸在料斗內的流化狀態良好，有少部分微丸輕觸頂部篩網，碎丸量可忽略不計。

霧化壓力：霧化壓力的大小直接影響霧化液滴的大小。在噴液速率不變的情況下，霧化壓力過大會使包衣液形成極細小的液滴，未接觸到丸芯便已干燥，形成噴霧干燥現象，所形成細粉隨排風吹走，影響收率；霧化壓力過小會使進入流化床的包衣液無法形成大小合適且均勻的液滴，微丸表面的液滴不能及時干燥而引起粘連，或造成包衣膜分布不均勻。按2.1 項下緩釋膠囊制備方法，保持兩層的其他參數（風量、物料溫度、噴液速率）不變，分別設置兩層的霧化壓力為0.10，0.15，0.20，0.25，0.30 MPa，平行制備5 批緩釋丸，考察兩層的上藥率和收率。上藥率主要考察各層包衣過程中的含量損失，收率考察各層包衣過程中各種原因形成的細粉和粘連微丸的質量。上藥率（%）=本層微丸實測含量/本層微丸理論含量×100%，收率（%）=本層微丸過篩后實際質量/本層微丸理論質量×100%。圖1 A顯示，兩層的霧化壓力在0.20 MPa時，上藥率和收率均最高。

物料溫度：流化床包衣溫度的選擇主要與包衣材料的最低成膜溫度（MRT）有關，實際生產中，一般包衣溫度控制為高于最低成膜溫度10 ℃，同時包衣液溶劑及黏合劑的種類也影響物料溫度的選擇［10］。物料溫度過高，溶劑的揮發過快，易被噴霧干燥；物料溫度過低，溶劑揮發不及時，易造成微丸粘連，影響含藥微丸的含量均勻度，嚴重時會發生“塌床”現象，致使包衣終止，試驗驗失敗。按2.1 項下緩釋膠囊制備方法，保持兩層的其他參數（風量、霧化壓力、噴液速率）不變，分別設置載藥丸的物料溫度為30，35，40，45，50 ℃，緩釋丸的物料溫度為25，30，35，40，45 ℃，平行制備5 批緩釋丸，考察兩層的上藥率和收率。圖1 B 顯示，載藥丸的物料溫度為40 ℃、緩釋丸的物料溫度為35 ℃時，上藥率和收率均最佳。

圖1 流化床底噴包衣主要工藝參數考察Fig.1 Main process parameters of fluidized-bed bottom spray coating

噴液速率：相同霧化壓力下，噴液速率過小，包衣的時間過長，導致生產效率太低；噴液速率過大，微丸粘附藥液還沒完全干燥就進入下一個循環，易造成粘連，影響收率。按2.1項下緩釋膠囊制備方法，保持兩層的其他參數（風量、霧化壓力、物料溫度）不變，分別設置載藥丸的噴液速率為2.0，2.5，3.0，3.5，4.0 g/min，緩釋丸的噴液速率為3.0，3.5，4.0，4.5，5.0 g/min，平行制備5批緩釋丸，考察兩層的上藥率和收率。圖1 C顯示，載藥丸的噴液速率為3.0 g/ min、緩釋丸的噴液速率為4.0 g/min時，上藥率和收率均最佳。

2.4 緩釋層處方篩選

阻滯劑EC-N10 用量：保持緩釋層HPC-LF 和TEC 的用量不變，阻滯劑EC-N10用量分別為90，100，110 g，平行制備3批緩釋膠囊，測定累積釋放度（圖2 A）。結果表明，隨著阻滯劑用量的增加，各取樣點的累積釋放度呈下降趨，當EC-N10 用量為100 g 時累積釋放度適中，且符合JP18的要求。

致孔劑HPC-LF 用量：保持緩釋層EC-N10 和TEC 的用量不變，致孔劑HPC-LF 用量分別為16，20，24 g，平行制備3批緩釋膠囊，測定累積釋放度（圖2 B）。結果表明，隨著致孔劑用量的增加，各取樣點的累積釋放度呈上升趨勢，當HPC-LF 用量為20 g時，累積釋放度適中，且符合JP18的要求。

增塑劑TEC用量：TEC能顯著改善樹脂類包衣材料的玻璃化轉變溫度（Tg）和最低成膜溫度，提高衣膜的柔韌性和完整性，且能有效控制藥物釋放［10］。保持緩釋層EC-N10 和HPC-LF 的用量不變，增塑劑TEC 用量分別為8，10，12 g，平行制備3 批緩釋膠囊，測定累積釋放度（圖2 C）。結果表明，隨著增塑劑用量的增加，各取樣點的累積釋放度呈上升趨勢，與文獻［11］的結論一致，當TEC 用量為10 g時，累積釋放度適中，且符合JP18的要求。

2.5 緩釋層不同包衣增重

體外釋放度是口服緩釋制劑處方工藝篩選的重要指標，要求仿制藥的溶出度與參比制劑一致，在整體溶出曲線相似及各采樣時間點溶出度相似時，可認為兩者溶出行為相似。一般采用非依賴模型的相似因子（f2）為衡量2 條溶出曲線相似度的參數，最適合于3～4 個或更多取樣點的溶出曲線比較，計算公式［12］如下。

f2值越接近100，則認為2 條曲線相似。一般情況下，f2值高于50，可認為2 條曲線具有相似性，即仿制藥與參比制劑具有等效性。

分別制備緩釋層包衣增重12.0%，13.5%，15.0%的緩釋膠囊，依法測定體外累積釋放度，并與參比制劑的體外累積釋放度進行比較。結果表明，隨著緩釋層包衣增重的增加，藥物體外累積釋放度逐漸降低，緩釋層包衣增重為12.0%～15.0%時，自制緩釋膠囊與參比制劑比較，體外釋放曲線f2為69.9～89.6，其中緩釋層包衣增重為13.5%時體外累積釋放度與參比制劑基本一致，f2為89.6，符合JP18的要求。詳見表1。

A.EC-N10用量 B.HPC-LF用量 C.TEC用量圖2 緩釋層處方篩選A.Dosage of EC-N10 B.Dosage of HPC-LF C.Dosage of TECFig.2 Screening of prescription of sustained-release coating

表1 不同緩釋層包衣增重對體外累積釋放度的影響（n=6）Tab.1 Effect of sustained-release coating with different weight gain on the in vitro cumulative release rate（n=6）

2.6 加速試驗考察

取2.5 項下所得3 批富馬酸依美斯汀緩釋膠囊，按2020年版《中國藥典（四部）》9001 原料藥物與制劑穩定性試驗指導原則［9］457，在（40±2）℃、相對濕度（75±5）%條件下加速6個月。結果表明，3批自制富馬酸依美斯汀緩釋膠囊經加速試驗6 個月，累積釋放度波動較小，分別與0 個月的數據進行t檢驗，P值為0.160～0.911，無顯著變化，表明該處方及工藝可行。詳見表2。

表2 加速試驗考察結果（n=6）Tab.2 Results of the accelerated test（n=6）

3 討論

3.1 HPC 和EC 型號選擇

預試驗中，不同型號和濃度的HPC 和EC 可得不同黏度的包衣液，不僅影響生產效率，還會影響上藥率和收率，參比制劑藥品說明書中未明確型號。通過預試驗對HPC 和EC 的型號、濃度進行了篩選，最終確定HPC的型號為LF，質量濃度載藥層為4%，緩釋層為2%；EC的型號為N10，質量濃度為10%。

3.2 抗黏劑選擇

據報道，載藥層和緩釋層的包衣液中均加入一定量滑石粉、硬脂酸鎂等作為富馬酸依美斯汀緩釋膠囊的抗黏劑。與羥丙甲纖維素（HPMC）相比，致孔劑HPC-LF疏水性更強，載藥層噴液過程中靜電聚集較嚴重，嚴重影響含量的均勻性。預試驗中加入的硬脂酸鎂與HPC-LF比例為1∶2，可有效消除靜電聚集，但硬脂酸鎂不溶于水，載藥層包衣液為混懸液，故噴液過程中需持續攪拌以防止分層。緩釋層噴液過程無明顯靜電聚集，故未加入抗黏劑；但收得緩釋丸在充填過程中可能有靜電聚集影響充填裝量，故在充填前混入緩釋丸質量0.1%的硬脂酸鎂以消除靜電，并能達到良好的充填裝量，確保釋放度不受充填過程中的靜電影響。

3.3 方法評價

本研究中所制備的富馬酸依美斯汀緩釋膠囊與參比制劑的體外釋放曲線相似，可為富馬酸依美斯汀緩釋膠囊的質量一致性評價提供參考，但還需進一步進行商業批工藝驗證及體內生物等效性研究。