磺胺嘧啶鋅軟膏質量評價

盧玉鳳?李潔?李少杰?李茜?梅芊?林紅軍?劉英

摘要：目的 對磺胺嘧啶鋅軟膏的質量現狀進行綜合評價。方法 基于質量源于設計（quality by design， QbD）理念，建立HPLC法測定磺胺嘧啶鋅軟膏的含量、有關物質與抑菌劑含量，并開展水活度、抑菌效力、酸堿度、體外釋放等相關探索性研究項目。采用法定標準檢驗與探索性研究相結合，對國家藥品抽檢的29批次樣品與調研企業收集的樣品進行檢驗，并對測定結果統計分析與匯總，進而科學公正地評價其質量。結果 法定標準檢驗結果顯示，29批次磺胺嘧啶鋅軟膏的合格率為100%。探索性研究提示磺胺嘧啶鋅軟膏的處方仍有進一步優化的空間，可通過優化處方設計提高釋放率和降低黏稠度，并選擇合適的抑菌劑種類，增強對真菌的抑菌效力等改善產品療效。同時，提示原料質量與軟膏生產過程控制對軟膏質量起著不容忽視的作用。現行標準中鑒別項有待優化，含量測定方法為永停滴定法，受基質干擾，新建專屬性更強的HPLC法。結論 目前磺胺嘧啶鋅軟膏整體質量一般，軟膏和原料質量標準有待提高，建議企業優化處方設計，同時關注原料質量與軟膏生產過程控制，從而全面提高產品質量。

關鍵詞：磺胺嘧啶鋅軟膏；質量分析；質量源于設計；抑菌劑；包材

中圖分類號：R917，R978.1文獻標志碼：A

Quality evaluation of sulfadiazine zinc ointment

Lu Yufeng， Li Jie， Li Shaojie， Li Qian， Mei Qian， Lin Hongjun， and Liu Ying

（Henan Institute For Drug and Medical Device Inspection， Henan Chemical Quality Evaluation and Control Engineering Technology Research Center， Zhengzhou 450018）

Abstract Objective This study aimed to comprehensive evaluate the quality status of sulfadiazine zinc ointment. Methods? ? Based on the concept of quality by design （QbD）， HPLC method for determining the content， related substances and bacteriostatic agents of sulfadiazine zinc ointment was established， and exploratory research projects related to water activity， bacteriostatic efficacy， pH value， in vitro release， etc. were carried out. According to the combination of general requirements of the national assessment program and exploratory research， the 29 batches of sulfadiazine zinc ointment from the national drug sampling and samples collected by research enterprises were tested， and the measurement results were analyzed and summarized in order to evaluate their quality scientifically and fairly. Results? ? The legal test results showed that the qualified rate of these 29 batches of sulfadiazine zinc ointment was 100%. But exploratory research showed that the prescription of sulfadiazine zinc ointment could be further optimizated. The therapeutic effect can be improved by optimizing the prescription design to reduce the viscosity and improve the release rate and selecting the appropriate type of bacteriostatic agent to enhance the antibacterial effect of fungi. At the same time， raw material quality and production process control play an important role in the quality of ointment. The identification items in the current standard need to be optimized. The content determination method is the permanent titration method. Due to matrix interference， a new HPLC method with stronger specificity has been established. Conclusion? ? The overall quality of sulfadiazine zinc ointment at present is only common. The current quality standards of the ointment and raw materials need to be improved. It is suggested that enterprises optimize prescription design， pay attention to the quality of raw materials and control the ointment production process， so as to comprehensively improve product quality.

Key words Sulfadiazine zinc ointment; Quality analysis; Quality by design; Bacteriostatic agent; Packaging material

磺胺嘧啶鋅軟膏為局部外用磺胺類抗生素，具有磺胺嘧啶和鋅兩者的作用，對多數革蘭陽性菌、革蘭陰性菌和酵母菌等有良好的抗菌作用，并且不為氨基苯甲酸所拮抗，其中鋅因能破壞細菌的DNA結構，亦具有抑菌作用。同時，本品可補充燒傷患者體內鋅損失，增強機體抵抗干擾和創面愈合能力。臨床適用于預防及治療Ⅱ、Ⅲ度燒傷繼發創面感染[1-2]。

1975年，美國Fox公司合成磺胺嘧啶鋅[3]。1981年，河南師范大學化學系研發磺胺嘧啶鋅原料及軟膏（內部資料）。1989年，磺胺嘧啶鋅軟膏投產并用于臨床[4]。目前，國外無該品種原料與軟膏上市，國內共有磺胺嘧啶鋅軟膏生產企業3家，批準文號3個，但在產企業僅1家。2022年國家藥品抽檢從14個省（直轄市、自治區）抽取到29批次磺胺嘧啶鋅軟膏，涉及1家生產企業，1個批準文號，全面覆蓋在產企業。本文按《中國藥典》2015年版（以下簡稱ChP2015）年版[5]

或2020年版（以下簡稱ChP2020）[6]二部磺胺嘧啶鋅軟膏質量標準進行檢驗，并結合探索性研究結果對其質量現狀進行客觀評價，為助力企業全面提高產品質量與完善質量標準提供數據支持。因本品國外無原研藥，選擇同類型、同療效的美國輝瑞磺胺嘧啶銀乳膏為對照樣品。

1 儀器與試藥

1.1 儀器與試劑

Waters e2695高效液相色譜儀（美國Waters公司）；Dionex Ultimate 3000雙三元液相色譜儀（美國Dionex公司）；Thermo QE plus離子軌道阱高分辨質譜儀（美國Thermo Fisher公司）；ZYT-1型自動永停滴定儀（上海安亭科學儀器廠）；ZHR-2型錐入度測定儀（天津天大天發科技有限公司）；Aqualab-4TE 型水分活度儀（美國decagon公司）；Olympus BX51光學顯微鏡（日本Olympus公司）；Malvern Mastersizer 2000激光粒度測定儀和Hydro 2000MU（A）濕法進樣器（英國Malvern公司）；TK-12D型透皮儀（上海鍇凱科技貿易有限公司）；W3/230型水蒸氣透過率測試系統（濟南蘭光機電技術有限公司）；OX2/230型氧氣透過率測試系統 （濟南蘭光機電技術有限公司）；BRUKER MPA型傅立葉變換近紅外光譜儀（德國Bruker公司）；XRD-7000型X-射線衍射儀（日本Shimadzu公司）；IRPrestige-21型傅立葉變換紅外分光光度計（日本Shimadzu公司）等儀器。

乙腈為色譜純，購自美國Sigma公司，超純水由Millipore純水儀制備，其余試劑均為分析純。

1.2 試藥

標準物質：磺胺嘧啶（批號100026-201404，99.7%）、羥苯甲酯（批號100278-201906，99.9%）、羥苯乙酯（批號100847-202105，100.0%）、羥苯丙酯（批號100444-202005，99.9%）磺胺（批號100024-201103，99.8%）、磺胺脒（批號100412-201302，92.0%）均購自中國食品藥品檢定研究院；對羥基苯甲酸（批號LRAC5151，100.0%）購自Sigma-Aldrich公司；N-乙酰磺胺嘧啶（批號2-JGC-61-2，97%）購自Toronto Research Chemicals公司；水活度標準溶液：0.500aw（批號21161034）、0.760aw（批號21720818）、0.920aw（批號21645394）、0.984aw（批號21643391）、1.000aw（批號20964482），均購自美國Meter Group公司。

試驗菌種：金黃色葡萄球菌[CMCC（B） 26003]、銅綠假單胞菌[CMCC（B） 10104]、白色念珠菌[CMCC（F） 98001]、黑曲霉[CMCC（F） 98003]，均購自中國食品藥品檢定研究院。

樣品：2022年磺胺嘧啶鋅軟膏國家藥品抽檢樣品（以下簡稱國抽樣品）29批次，涉及A企業。調研收集A企業的輔料（空白基質和羥苯乙酯）、1批次聚乙烯/鋁/聚乙烯復合藥用軟膏管、3批次磺胺嘧啶鋅原料與3批次磺胺嘧啶鋅軟膏。1批次國外對照樣品：磺胺嘧啶銀乳膏（批號EL2544，規格1%），購自美國輝瑞公司。1批次近紅外建模驗證樣品：克霉唑乳膏（批號170901，規格1%），購自B企業。

2 試驗方法

2.1 法定標準檢驗

按ChP2015或ChP2020二部磺胺嘧啶鋅軟膏質量標準進行檢驗，主要項目包括性狀、鑒別、粒度、無菌、裝量和含量測定。

2.2 探索性研究

根據質量源于設計（quality by design， QbD）的理念[7]，針對本品為多劑量外用無菌軟膏的特點，基于藥品全生命周期質量控制，圍繞產品安全性、有效性、穩定性與質量可控性開展以下探索性研究。

2.2.1 安全性

磺胺嘧啶鋅軟膏為多劑量無菌外用軟膏，開啟后易受微生物污染，而微生物生長與水活度密切相關，考察水活度；處方中添加抑菌劑為羥苯乙酯，考察抑菌劑含量的同時，以抑菌效力為指標考察抑菌劑的種類是否合適；外用軟膏對皮膚的刺激性與酸堿度相關；本品基質復雜，原料及軟膏現行質量標準缺失有關物質，考察有關物質，同時進行雜質譜分析，查清雜質來源及產生原因，分析雜質結構有無遺傳毒性警示結構，從源頭控制雜質。結合水活度、抑菌劑含量、抑菌效力、酸堿度、有關物質及雜質譜分析測定結果與分析，對處方設計的合理性進行評價。

（1）水活度 采用Aqualab-4TE型水分活度儀，測定條件：25 ℃。樣品前測定，首先取水活度的標準溶液0.500、0.760、0.920、0.984和1.000 aw對儀器的準確性進行驗證，每個標準溶液的水活度讀數均需要在標準值的±0.003 aw范圍。然后測定29批次國抽樣品水活度，每批平行測定3次，取平均值。

（2）抑菌劑含量 建立HPLC法同時測定羥苯甲酯、羥苯乙酯和羥苯丙酯3種常用尼泊金酯類抑菌劑含量。采用Kromasil 100-5 C18色譜柱（5 μm，4.6 mm×250 mm）；流動相A為冰乙酸-水（1：87），流動相B為乙腈，梯度洗脫，見表1；流速1.0 mL/min；柱溫30 ℃；進樣量20 μL；檢測波長260 nm。

（3）抑菌效力 參考ChP2020四部通則1121抑菌效力檢查法[8]，以2種細菌：金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌，2種真菌：白念珠菌、黑曲霉作為試驗菌種，分別設置2、7、14和28 d這4個時間點進行試驗。選取有代表性的5批次國抽樣品和對照樣品進行抑菌效力研究，并對處方量的抑菌劑羥苯乙酯和羥苯甲酯的抑菌效力進行比較。

（4）酸堿度 取樣品，采用pH計直接測定其pH值。

（5）有關物質 參考USP現行版磺胺嘧啶含量測定色譜條件[9]及相關文獻[10]，建立HPLC法同時測定磺胺嘧啶鋅軟膏及原料有關物質。采用Kromasil 100-5 C18色譜柱（5 μm，4.6 mm×250 mm）；流動相A為冰乙酸-水（1：87， V/V），流動相B為乙腈，梯度洗脫，見表2；流速1.0 mL/min；柱溫35 ℃；進樣量20 μL；檢測波長260 nm。

（6）雜質譜分析 結合磺胺嘧啶鋅原料的合成路線、降解途徑、磺胺嘧啶鋅軟膏的生產工藝對雜質譜進行分析；對比磺胺嘧啶鋅軟膏、原料、原料的起始物料磺胺嘧啶、輔料羥苯乙酯及空白基質色譜圖，分析雜質來源；采用雙三元二維液相色譜—Q Exactive Plus高分辨質譜對軟膏和原料中檢出的雜質進行確證與結構推斷。

2.2.2 有效性

磺胺嘧啶鋅軟膏標準檢驗發現29批次國抽樣品中，5批次有團聚物，為考察團聚物是否影響藥效，分析團聚物成分；本品為混懸型軟膏，原料的晶型和粒度會影響其在基質內的分布狀態和藥效發揮，考察原料晶型與粒度分布；根據原料晶型與粒度分布測定結果，結合軟膏生產工藝分析團聚物形成原因；同時為考察藥物釋放程度，進行體外釋放試驗；軟膏的黏稠度影響涂布延展性，間接影響療效，考察錐入度。

（1）團聚物成分分析 分別取有團聚物的樣品與無團聚物樣品進行比較，目視團聚物為白色點狀物，見圖1。采用顯微鏡法、HPLC法對團聚物成分進行分析。

（2）原料粒度分布 采用顯微鏡法測定原料粒度，光散射法（激光粒度儀）測定原料粒度分布。

（3）原料晶型 分別采用紅外分光光度法（IR）與粉末X-射線衍射法（PXRD）測定原料紅外光譜圖與X-射線衍射圖，分析其晶型。

（4）團聚物形成原因 根據原料晶型與粒度分布測定結果，同時模擬軟膏生產工藝，考察原料在軟膏水相（甘油和水混合）中分散情況，并結合企業調研情況分析團聚物形成原因。

（5）體外釋放試驗 從29批次國抽樣品中選取不同剩余有效期，且有代表性的14批次樣品與1批次對照樣品，采用Franz擴散池法，體外釋放試驗條件：擴散池為帶有標準開帽式毛玻璃樣表面的擴散池系統，注入孔直徑為15 mm；人工膜為MCE膜（直徑25 mm，0.45 ?m），膜面積1.77 cm2；接受液介質為0.1 mol/L鹽酸溶液；接收液介質溫度為32 ℃；接收液介質體積為7 mL；攪拌速率為250 r/min。分別在0.5、1、2、4、5和6 h取出全部接收液，采用新建磺胺嘧啶鋅軟膏含量測定HPLC方法測定接收液中磺胺嘧啶含量，并分別換算為磺胺嘧啶鋅或磺胺嘧啶銀含量，每批樣品測定3次，取平均值計算不同取樣時間藥物累積釋放量，考察磺胺嘧啶鋅軟膏批間釋放差異，重點關注團聚物是否影響磺胺嘧啶鋅釋放，比較磺胺嘧啶鋅軟膏與對照樣品釋放差異，并分析導致釋放差異的因素。

（6）錐入度 采用ChP2020年版四部通則0983錐入度測定法[11]，取樣品適量小心裝滿樣品杯，采用震動法除去可能混入的氣泡，在（25±0.5） ℃環境下放置24 h后，用Ⅲ號椎體進行測定，每批次樣品平行測定3份，取平均值，并根據計算公式換算為Ⅰ號椎體錐入度推測值。

2.2.3 穩定性

磺胺嘧啶鋅軟膏為油/水兩相的熱力學不穩定體系，基于藥品全生命周期質量控制，根據ChP2020四部9001原料藥物與軟膏穩定性試驗指導原則[12]，進行影響因素試驗和3個月加速試驗，考察其穩定性。同時本品有效期3年，包材為聚乙烯/鋁/聚乙烯復合藥用軟膏管，處方中水分占比52%，貯藏期間，水分揮發影響產品穩定性和質量，考察包材阻隔性。

（1）影響因素試驗 取國抽樣品與調研收集樣品各1批次，除去外包裝，分別在高溫（40 ℃）、高濕（飽和硝酸鉀溶液，相對濕度92.5%，25 ℃）與光照（4500±500） Lx下放置相應天數，考察高溫、高濕與強光照射條件對樣品的性狀、粒度、酸堿度、水活度、有關物質、羥苯乙酯和磺胺嘧啶鋅含量等指標的影響。

（2）加速試驗 取調研收集樣品1批次，除去外包裝，在溫度30 ℃、相對濕度65%條件下放置3個月，分別在0、1、2、3月4個時間點取樣，以樣品的性狀、粒度、酸堿度、水活度有關物質、錐入度、羥苯乙酯和磺胺嘧啶鋅含量與含量均勻性為指標，考察樣品穩定性，為其處方設計、工藝改進、質量研究、包裝改進、運輸和貯存提供必要資料。

（3）包材阻隔性 參考國家藥包材標準（2015）YBB00252005-2015聚乙烯/鋁/聚乙烯復合藥用軟膏管[13]，采用GB/T31355-2014 包裝件和容器水蒸氣透過性測試方法紅外傳感器法[14]測定軟膏管水蒸氣透過率；采用GB/T31354-2014 包裝件和容器氧氣透過性測試方法庫侖計檢測法[15]測定軟膏管氧氣透過率；采用《中國藥典》2020年版四部通則4010水蒸氣透過量測定法第一法重量法2減重法[16]測定軟膏管水蒸氣透過量；對調研收集1批次包材的阻隔性能進行考察。

2.2.4 質量可控性

從軟膏和原料質量標準，以及近紅外建模3方面進行研究。目前，國外藥典均未收載該品種原料和制劑。

（1）軟膏質量標準

①鑒別 現行標準鑒別試驗樣品前處理產生的沉淀量少，無法按標準規定的沉淀取樣量進行化學鑒別試驗，通過優化樣品前處理方式進行修訂。

②含量測定 現行標準為永停滴定法，因基質易黏附于鉑片電極，使電極靈敏度降低，試驗中需經常清洗電極。同時空白基質消耗滴定液，干擾測定。參考USP現行版磺胺嘧啶含量測定方法[9]和相關文獻[17]，建立專屬性強的HPLC法，并進行方法學驗證，色譜條件見“2.2.1（2）”項下。

（2）原料質量標準

①有關物質 現行標準缺失與安全性相關的有關物質，建立專屬性強、靈敏度高的HPLC法，色譜條件見“2.2.1（5）”項下。測定調研收集3批次原料有關物質，有效控制雜質量。

②鋅含量 現行標準缺失與有效性相關的鋅含量測定，磺胺嘧啶鋅中鋅作為主藥的組成部分，對藥物的療效起著至關重要的作用，燒傷患者體內會大量喪失鋅，磺胺嘧啶鋅可補償鋅損失[18]，從而增強機體抵抗感染能力，使其具有控制感染與促進愈合的雙重功能。參照《中國藥典》2000年版（ChP2000）二部磺胺嘧啶鋅含量測定“鋅”項下方法[19]，建立絡合滴定法測定原料中鋅含量，該法與上述ChP2000中測定方法一致，但滴定度不同，該法滴定度為每1 mL乙二胺四醋酸二鈉定液（0.05 mol/L）相當于3.27 mg的鋅，計算鋅含量。

（3）近紅外建模 采用MPA型傅立葉變換近紅外光譜儀，積分球模式，將樣品置入近紅外專用22 mm玻璃管采集NIR光譜。

①近紅外一致性檢驗模型 采集29批次國抽樣品和3批次調研收集樣品共192張原始光譜，采用一階導數+矢量歸一化進行預處理，平滑點：13個，譜段為9087.6～7760.7 cm-1、6356.7～4165.8 cm-1。參考光譜數量不少于20張，CI（一致性指數）限度設置為5，建立一致性檢驗模型。同時采集1批次調研收集樣品、1批次對照樣品和1批次克霉唑乳膏對所建一致性檢驗模型進行驗證。

②近紅外定量模型 取全部29批次國抽樣品建立定量模型，使用OPUS軟件進行自動優化并結合手動修改得到譜段范圍及預處理方法。再用所建模型對29批次國抽樣品進行測定，對預測結果與所建HPLC法樣品含量測定結果進行比較，并采用交叉驗證方法來判斷模型的準確度和穩健性，計算得到R2、RMSECV、最小偏差和最大偏差。

3 結果與討論

3.1 法定標準檢驗

按法定標準檢驗，29批次國家藥品抽檢樣品均符合規定，合格率100%。對與產品質量密切相關的主要檢驗項目如粒度、裝量和含量測定結果進行統計分析。

3.1.1 粒度

29批次國抽樣品粒度測定結果為均小于180 ?m。

3.1.2 裝量

29批次國抽樣品裝量批內5支RSD為0.25%～4.64%，其中標示裝量為15與20 g的樣品各有2批次裝量批內5支RSD大于3.0%，表明A企業需關注樣品灌裝工藝穩定性，見圖2。

3.1.3 含量測定

29批次國抽樣品含量結果為4.98%～5.39%，均值為5.26%，（標準規定：含量應為4.50%～5.50%），均無低限投料情況，含量測定箱式圖表明從2020年至2022年，樣品含量有逐年提高的趨勢，見圖3。

3.2 探索性研究

3.2.1 安全性

（1）水活度 采用“2.2.1（1）”方法測定29批次國抽樣品水活度，測定結果為0.9581～0.9632 ，平均值為0.961，RSD為0.2%，表明磺胺嘧啶鋅軟膏水活度適宜大部分微生物生長，需加合適的抑菌劑阻止自身及環境微生物的生長繁殖。

（2）抑菌劑含量 采用“2.2.1（2）”方法測定29批次國抽樣品和3批次調研收集樣品中抑菌劑含量。新建HPLC方法經方法學驗證可準確測定軟膏中抑菌劑含量，測定結果為：32批次均未檢出羥苯甲酯和羥苯丙酯，表明A企業未添加處方外的抑菌劑羥苯甲酯和羥苯丙酯；32批次羥苯乙酯含量為95.4%～131.8%，平均值為102.9%，RSD為11.3%，頻數分布圖顯示其含量呈左偏分布，表明其含量多數小于100%，見圖4 ；29批次國抽樣品羥苯乙酯含量箱式圖顯示有5批羥苯乙酯含量在124%～131%之間，超過擬定限度80%～120%上限，合格率為82.8%，提示A企業應關注羥苯乙酯投料量準確性，見圖5；由SPSS 25.0軟件進行相關性分析，Sig.雙尾為0.266>0.05，表明羥苯乙酯含量與樣品剩余有效期不相關，表明貯存期間羥苯乙酯較穩定，不易降解；參考歐盟委員會第1004/2014號委員會條例[20]化妝品中羥苯酯類抑菌劑單酯限量為0.4%，建議A企業關注羥苯乙酯添加量的合理性。

（3）抑菌效力 采用“2.2.1（3）”方法測定有代表性的5批次國抽樣品和1批次對照樣品抑菌效力。結果參照ChP2020四部通則1121抑菌效力檢查法[8]，5批次國抽樣品抑菌效力對細菌達到A級標準，對真菌未達到B級標準，所用抑菌劑0.5%羥苯乙酯的抑菌效力對細菌僅達到B級標準，對真菌未達到B級標準，表明羥苯乙酯未與磺胺嘧啶鋅起到協同抑制作用。然而對照樣品對細菌和真菌抑菌效力均達到A級標準，其所用抑菌劑為0.3%羥苯甲酯，按磺胺嘧啶鋅軟膏處方和生產工藝，取磺胺嘧啶鋅原料、空白基質與0.3%羥苯甲酯制成混合物，其抑菌效力對細菌達到A級標準，對真菌達到B級標準。提示A企業應關注抑菌劑種類，并根據ChP2020四部通則1121，軟膏中抑菌劑的量應為最低有效量的原則，對抑菌效力做進一步研究，選擇對真菌抑菌效力強的抑菌劑。

（4）酸堿度 采用“2.2.1（4）”方法測定29批次國抽樣品和3批次調研收集樣品pH值，結果為32批次樣品pH值為6.5～6.9，均值6.7，RSD為1.5%，酸堿度接近中性，對皮膚刺激性較小，表明磺胺嘧啶鋅軟膏酸堿度適宜；同時此中性條件下，處方中的抑菌劑羥苯乙酯不易降解，有利于樣品貯藏期間羥苯乙酯穩定；參考USP現行版磺胺嘧啶銀乳膏[21]，擬定磺胺嘧啶鋅軟膏pH值限度為4.0～7.0，29批次國抽樣品pH值均在擬定限度范圍內，合格率100.0%。

（5）有關物質 采用“2.2.1（5）”方法測定29批次國抽樣品、3批次調研收集樣品及3批次原料有關物質。結果磺胺嘧啶鋅軟膏共檢出10個雜質，單雜含量小于0.08%，總雜含量小于0.3%；原料檢出7個雜質，單雜含量小于0.04%，總雜含量小于0.2%；磺胺嘧啶鋅軟膏和原料中雜質含量均較低。

（6）雜質譜分析

①雜質來源分析 通過對比磺胺嘧啶鋅軟膏、原料、原料起始物料磺胺嘧啶、輔料羥苯乙酯、空白基質色譜圖，見圖6，分析磺胺嘧啶鋅軟膏中檢出的10個雜質來源，其中7個雜質，即雜質1、雜質4～9與磺胺嘧啶鋅原料及原料起始物料磺胺嘧啶雜質種類相同；2個雜質，即雜質2和雜質10與輔料羥苯乙酯雜質種類相同。

取處方量的羥苯乙酯與甘油充分混勻后按軟膏生產工藝加熱，比較輔料羥苯乙酯、甘油、羥苯乙酯和甘油混合溶液加熱前與加熱后色譜圖，見圖7 ，結果羥苯乙酯與甘油混合后經加熱產生雜質3，同時雜質2和雜質10加熱后峰面積較加熱前略有增大。

通過對比色譜圖，分析雜質來源，并對雜質進行歸屬，見表3，軟膏中7個雜質來源于原料，有必要嚴格控制原料中雜質；總雜含量軟膏比原料高0.1%，分析為軟膏比原料多檢出雜質2、雜質3和雜質10，表明在軟膏生產過程中產生此3個雜質，有必要加強軟膏生產過程控制，減少雜質產生。

②雜質確證與結構推斷? 查閱文獻資料[22-24]，并結合磺胺嘧啶鋅原料的合成路線、降解途徑、磺胺嘧啶鋅軟膏的軟膏生產工藝及雜質來源分析；采用雙三元二維液相色譜—Q Exactive Plus高分辨質譜對檢出的10個雜質進行確證與結構推斷，確證雜質1為磺胺，雜質2為對羥基苯甲酸，雜質4為N-乙酰磺胺嘧啶；推斷雜質3為羥苯乙酯和甘油混合加熱后反應產生的對羥基苯甲酸單甘油酯，同時推斷雜質5～10結構，結構式見圖8，經查閱相關文獻[25-27]，與常見的遺傳毒性警示結構進行比較，本品中檢出10種雜質均不含遺傳毒性警示結構。

3.2.2 有效性

（1）團聚物成分分析 分別挑取同1批次國抽樣品中團聚物和無團聚物部分涂布于載玻片上，覆以蓋玻片，立即在400倍顯微鏡下檢視，見圖9。結果團聚物中布滿磺胺嘧啶鋅晶體，結合企業調研情況，初步認為團聚物為磺胺嘧啶鋅。另采用新建的軟膏含量測定HPLC方法，分別取相同稱樣量的團聚物和無團聚物制備成溶液，比較兩種溶液色譜圖中磺胺嘧啶峰面積，結果團聚物中磺胺嘧啶峰面積大于無團聚物部分，進一步證明團聚物為磺胺嘧啶鋅。

（2）原料粒度分布 采用光散射法測定原料粒度分布，激光粒度儀測定3批次調研收集原料，d（0.9）為28～37 ?m，利于藥物吸收；D[3，2]1批為11 ?m，2批為7 ?m，表明原料批次間粒徑有差異。采用顯微鏡法觀察該3批次原料粒度，結果3批次中，1批次粒徑大的原料粒子分布均勻，2批次粒徑小的原料粒子有團聚現象，見圖10，提示企業關注原料粒徑。

（3）原料晶型 采用紅外光譜法測定3批次調研收集原料紅外光譜圖均與磺胺嘧啶鋅對照圖譜（光譜集573圖）[28]一致，表明為同一晶型。采用粉末X-射線衍射（PXRD）法測定該3批次原料，結果原料衍射峰均為銳峰，表明為結晶型粉末；衍射峰數量和位置均一致，表明為同一晶型。但3批次原料衍射峰強度有差異，其中1批次粒徑大的原料衍射峰強度高，2批次粒徑小的原料衍射峰強度低，表明原料批次間有差異。

（4）團聚物形成原因 根據原料粒度分布與晶型測定結果，結合企業調研和軟膏生產工藝，分析軟膏中團聚物形成原因為粒徑小的原料投入水相溶解罐后不易分散，打入乳化罐又未充分攪勻，被基質包裹形成團聚物。提示企業關注原料粒徑和軟膏生產過程控制。目前，企業已通過改善軟膏生產過程控制，避免軟膏中團聚現象發生。

（5）體外釋放試驗 采用“2.2.2（5）”中方法對有代表性的14批次國抽樣品和1批次對照樣品進行體外釋放試驗，并以取樣時間為橫坐標，單位面積藥物累積釋放百分率為縱坐標繪制釋放曲線，見圖11，結果為6 h累積釋放百分率：有團聚物5批次為2.26%/cm2～3.34%/cm2，無團聚物9批次為3.62%/cm2 ～5.62%/cm2，表明團聚物對藥物釋放有影響，提示企業關注軟膏生產過程控制。對照樣品6 h累積釋放百分率為14.17%/cm2，高于磺胺嘧啶鋅軟膏，提示企業優化處方設計，提高釋放率，改善有效性。

（6）錐入度 采用“2.2.2（6）”中方法測定29批次國抽樣品、3批次調研收集樣品及1批次對照樣品錐入度，結果32批次樣品錐入度值為178～212，對照樣品為351，表明磺胺嘧啶鋅軟膏黏稠度高于對照樣品，涂布延展性較差，提示企業優化處方設計，降低產品黏稠度。

3.2.3 穩定性

（1）影響因素試驗 在高溫、高濕及強光照射條件下，軟膏的性狀無變化，未發現油水分離現象，其粒度、酸堿度、水活度、有關物質、羥苯乙酯和磺胺嘧啶鋅含量均無顯著變化。

（2）加速試驗 在溫度30 ℃、相對濕度65%條件下放置3個月，軟膏的性狀無變化，未發現油水分離現象，其粒度、酸堿度、水活度、有關物質、均勻性、羥苯乙酯和磺胺嘧啶鋅含量、錐入度等均無顯著變化。

上述影響因素和3個月加速試驗結果均表明磺胺嘧啶鋅軟膏穩定，在陰涼（20 ℃以下）貯藏條件下可以保證藥品有效期內質量穩定。

（3）包材阻隔性 國標方法測定軟膏管水蒸氣透過率為0.00011 g/d，氧氣透過率為0.013 cm3/d，推算磺胺嘧啶鋅軟膏3年有效期內水蒸氣透過量為0.12 g；藥典方法測定軟膏管水蒸氣透過量為0.006%；表明A企業所使用的包材（聚乙烯/鋁/聚乙烯復合藥用軟膏管）阻隔性能良好，可防止有效期內樣品水分揮發，以保證藥品質量穩定。

3.2.4 質量可控性

（1）磺胺嘧啶鋅軟膏質量標準

①鑒別 現行軟膏質量標準鑒別試驗，樣品前處理方法為加入稀鹽酸200 mL使磺胺嘧啶鋅溶解，磺胺嘧啶鋅濃度約為2.5 mg/mL，再取15 mL（相當于磺胺嘧啶鋅37.5 mg）進行后續處理生成磺胺嘧啶沉淀，理論上沉淀物量為33 mg，無法按標準規定的沉淀取樣量0.05和0.1 g進行化學鑒別反應，探索性研究發現將稀鹽酸加入量減至20 mL，沉淀量顯著增加，可滿足化學鑒別反應沉淀取樣量，現行質量標準鑒別項需修訂。

②含量測定 采用“2.2.4（1）”軟膏含量測定中新建HPLC法，經方法學驗證，方法學各項指標均符合要求，可準確測定磺胺嘧啶鋅軟膏及原料中磺胺嘧啶鋅含量。HPLC法測定29批次國抽樣品、3批次調研收集樣品含量為4.88%～5.24%（按標示量計算為97.6%～104.8%），現行軟膏質量標準為永停滴定法，32批次樣品含量為4.98%～5.39%（按標示量計算為99.6%～107.8%）。對2種方法含量測定結果進行比較，永停滴定法由于基質消耗滴定液，比HPLC法平均偏高3%（按標示量計算）。采用SPSS 25.0軟件對2種方法含量測定結果進行配對樣本t檢驗，P=0，<0.05，表明HPLC法與永停滴定法含量測定結果有顯著性差異。經企業調研，A企業按100%投料，新建HPLC法，低中高3個濃度水平的平均回收率為99.94%，其含量測定結果更接近實際投料量，更能準確反映磺胺嘧啶鋅軟膏真實含量，現行質量標準方法需修訂。

（2）磺胺嘧啶鋅質量標準

①有關物質 采用“2.2.4（2）”原料有關物質中新建HPLC法測定3批次調研收集原料有關物質，結果原料檢出雜質7個，單雜%小于0.04%，總雜%小于0.2%，雜質含量較低。

②鋅含量 采用“2.2.4（2） ”鋅含量中方法，經方法學驗證，該方法準確度高，專屬性強，可有效控制鋅含量，結果測定3批次調研收集原料中鋅含量為11.3%～11.8%。根據測定結果及磺胺嘧啶鋅分子式（C20H18N8O4S2Zn·2H2O），分子量為599.94，Zn分子量為65.38，按磺胺嘧啶鋅無水物計算，Zn占比為11.59%，擬定限度為11.0%～12.2%（相當于理論量的95%～105%）。3批次原料鋅含量均在擬定限度范圍內，表明原料合成時鋅完全與磺胺嘧啶結合。

③含量測定 采用原料現行質量標準永停滴定法與新建軟膏含量HPLC法同時測定3批次調研收集原料含量，結果2種方法測定3批次原料含量結果基本一致。采用SPSS25.0軟件對2種方法含量測定結果進行配對樣本t檢驗，Sig.雙尾為0.35>0.05，表明2種方法含量測定結果無顯著性差異。分析現行質量標準永停滴定法因不受基質影響，方法專屬性好，滴定終點明顯，準確度高，無須修訂。

（3）近紅外建模

①近紅外一致性檢驗模型 采用“2.2.4（3）”中近紅外一致性檢驗模型方法，結果驗證用1批次調研收集磺胺嘧啶鋅軟膏的6張光譜的CI值在5以內，表明為同一品種；1批次對照樣品的3張光譜的CI值在45～50之間，表明為不同品種；1批次克霉唑乳膏的3張光譜的CI值在55～60之間，遠大于5，亦表明為不同品種。以上驗證結果均表明所建近紅外一致性檢驗模型可有效區分磺胺嘧啶鋅軟膏和非磺胺嘧啶鋅軟膏。

②近紅外定量模型 采用“2.2.4（3）”中近紅外定量模型方法，經交叉驗證計算得到R2為81.09，RMSECV為0.05，所建立近紅外定量模型預測結果與HPLC含量測定結果接近，最小偏差為0.0007，最大偏差為0.12，可用于本品生產過程質量控制。

（4）劑型名稱

根據磺胺嘧啶鋅軟膏處方，基質為O/W乳劑型基質，乳化劑為聚山梨酯80；其生產工藝為水相、油相分別經加熱滅菌后再混合乳化、灌封制得，按照中國藥典2020年版四部通則0109軟膏劑與乳膏劑表述，建議劑型名稱修訂為乳膏劑。

（5）說明書問題

磺胺嘧啶鋅軟膏說明書“包裝”表述為“鋁塑復合管”，實際為“聚乙烯/鋁/聚乙烯復合藥用軟膏管”，包裝材質不符合國家食品藥品監督管理局第24號令《藥品說明書和標簽管理規定》[29]，建議對說明書中包裝材質進行規范化表述。

4 總結

采取法定標準檢驗結合探索性研究對磺胺嘧啶鋅軟膏的質量現狀進行綜合評價。按法定標準檢驗，29批次國抽樣品法定檢驗合格率100%，探索性研究合格率82.8%，因此產品總體質量為一般。探索性研究提示磺胺嘧啶鋅軟膏和原料質量標準有待提高；建議企業優化處方設計，關注原料質量與軟膏生產過程控制，從而全面提高產品質量；同時建議將劑型名稱修訂為乳膏劑，并對說明書中包裝材質進行規范化表述。

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