仔豬豬流行性腹瀉病毒與大腸桿菌混合感染的診治

陳亮，張蕾，沈思思，蘭世捷，苗艷，馮萬宇，李丹，鐘鵬，劉博超，吳憲，于辰龍

（黑龍江省農業科學院畜牧獸醫分院 黑龍江齊齊哈爾 161005)

引起仔豬腹瀉的傳染性因素有很多，主要分為病毒性病原和細菌性病原兩類。常見的病毒性病原主要包括豬流行性腹瀉病毒（PEDV）、豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）、豬輪狀病毒（PRoV）、豬細小病毒（PPV）、豬瘟病毒（CSFV）、豬偽狂犬病毒（PRV）等，尤其腸道病毒感染仔豬后，臨床癥狀表現相似、病理變化差別不大，容易引起誤診，耽誤疾病的及時防治[1]。在這些腸道病毒中，PEDV 對哺乳仔豬的危害最重，發病率可達100%，病死率30%～80%[2]。患病豬是PEDV 的主要傳染源，此外，攜帶PEDV 的野豬是病毒的儲存宿主，對該病的流行和傳播具有重要作用[3]。2010 年起，我國的許多豬場大規模暴發PED，初生仔豬死亡率達90%以上[4]，原來的免疫方式和疫苗不能控制PED 發生，原因在于PEDV 發生了重要變異[5]。2013 年5 月，美國首次發現PED，傳播力強，致使美國31 個州的商品豬存欄量在18 個月內損失10%[6]。

細菌性病原主要為大腸桿菌（E.coli），隨著養豬業規模迅速擴大，仔豬黃痢和仔豬白痢在臨床上最常發生，其發病率和死亡率在仔豬疾病中占據首位[7]，極大阻礙了養豬業的健康發展[8]。由于E.coli 血清型復雜，易產生耐藥菌株，如何有效地防治該病正面臨著巨大的挑戰[9]。

PEDV 與E.coli 是目前引起仔豬腹瀉最主要的病原，當仔豬同時感染PEDV 與E.coli 時，會給養豬場造成嚴重的經濟損失。現將一例仔豬PEDV 與E.coli 混合感染的情況報道如下。

1 發病情況

齊齊哈爾市泰來縣某一體化養豬場共養殖生豬1300 多頭，2022 年4 月下旬，母豬與新生仔豬陸續發病，母豬主要表現為嘔吐、噴射狀水樣腹瀉，精神狀態良好，食欲正常，持續1 周后康復；哺乳仔豬出生后第2 天，開始持續水樣腹瀉，后變為白色稀便，精神沉郁，食欲減退，3～5d 后陸續出現死亡。畜主前期用過頭孢噻呋鈉、慶大霉素、環丙沙星及補液鹽等藥物，效果不佳，至來就診咨詢時，仔豬已陸續死亡25 頭。

2 剖檢變化

對剛死亡的2 頭小豬進行剖檢，肝臟局部壞死（見圖1）；腎臟有密密麻麻點狀出血（見圖2）；脾臟邊緣出血、梗死（見圖3）；小腸壁變薄，腸系膜出血，腸內充滿黃色液體（見圖4）。

3 實驗室診斷

3.1 病毒檢測

1）病料處理取脾臟、腎臟、腦、淋巴結等組織及腸內容物約2.0g，放于研磨中，剪碎，加入1mL 生理鹽水研磨，磨碎后放入EP 管中，6000rpm 離心3min。

2）RNA 提取取上清液按照相關說明進行DNA 和RNA 的提取，獲得模板DNA 和模板RNA。

3）PCR 擴增設計好程序，在PCR 擴增儀上進行TGEV、PEDV、PRoV、CSFV、PRRSV、PRV 的擴增。

4）電泳取PCR 或RT-PCR 產物點樣于瓊脂糖凝膠孔中，以110V電壓于TAE 電泳緩沖液中進行16min 的電泳，在凝膠成像系統上觀察結果。第2 泳道，在508bP 左右處出現亮帶，說明豬流行性腹瀉病毒陽性，其余病毒陰性（見圖5）。

3.2 細菌檢測

無菌取仔豬的肝臟、脾臟組織接種于瓊脂培養基，通過麥康凱和伊紅美藍鑒別培養基、革蘭氏染色及菌體形態，確定從仔豬體內分離的菌體為大腸桿菌。

4 藥敏試驗

將分離的菌均勻涂抹到營養瓊脂平板上，選擇6 種常用抗菌藥（頭孢噻呋鈉、慶大霉素、環丙沙星、多西環素、磺胺間甲氧嘧啶、卡那霉素）均勻放置于平板上，培養過夜。結果顯示，該菌對卡那霉素中度敏感，對其它抗生素不敏感。

5 防治

5.1 消毒與隔離

將病豬轉至隔離間，豬舍全面消毒，可選擇次氯酸成分的消毒水（84）或者是3%的氫氧化鈉溶液，對分娩舍清掃干凈，用百毒殺進行徹底消毒后將臨產母豬趕入待分娩。禁止工作人員來回竄舍，防止交叉傳播病菌。

5.2 加強飼養管理

不同階段的豬要進行分開飼養，哺乳仔豬和妊娠母豬更要進行單獨飼養，避免PEDV 的傳播和交叉感染，飼喂全價料保障豬的生長發育，補給微量元素和維生素。

5.3 藥物治療

丁胺卡那霉素肌注，發病仔豬按10mg/kg 體重給藥，1 次/d；白細胞干擾素2000～3000IU，皮下注射，1 次/d，同時口服補液鹽，飼喂乳酸桿菌，連用5d；全群用活性炭拌料，每100kg 飼料加0.5kg 活性炭，連喂3～5d。選用以黃連、黃芩為主藥的多種中藥方劑水煎服用。

5.4 血清治療

用康復仔豬的血清給發病仔豬注射，1mL/頭，連用4d。

6 討論

PEDV 主要侵染初生仔豬并致病，目前針對仔豬發病無有效的免疫治療方法，必須依賴母豬初乳獲得被動免疫進行疫病防控。因此，需要做好母豬的PED 免疫。滅活疫苗免疫母豬可以產生較好的免疫效果，但肌肉或后海穴免疫途徑主要產生執行體液免疫功能的IgG，執行腸道黏膜保護的IgA 產生有限[10]，因此保護不了仔豬感染PEDV，經典毒株和經典毒株CV777 重組容易產生新型變異株[11]，且存在生物安全風險；弱毒疫苗相對于滅活苗具有接種量少、抗體產生速度快等優勢，但篩選疫苗毒株的周期過長；基因工程疫苗中的重組病毒可能存在過度致弱的問題。因此需要對包括母豬孕期免疫機理和PEDV 免疫防控的諸多方面加強研究，為更加完善的PEDV 免疫防控提供理論技術支撐。

由于一些豬場濫用抗生素，使得大腸桿菌耐藥質粒轉移擴散產生了耐藥性[12]，對抗生素的敏感性不斷下降，因此，合理選用抗生素是非常有必要的；在飼料禁抗的大背景下，使用一些益生菌或中藥添加劑可以降低仔豬腹瀉發病率。飼料中添加益生菌可有效地調節腸道菌群[13]。有試驗證明，在仔豬出生后未吮吸母乳前飼喂乳酸桿菌能大幅降低腹瀉死亡率[14]。在生產中，可選擇“小柴胡散+阿莫西林”和“雙黃連+阿莫西林”來驅除寒濕和熱濕。

7d 后，筆者電話回訪，主訴豬群基本恢復正常。隨著集約化養殖業的不斷發展，仔豬腹瀉現象時常發生，需要高度重視，及時查明病因，精準治療，除上面提到的方案外，還可以采取返飼的方式，將妊娠母豬暴露于病毒污染的糞便或者腸內容物，激發母豬產生乳汁免疫力；給新生仔豬灌服抗PED 卵黃抗體等。預防仔豬腹瀉，最重要的是要做好妊娠母豬的疫苗免疫，尤其是PEDV 和E.coli 疫苗的合理接種，它直接關系到初乳中的抗體水平，間接影響豬場的經濟效益。■