氣相色譜串聯質譜法測定市售白酒中18 種鄰苯二甲酸酯類塑化劑

陳俊秀, 馬曉年, 張瑞雨, 梁志堅, 梁孟軍, 李文廷

（云南省昆明市疾病預防控制中心, 昆明 650228）

白酒是中國的傳統飲料酒, 具有悠久的歷史與文化, 傳統的中國白酒一般是由高粱、玉米、小麥、大麥、大米、糯米等糧谷類作物經發(fā)酵、蒸餾、貯存、勾調而成。鄰苯二甲酸酯類（Phthalic acid esters, PAEs）是一種環(huán)境激素類內分泌干擾物, 具有類雌激素的作用, 通過干擾生物體內正常激素的分泌、代謝等造成機體內分泌、生殖系統紊亂甚至肝腎器官的損害[1, 2］。近年來, 由于某些食品中被檢出鄰苯二甲酸酯類化合物, 引起了社會對于塑化劑導致食品安全危機的強烈關注。鄰苯二甲酸酯是脂溶性化合物, 而白酒的主要成分是乙醇, 目前得知白酒中存在的塑化劑并不是在白酒釀造過程中發(fā)酵產生的, 而是屬于特定遷移[3］, 主要來源有釀造的糧食、塑料接酒桶、塑料輸酒管、酒泵進出乳膠管、封酒缸塑料布等。目前, 鄰苯二甲酸酯類化合物的檢測方法主要有離子遷移譜法（IMS）[4, 5］、氣相色譜法[6, 7］、液相色譜法[8, 9］、氣相色譜質譜聯用法[10-12］以及液相色譜質譜聯用法[13, 14］等。

本研究參照國標GB 5009.271—2016《食品安全國家標準—食品中鄰苯二甲酸酯的測定》[15］中的氣相色譜串聯質譜法, 外標法定量測定, 樣品前處理操作簡便, 可用于白酒中18 種鄰苯二甲酸酯類塑化劑的檢測。

1 材料與方法

1.1 材料

7890B-7000C 型氣相色譜-質譜聯用儀（GCMS 聯用, 美國Agilent 公司）、QL-866 型震蕩器（QILINBEIER 公司）、XS205DU 型分析天平（十萬分之一, 瑞士Mettler Toledo 公司）、3H16121 型高速冷凍離心機（湖南赫西儀器裝備有限公司）、KQ-500DE型數控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）。

16種鄰苯二甲酸酯類混合標準溶液（1 000 μg/mL）、鄰苯二甲酸二烯丙酯（DAP, 純度99.0%）、鄰苯二甲酸二異壬酯（DINP, 純度99.0%）、正己烷（色譜純）、無水硫酸鎂（分析純）, 樣品為36 件市售白酒。

1.2 標準溶液的配制

稱取鄰苯二甲酸二烯丙酯（DAP）和鄰苯二甲酸二異壬酯（DINP）各0.010 g（精確到0.000 1 g）分別于10 mL 容量瓶中, 用正己烷溶解并準確配制成質量濃度為1 000 μg/mL 的標準儲備液。取16 種鄰苯二甲酸酯類混合標準品（1 000 μg/mL）和鄰苯二甲酸二烯丙酯（DAP）標準儲備液（1 000 μg/mL）各1 mL至100 mL 容量瓶中加入正己烷, 定容至刻度, 配制成10 μg/mL 的17 種鄰苯二甲酸酯標準混合中間液, 于-18 ℃避光保存。使用時根據需要配制適當濃度的標準工作液。

1.3 樣品前處理

稱取試樣1.0 g（精確至0.000 1 g）于25 mL 具塞磨口離心管中, 加入2 mL 蒸餾水, 渦旋混勻, 再準確加入10 mL 正己烷, 渦旋1 min, 劇烈振搖1 min, 超聲提取30 min, 10 000 r/min 離心5 min, 取正己烷層加入2 g 烘干的無水硫酸鎂除水, 然后取上清液, 供GC-MS 分析。

1.4 試驗條件

1.4.1 氣相色譜條件 色譜柱：MEGA-5 毛細管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；進樣口溫度：260 ℃；升溫程序：初始柱溫60 ℃, 保持1 min；以20 ℃/min 升溫 至220 ℃, 保 持1 min；再 以5 ℃/min 升 溫 至250 ℃, 保持1 min；再以20 ℃/min 升溫至290 ℃, 保持7.5 min；載氣：高純氦（純度＞99.999%）；流速：1.0 mL/min；進樣方式：不分流進樣；進樣量：1 μL。

1.4.2 質譜條件 電離方式：電子轟擊電離源（EI）；電離能量：70 eV；傳輸線溫度：280 ℃；離子源溫度：230 ℃；檢測方式：多離子掃描模式（MRM）, 溶劑延遲：7 min。檢測離子見表1。

表1 鄰苯二甲酸酯檢測離子參數

2 結果與分析

2.1 標準曲線和檢出限

吸取17 種鄰苯二甲酸酯標準混合中間液用正己烷逐級稀釋, 配制成濃度分別為0.0、0.02、0.05、0.10、0.20、0.50、1.00 μg/mL 的標準工作液。準確吸取鄰苯二甲酸二異壬酯（DINP）標準儲備液（1 000 μg/mL）, 用正己烷逐級稀釋, 配制成濃度分別為0.0、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、20.0 μg/mL 的標準工作液。以目標組分的峰面積（Y）對質量濃度（X）繪制標準曲線。18 種化合物的回歸方程、相關系數和檢出限見表2。標準樣品總離子流色譜見圖1、圖2。

圖1 17 種鄰苯二甲酸酯化合物標準品的色譜

圖2 鄰苯二甲酸二異壬酯（DINP）色譜（18-DINP）

表2 18 種化合物的回歸方程、相關系數和檢出限

2.2 加標回收率

稱取1.0 g（精確至0.000 1 g）樣品9 份, 分成3組, 分別加入0.05、0.09、0.30 mL 17 種鄰苯二甲酸酯標準混合中間液（10 μg/mL）和1.0、6.0、9.0 mL 鄰苯二甲酸二異壬酯（DINP）標準中間液（10 μg/mL）。按照樣品預處理方法制備樣品溶液后測定, 計算平均加標回收率及相對標準偏差, 結果見表3。

表3 目標化合物在不同加標水平下的加標回收率（n=3）

2.3 精密度

稱取1.0 g（精確至0.000 1 g）空白樣品6 份, 加入0.30 mL 17 種鄰苯二甲酸酯標準混合中間液（10 μg/mL）和9.0 mL 鄰苯二甲酸二異壬酯（DINP）標準中間液（10 μg/mL）, 按照樣品預處理方法制備樣品溶液, 重復測定計算精密度, 結果見表4。

表4 重復測定的精密度

2.4 樣品的測定

對市售36 件白酒樣品進行分析測定, 被測樣品中有一種或幾種鄰苯二甲酸酯類檢出, DBP 的檢出率最高為47.2%, 其次有DIBP、DEHP、DPP等（表5）。

表5 36 件白酒樣品中鄰苯二甲酸酯類的檢出情況

3 結論

本研究采用氣相色譜串聯質譜法測定白酒中的18 種鄰苯二甲酸酯類化合物, 樣品前處理方法采用液液萃取法, 操作簡便。對市售的36 件白酒進行了鄰苯二甲酸酯類塑化劑檢測, 被測樣品中有部分的鄰苯二甲酸酯類被檢出, 表明白酒中存在塑化劑溶出問題, 可能是在生產或儲存過程中遷移產生, 且隨著時間的增加遷移量可能會增多, 因此有必要對市售白酒中鄰苯二甲酸酯類的污染情況進行監(jiān)測, 為白酒市場監(jiān)控提供數據支持。