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太子參脫毒種參的繁育技術規程

2023-03-21 18:54:11李曉紅胡雪華陳成弟
種子科技 2023年2期

李曉紅,胡雪華,李 利,陳成弟

(1.井岡山大學,江西 吉安 343009;2.吉安市青原區農業農村局,江西 吉安 343000;3.吉安市富榮生態農業有限公司,江西 吉安 343000)

太子參是石竹科(Caryophyllaceae)多年生草本植物異葉假繁縷(Pseudostellaria heterophylla(Miq)Pax ex Pax et Hoffm.)的干燥塊根,又名孩兒參、童參、四葉參,是中國聞名的道地中藥材。

太子參味甘、性平、微苦,具有補氣益血、健脾、生津潤肺之功效[1],臨床常用于心悸自汗,體倦乏力,脾虛食少,氣陰不足,肺燥干咳等癥[2]?,F代醫學研究表明,太子參富含氨基酸[3]、多糖[4]、苷類、磷脂類[5]、環肽類[6-7]、揮發油等多種有效成分[8],具有增強機體、免疫促進、鎮咳、抗菌、抗病毒等多種生物活性[9],廣泛用于止咳、改善心肺功能、治療糖尿病、抗疲勞、抗氧化等方面[10]。除此之外,太子參還具有增強免疫功能和抗疲勞、抗應激、延長壽命、清除超氧自由基的功效[11-12]。除食用、藥用外,太子參在保健食品、化妝品等方面也有廣泛應用[13]。

隨著太子參應用不斷被開發,市場需求量大大增加,太子參的種植面積也不斷擴大,種植產量與質量成為占領市場的前提。太子參以人工栽培為主,由于太子參種子不易收集且有休眠現象,發芽率低,生產中通常采用塊根進行無性繁殖,長期無性繁殖容易累積病毒,導致病毒病頻發,太子參品種退化,產量和品質下降[14],生產成本增加,嚴重影響太子參種植收益,這已成為太子參產業發展的一道難題。

對于太子參病毒至今尚無有效的化學藥劑進行防治,利用生物技術手段可對太子參進行種質脫毒改良、品種復壯、規模化育種。其中,組織培養就是其中一種快速有效的方法,具有周期短、脫毒率高、出苗整齊等優點。因此,建立脫毒種生產體系,生產脫毒種參,是去除太子參病毒最直接有效的手段。本規程規范太子參脫毒組培苗及脫毒種參的繁育技術,以進一步提升太子參種參質量,為太子參的種植提供優質種源,從而保障太子參種植產業健康發展。

1 范圍

本規程規定了太子參脫毒組培苗規范化生產技術。

2 引用標準

《環境空氣質量標準》(GB 3095—2012)[15],《農田灌溉水質標準》(GB 5084—2021)[16],《土壤環境質量農用地土壤污染風險管控標準(試行)》(GB 15618—2018)[17],《綠色食品 肥料使用準則》(NY/T 394—2013)[18],《農藥合理使用準則(九)》(GB/T 8321.9—2009)[19]。

3 太子參脫毒組培苗的培養

3.1 外殖體的處理與消毒

選擇帶健壯芽頭、體肥個大的太子參,放置于1~4 ℃環境中冷藏,打破休眠,待太子參的芽頭萌動后,切取萌發芽頭作為外殖體。將萌發芽頭用自來水沖洗干凈后晾干,置于超凈工作臺上,依次用酒精浸泡30 s,0.1%升汞浸泡7~8 min,其間不斷攪動,浸泡之后用無菌水沖洗4~5 次,然后轉入無菌培養皿中的濾紙上備用。

3.2 太子參莖尖的誘導

將上述處理過的外殖體置于體視鏡下,在無菌環境下,剝取大小為0.5 mm 左右的莖尖,并將莖尖接種于誘導培養基上培養,培養基為MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/LNAA+30 g/L 蔗糖+5.5 g/L 瓊脂粉,pH 值為5.8。培養溫度為(20±1)℃,光照強度為1 000 lx,光照周期為10 h/d,培養20~25 d 后,太子參莖尖萌發,再過10 d左右長出2~4 cm 組培苗。

3.3 病毒檢測

將上述莖尖誘導出的組培苗葉片,提取出RNA,利用RT-PCR 法檢測病毒,去除帶病毒的幼苗,將無病毒苗進行擴增培養。

3.4 組培苗的增殖培養

將檢測無毒的組培苗接種于增殖培養基上進行培養,培養基為MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/LNAA+30 g/L蔗糖+5.5 g/L 瓊脂粉,pH 值為5.8。培養溫度為(20±1)℃,光照強度為2 000~2 500 lx,光照周期為12 h/d,待太子參苗長至6~8 cm 后,將其切成4~5 段,再轉接于上述增殖培養基中,重復以上增殖步驟,直至獲得足夠數量的組培苗。

4 組培苗馴化

煉苗:由于太子參很容易生根,增殖苗已長出大量根,因此可將長至6~8 cm 的增殖苗直接進行瓶內煉苗。先將瓶苗進行部分遮光,移至溫度(25±1)℃的潔凈環境中,然后逐步提高光強,15 d 后松開瓶蓋1~2 d,再半打開瓶蓋1~2 d,最后完全打開瓶蓋放置3~4 d,期間滴入符合上述標準的灌溉水,以防干燥,然后取出組培苗,放入清水盆中,小心洗去植株根部殘留的培養基,栽種于苗床,進行瓶外煉苗。

瓶外煉苗環境條件符合《環境空氣質量標準》(GB 3095—2012)、《農田灌溉水質標準》(GB 5084—2021)以及《土壤環境質量 農用地土壤污染風險管控標準(試行)》(GB 15618—2018)。栽種基質選用保水保肥力強、透氣性好的弱酸性基質,如草碳和蛭石按體積比為2∶1 或草炭和珍珠巖3∶1 配制,用800~1 000 倍液的甲基托布津或95%敵克松300~500 倍液噴霧殺菌,1 d 后淋透水。苗床搭成塑料拱棚,以保溫保濕,外面還可搭建遮陽網和防蟲網,防強光直射和防蟲。溫度保持在15~25 ℃,期間同時注意通風。在苗床上培養60 d,即可移植至大田種植。

5 組培苗移栽及種參的繁育

5.1 種植基地的選擇

太子參為多年生草本,一個生長周期為120 d 左右,一般秋天播種,冬天生根,春天發芽,夏天枯苗采收。喜溫暖濕潤氣候,適宜溫度為10~25 ℃,較為耐寒,忌夏日高溫和強光暴曬,氣溫高于30 ℃,植株生長停滯,不耐旱澇。喜肥沃疏松、含有豐富腐殖質、弱酸性砂質土壤,忌黏土,耕作層宜在30 cm 左右。選地需考慮以上太子參的生長特性,選擇排水良好、土壤肥沃疏松的陰濕環境。同時,為避免病毒傳染,周圍不能種植花葉病毒寄主,如煙草、番茄、白菜等十字花科類植物,所選地塊最好進行水旱輪作,改善土壤的理化性狀,消除有毒物質,增加肥力。

太子參脫毒種的擴繁,環境條件除要符合以上生長習性外,還要遠離市區,周圍10 km 無污染源,空氣、水質和土壤同時也要符合以下標準:《環境空氣質量標準》(GB3095—2012),《農田灌溉水質標準》(GB 5084—2021),《土壤環境質量 農用地土壤污染風險管控標準(試行)》(GB 15618—2018)。

5.2 整地、施基肥

先將所選地塊深翻兩次,整成寬1.5 m、高30 cm的畦,開排水溝寬30 cm,長畦中間開溝斷開,利于操作和排水。在整地過程中噴灑敵克松可濕性粉劑600 倍液進行土壤消毒。在栽種前撒施基肥,基肥以有機肥為主,施腐熟廄肥22 500 kg/hm2、碳酸氫銨600 kg/hm2、氮磷鉀復合肥450 kg/hm2左右。

5.3 移栽

在2 月中下旬,土溫達到15 ℃以上,經馴化后的組培苗可以移栽到整好的田地。移栽時,將馴化苗根系包裹著基質一并放入種植穴中央,覆土和基質齊平,壓實,株距12 cm,行距15 cm,最后輕灑定根水,以防沖倒幼苗。

6 田間管理

6.1 中耕鋤草

采用人工除草,嚴禁使用除草劑。生長期除草3次,第一次于3 月上旬待移栽成活后,用鏟子松土,深度3 cm,破除板結,鏟除雜草;第二次鋤草于4 月中旬,淺鋤表土,防止動根傷苗;第三次鋤草于5 月中旬,封壟前拔除大草,畦面停止除草,防止傷害苗和塊根,同時在封壟前拔除病株、弱株,并燒毀。

6.2 肥水管理

太子參喜濕怕澇,在整個生長期內,雨季到來時應時刻關注排水溝,確保雨水通暢排出。遇干旱時要合理澆灌,若土壤含水量低,不利于中根生長,因此要及時澆水促進根系生長和膨大。太子參喜肥,除施基肥之外,還要追肥兩次,追肥符合《綠色食品 肥料使用準則》(NY/T 394—2013)。

第一次追肥在3 月上旬,結合中耕除草進行,沿太子參的行間均勻地將肥料撒于行內,用小鋤頭輕輕松土,將肥料蓋入土內,注意不要把肥料撒在葉片上,避免灼傷葉片,選擇在早晨露水干后為宜。第二次追肥在4 月中下旬,塊根膨大期,用磷酸二氫鉀75 kg/hm2,配成0.5%溶液進行葉面噴施,7~10 d 噴施1 次,一般2~3 次即可,早晚噴施。

6.3 病蟲害防治

太子參主要病害有葉斑病、病毒病、白絹病、紫紋羽病和根腐病。病毒病是主要病害,但因種苗經過組培脫毒已經不帶病毒,只要在種植管理方面做好消毒和隔離,基本不會感染病毒病。其他幾種病害由各種菌類引起,可選用低毒、無殘留的農藥防治。用藥符合《農藥合理使用準則(九)》(GB/T 8321.9—2009),保證藥材重金屬含量、有機氯含量不超標,并且以預防為主。例如發生病蟲害可以選用適量低毒、無殘留的農藥,最好采用生物防治。

太子參蟲害有蠐螬、螻蛄、地老虎等,幼蟲會為害塊根或咬斷根莖。防治可用燈光誘殺,用桐子餅+生物農藥制成毒餌誘殺,也可用順式氯氰菊酯兌水1 000倍進行噴灑。

除用藥防治病蟲害外,還應合理進行地肥水管理,保持土壤濕潤,但不積水;生長期增施磷鉀肥提高植株抗病能力;及時地清理焚燒病株、殘株和雜草,保持田畦干凈;深翻土壤、做好土壤消毒;采取建立隔離帶以及生物防治等措施,都能夠很好地預防和控制病蟲害發生。

7 采挖

一般商品參在6 月下旬至7 月初采挖,在植株高溫枯萎、塊根停止生長時即可收獲。種參一般在10 月底采挖,選擇晴天采收,用四齒鈀細心挖起,深度一般為10 cm 左右,不宜過深,抖掉泥土,去除莖葉,注意不要碰傷芽頭,保持參體完整。采挖后的脫毒種參稍晾干,在11 月初就可作種種下去。

8 結束語

經后期用脫毒組培苗繁育得到的種參和自留種參在同樣條件下種植,試驗對比發現:脫毒種參苗期的生長勢旺,葉片碧綠伸展,無病斑,高溫枯萎期推后,參體均勻肥大,色澤金黃。自留種苗期葉片卷縮,病斑嚴重,植株矮小,夏季早早枯萎,并且參體大小不均,細長無光澤。經隨機取樣測產,脫毒種參比自留種參所產商品參產量高出50%以上,而生產成本可以節約30%,大大提高了種植收益,以上各方面都突顯出脫毒種的優勢。

脫毒種應用對太子參生產和生態環境的保護以及食品安全方面意義非凡。隨著綠色產業興起,脫毒種的推廣應用勢在必行,不僅是太子參,其他農作物一樣。太子參脫毒種參繁育技術規程的建立引領著健康科技產業發展。

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