縣級獸醫(yī)實驗室常用實驗儀器設備的使用方法和注意事項

孫 賀，王國巖，崔真愛，莊寶策，費維超

1.永吉縣動物疫病預防控制中心，吉林永吉 132200；2.永吉縣農(nóng)村社會事業(yè)服務中心，吉林永吉 132200；3.永吉縣岔路河鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務中心，吉林永吉 132200

縣級獸醫(yī)實驗室在我國動物疫病預防與控制體系中有著重要作用，是我國開展動物疫情監(jiān)控管理的基礎平臺。獸醫(yī)實驗室不但能為動物疫情監(jiān)測提供科學精準的技術支撐，還能夠為所屬區(qū)域的動物流行病調(diào)查，動物疫病診斷等工作開展提供檢驗檢測支持，讓動物疫病預防控制更有效精準。筆者從事獸醫(yī)實驗室動物疫病檢測檢驗工作，結合工作中的經(jīng)驗，總結了獸醫(yī)實驗室常用的設備儀器使用方法及注意事項，為同行提供參考。

1 紫外線消毒燈使用方法及注意事項

紫外線消毒燈的消毒作用來源于兩個方面。一是物理消毒，原理是紫外線燈發(fā)出的紫外線可以使細菌病毒等微生物的脫氧核糖核酸的結構破壞或者使其發(fā)生改變，這樣微生物立即失去活性，達到消毒的作用；二是間接化學消毒，原理是185 nm的紫外線能夠使空氣中的氧氣發(fā)生化學反應形成臭氧，臭氧能氧化分解細菌內(nèi)部葡萄屬糖所需的酶，使細菌滅活死亡。形成的臭氧能夠直接與細菌、病毒作用，破壞它們的細胞器和DNA、RNA，使細菌的新陳代謝受到破壞，導致細菌死亡。紫外線消毒燈使用方便，幾乎對所有的微生物都有消殺作用，是獸醫(yī)實驗室必備的消毒裝置。

安裝了紫外線消毒燈的實驗室，紫外線照射消毒5 min左右就可以將衣服等物品上的細菌和病毒殺死，照射30 min可以將空氣中的細菌殺死。要根據(jù)實驗室的面積及舉架高低合理設置紫外線消毒燈布置和數(shù)量，檢測實驗開始前50 min或?qū)嶒為g隔的等待時間可作為紫外燈照射時間，注意每次照射時間不應小于30 min，并且在人員進入前10 min關閉，進入實驗室要再次確認紫外線燈是否關閉，以免對身體和眼睛造成傷害。紫外線消毒燈管要定期清潔以保證消毒效果，不要用手直接觸摸燈管，可以用不易掉毛的毛巾或無紡布噴施酒精之后擦拭。這里需要注意，雖然紫外線消毒方便易操作，但是只能作輔助性滅菌工具，必須按照實驗室消毒規(guī)定定期消毒。

2 高速冷凍離心機使用方法及注意事項

離心機通過轉頭高速轉動使需要分離的包含不同組分的混合物品發(fā)生分離的一種離心設備。獸醫(yī)實驗室中離心機多用于畜禽血清分離，制備紅細胞溶液，核酸提取等實驗操作中。

離心機要水平放置，檢查離心機每個腳座是否都牢靠放置于操作臺上。在使用離心機分離血清等操作時，要對稱放置待離心樣品，若樣品不能呈中心對稱放置時候，可以利用清水配置一個相似的樣品以滿足配平的要求。在進行核酸提取的實驗過程中要使用高速冷凍離心機，使用前必須要提前開機設定要求溫度，關閉離心機蓋進行預冷。冷凍離心使用結束后要把轉頭拆下倒放在實驗臺上。可用干燥的無紡布或者廚房用紙擦干離心機腔內(nèi)的冷凝水，建議對于冷凍離心機用后要保持機蓋打開狀態(tài)用以使其內(nèi)部得到干燥，防止生銹腐蝕機器。離心機轉頭蓋不能浮放在轉頭上，因為一旦錯誤啟動，轉頭蓋有可能飛出，使轉頭蓋或者離心機內(nèi)腔破損。在離心機運行時如果發(fā)現(xiàn)離心機異常抖動或者發(fā)出其他非正常聲音，不能關閉按電源（POWER）鍵或者直接拔出插頭，要迅速按停止（STOP）鍵，停止鍵有類似“剎車”的效果，可以使轉頭迅速停止。在放置樣品的時候要認真檢查待離心樣品的試管否有破裂、老化或者裂紋的情況，以免高速離心時試管破裂污染離心機。

3 電熱恒溫箱使用方法及注意事項

電熱恒溫箱主要用于細菌、細胞、微生物等物質(zhì)的培養(yǎng)或者實驗室檢測反應板的溫育，是獸醫(yī)實驗室必備儀器之一。恒溫箱多用于獸醫(yī)檢測中的血清學實驗的酶標板的溫育，或者平衡樣品溫度時使用。

在使用恒溫箱時，要有提前預熱的概念，比如要開展豬口蹄疫檢測實驗時，實驗步驟中要求置于37 ℃溫育60 min，若沒有進行預熱，就需要等待溫度提高到要求溫度，導致檢測時間長，或檢測結果不準確，所以每次需要使用恒溫箱的實驗要記得提前開機預熱。要按取出時間先后順序依次將所要溫育的反應板擺放在擱板上，各反應板擺放位置要均勻，確保每個需要溫育的反應板的溫度一致。

恒溫箱周圍不可放置易燃、易爆物品。每次使用完畢要關閉電源，待恢復室溫以后，斷開電源，用對金屬無腐蝕性的酒精消毒。待酒精完全揮發(fā)干燥以后關閉恒溫箱門，恒溫箱應放在干燥的室內(nèi)以免加熱和控制元件潮濕而影響正常使用。

4 高壓蒸汽滅菌器的使用方法及注意事項

高壓蒸汽滅菌器原理同我們生活中使用的高壓鍋類似，通過電能使水加熱，產(chǎn)生水蒸氣，在密閉的空間內(nèi)，壓力提高，水溫提高，最終滅菌器內(nèi)溫度可達到121 ℃，在高溫高壓的作用下能使細菌或者病毒的有機物質(zhì)迅速發(fā)生不可逆的損壞變性，實現(xiàn)滅菌效果。高壓蒸汽滅菌器是保證實驗室無菌操作和實現(xiàn)生物安全的基本設備。獸醫(yī)實驗室中常用于實驗室廢棄物消毒處理，如離心管、移液槍頭等實驗耗材的消毒處理。

利用高壓蒸汽滅菌進行廢棄實驗耗材滅菌時，開啟高壓滅菌器電源后，必須先檢查水位是否在限定范圍內(nèi)，若水位過低應及時補足水量到合適范圍，方可使用。需要滅菌的物品放置不宜過于密集，要確保蒸汽能夠流通。使用該設備滅菌后，不能立即進行排氣泄壓，若違規(guī)泄壓會導致壓力沸點降低，這樣封閉的容器內(nèi)有可能發(fā)生劇烈的沸騰，使密封的離心管或其他密封性容器發(fā)生爆炸。使用后要等待溫度壓力降低以后，觀察儀器設備儀表或者指示燈，明確提示可以打開方可以開蓋。在進行高壓滅菌時，操作員不應離開現(xiàn)場，隨時觀察設備消毒運行情況，發(fā)現(xiàn)異常情況隨時處理。為了確保滅菌效果，操作員可以采購3M等品牌的專用溫度指示膠帶，消毒以后如果膠紙上的指示劑變色，如3M的溫度指示膠帶會出現(xiàn)黑色橫紋，則說明滅菌效果是可靠的。高壓蒸汽滅菌器產(chǎn)生的高溫蒸汽溫度可達121.3 ℃，操作人員一定要嚴格按照使用要求操作，在使用過程中可戴隔熱手套以免燙傷。

5 生物安全柜使用方法和注意事項

生物安全柜是生物實驗室必備的實驗儀器，是獸醫(yī)實驗室開展如非洲豬瘟病毒PCR檢測等涉及核酸提取操作的必備實驗設備，使用生物安全柜能夠有效地保護實驗操作者的生物安全。

生物安全柜過濾裝置是消耗品，一旦出現(xiàn)過濾器壽命終結的提示，應盡快停止使用，同時檢測機器是否存在其他異常。通知廠家專業(yè)人員對該設備進行過濾器完整性和氣流流速的檢測，若不能滿足要求，則禁止使用并立即通知相關人員更換空氣過濾器。在生物安全柜的實驗操作應控制動作幅度，特別是需要手臂移出的時候動作一定要慢、要穩(wěn)，以免過快過大的動作擾亂氣流，使病原微生物外溢。實驗所需要的物品盡量放置在正前方，避免經(jīng)常扭動頸部。在安全柜工作區(qū)域中合理擺放物品，減少操作距離。移動物品時使用整個肩膀和胳膊而不要只使用手腕。建議每持續(xù)2 h，休息5～10 min舒展和調(diào)節(jié)肢體，減少疲勞。使用生物安全柜時需做好個人生物安全保護措施，如戴好口罩、面罩等。

在實驗結束后要清理生物安全柜的臺面，避免造成污垢殘留。對于生物安全柜消毒的常規(guī)方法可以使用75%濃度的酒精，配合不掉屑的紗布清理為最佳。經(jīng)過實驗人員多年經(jīng)驗，不建議使用脫脂棉類的產(chǎn)品擦拭臺面，因為會造成細微棉絮掛在臺面上，長時間易滋生細菌。不建議使用含氯的清潔劑，如新吉爾滅等進行擦拭，含氯的清潔劑長期使用會對不銹鋼臺面造成一定的腐蝕。

如果安全柜發(fā)生報警，且常規(guī)檢查不能解決，那么就要聯(lián)系專業(yè)的維護工程師詢問如何解決，由工程師電話或現(xiàn)場指導，進行設備維護等工作。針對過濾器使用壽命到期，需要專業(yè)的工程師來進行熏蒸消毒后拆除更換，替換下來的過濾器要作為實驗廢物做專門處理，不可當作生活垃圾處理。

6 超純水機使用注意事項

獸醫(yī)實驗室中主要使用超純水機用于制備超純水，用來以配制PBS磷酸緩沖液，洗板機用后清洗管路等作用。

通過超純水取水時，要先放掉20～50 mL的水，為了避免混入空氣，可以讓純水沿容器壁流入，這樣就可以有效避免濺起水花混入空氣。能有效降低空氣帶來的污染；超純水機的最終端濾器后請不要連接軟管，直接取水才能獲得更高純度的超純水。不要使用長期儲存在儲水桶中的超純水，因為在長期儲存過程中，會有雜質(zhì)、微生物污染水質(zhì)，有可能會影響最終的實驗結果。超純水機中的過濾裝置需要定期更換或清洗，因為濾芯無法自動清洗、排除過濾出的雜質(zhì)，在雜質(zhì)長期積累后就會導致出水純度受到影響。

若是實驗室純水儀出現(xiàn)問題，或者濾芯需要更換而未能及時更換的間期，此時實驗室若需使用純水，最簡單的方式就是購買市面上的“娃哈哈”純凈水，該純凈水完全滿足獸醫(yī)實驗室所需要純凈水的標準要求。筆者多次使用“娃哈哈”純凈水配制PBS緩沖液，未見對實驗結構產(chǎn)生影響。

縣級獸醫(yī)實驗室擔負著我國基層動物疫病檢驗化驗等動物疫情防控任務，正確科學地使用獸醫(yī)實驗室的設備是影響檢驗結果的重要因素。基層獸醫(yī)實驗室檢驗化驗人員要不斷學習和總結實驗設備儀器的使用方法和注意事項，進而提高獸醫(yī)實驗室檢測能力，提高檢測結果準確率，為我國的縣鄉(xiāng)動物防疫工作的開展提供精確的實驗數(shù)據(jù)支撐。