豬圓環(huán)病毒3型感染現(xiàn)狀及檢測措施

劉 勇，鐘 楨，金 利，華 瑛，徐 艷

（內(nèi)蒙古自治區(qū)赤峰市動物疫病預(yù)防控制中心，內(nèi)蒙古 赤峰 024005）

豬圓環(huán)病毒系統(tǒng)性疾病是影響我國生豬養(yǎng)殖業(yè)主要的疾病之一。豬圓環(huán)病毒為無囊膜、單鏈環(huán)狀DNA病毒，是哺乳動物可感染的最小病毒之一。目前，已發(fā)現(xiàn)了4種基因型（PCV1～4）。PCV3于2015年首次在美國北卡羅萊納州母豬體內(nèi)檢測發(fā)現(xiàn)豬圓環(huán)病毒3型，經(jīng)調(diào)查顯示，患病母豬患有心臟與多系統(tǒng)并發(fā)癥、豬皮炎和腎病綜合征，通過對患病母豬檢測，排除了豬圓環(huán)病毒2型。借助宏基因組分析，鑒定出新型圓環(huán)病毒即豬圓環(huán)病毒3型。

1 國內(nèi)外流行現(xiàn)狀

繼美國首次發(fā)現(xiàn)豬圓環(huán)病毒3型后，亞洲、歐洲、南美洲多個國家都檢測出PCV3，該病毒迅速傳遍全球。2017年，廣東省首次報道了我國PCV3病例。隨后，湖南、廣西、福建、江西等地頻繁發(fā)布檢測出PCV3的相關(guān)報道。

研究者從韓國70多個養(yǎng)殖場采集了360份樣品，經(jīng)檢測總樣品PCV3陽性率為44.2%，總場陽性率為72.6%。病毒毒株基因序列與美國PCV3毒株同源性高達(dá)99.8%。來自西班牙的報道顯示，從4個農(nóng)場收集不同生長階段的豬群樣本，均檢測出PCV3，少數(shù)生豬感染周期較長，可達(dá)4～23周。波蘭的研究顯示，對14個養(yǎng)殖場3～20周齡豬群進(jìn)行血清檢測，僅有2個商業(yè)養(yǎng)殖場未檢測出PCV3，其余12個養(yǎng)殖場的總場陽性率可達(dá)85.7%。

2017年，我國關(guān)于PCV3感染情況的報道顯示，吉林省PCV3陽性率最高為100%，其次為廣東省44.29%。研究人員采集了江西省、重慶市和遼寧省的3個商業(yè)養(yǎng)殖場356頭出現(xiàn)繁育障礙與急性流產(chǎn)的母豬，檢測出唯一的病原體為PCV3。迄今為止，我國有26個省出現(xiàn)PCV3感染病例，陽性率出現(xiàn)逐年升高趨勢，并發(fā)現(xiàn)了與藍(lán)耳病混合感染、多種繼發(fā)感染的病例，給生豬養(yǎng)殖業(yè)帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

2 病原學(xué)特征

PCV3病毒粒子殼體結(jié)構(gòu)為二十面體，直徑為13～25納米，包括3個主要開放閱讀框（ORF1～3），ORF1是相對保守區(qū)域，負(fù)責(zé)編碼和病毒的復(fù)制酶蛋白（Rep）；ORF2為變異區(qū)域，氨基酸的結(jié)構(gòu)蛋白（Cap）與感染病毒及免疫密切相關(guān)。ORF3與ORF1位置相反，編碼推定蛋白，是病毒傳播的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，但是其蛋白功能尚不清楚。

3 傳播途徑與感染宿主

在患病母豬與死胎或陽性豬群的組織或體液中能夠檢測出PCV3的病毒核酸，表明PCV3存在于豬的心臟、淋巴結(jié)、脾臟、腦、扁桃體、唾液、乳汁和精液中，其中，肺臟、心臟與淋巴結(jié)中分布更多的病毒基因組。唾液中更容易檢測到PCV3（37.3%），顯示PCV3可經(jīng)糞口傳播。被感染的家豬或野豬，表現(xiàn)為輕癥或無癥狀，是PCV3的主要宿主，易感性較強，與動物生長階段、性別或健康狀況無關(guān)，各種類型的豬均可感染，對后備母豬與育肥豬的影響最為嚴(yán)重。對無癥狀野豬展開的跟蹤檢測結(jié)果表明，野豬體內(nèi)PCV3檢出率為42.66%，在體內(nèi)感染可持續(xù)數(shù)月。國外學(xué)者在其他家畜、野生哺乳動物及蜱的體內(nèi)均檢測到PCV3，該病毒跨物種傳播能力較強。研究者在山東省牛群的血清進(jìn)行PCR檢測，陽性率為34.7%。在我國豬養(yǎng)殖場內(nèi)的蚊子中檢測到了PCV3。德國研究者發(fā)現(xiàn)PCV3在狒狒體內(nèi)傳播，狒狒接受了豬心臟移植，出現(xiàn)延長病毒復(fù)制的現(xiàn)象。

4 實驗室檢測方法

病原學(xué)方法與血清學(xué)方法是檢測PCV的主要方法，PCR檢測是病原學(xué)主要的檢測方法，包含常規(guī)PCR、套氏PCR、熒光定量PCR、與其他PCR技術(shù)。研究者通過免疫熒光法，觀察到PCV3特異性小鼠陽性感染細(xì)胞中存在較強的熒光反應(yīng)，證實PCV3感染了PK-15細(xì)胞。宏基因組測序法是首次檢測出PCV3的病原菌檢測法。酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)是檢測PCV3抗體含量主要的血清學(xué)檢測方法。我國研究者采集2015～2017年的樣本，重組Cap蛋白，建立PCV3間接ELISA診斷法，并從2015年血清樣本中檢測出PCV3抗體。另有研究人員使用桿狀病毒表達(dá)的Cap蛋白，建立了PCV3IgG間接ELISA檢測法，對1038份來自與湖南省的樣品進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示樣本中PCV3血清陽性率較高，繁殖障礙母豬陽性率明顯高于健康母豬。隨著對PCV3研究的深入，更多便捷高效的檢測方法將被應(yīng)用于PCV3臨床診斷，應(yīng)依據(jù)實際癥狀選擇適宜的檢測方法對該病進(jìn)行診斷。

PCV3為養(yǎng)豬業(yè)帶來嚴(yán)重的威脅，增強PCV3病毒檢測，做到早檢測、早預(yù)防、減少病毒的傳播，保證生豬養(yǎng)殖健康發(fā)展。