QuEChERS-氣相色譜法測定茶葉中格螨酯殘留量

◎王同珍，柯麗群，張泳儀

（廣東省中鼎檢測技術有限公司，廣東 東莞 523000）

我國是茶葉生產和消費大國，規?；铇涞姆N植離不開農藥的使用，因此難以避免農藥殘留問題[1-4]?！妒称钒踩珖覙藴?食品中農藥最大殘留限量》（GB 2763-2021）中規定了茶葉中106 項農藥殘留限量標準[5]，包括格螨酯的最大殘留量，然而目前尚未有格螨酯檢測的相關國家標準。基于此，本文建立一種基于QuEChERS 前處理技術結合氣相色譜測定茶葉中格螨酯殘留的檢測方法，以供相關人員參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

普通茶葉，市場采購。

標準物質格螨酯（純度≥99.5%，德國DR.Ehrenstorfer 公司）；正己烷、丙酮、乙腈（色譜純，美國Merck 公司）；無水硫酸鎂（優級純，天津科密歐）；醋酸鈉（優級純，天津大茂）；乙二胺-N-丙基硅烷（PSA，40～63 μm，上海安譜）；0.22 μm有機濾膜（天津津滕公司）實驗室用水為Milli-Q超純水；乙腈（色譜純，美國Sigma 公司）。

1.2 儀器與設備

Agilent 7890B 氣相色譜儀（美國安捷倫公司）；BSA224S 電子天平（精度為0.000 1 g，美國賽多利斯公司）；METTLERMS105 電子天平（精度為0.000 01 g，美國梅特勒公司）；VX-Ⅲ多管渦旋振蕩器（安簡科技公司）；M64 高通量平行濃縮儀（萊伯泰科公司）；GTR16-2 高速冷凍離心機（北京時代北利公司）。

1.3 實驗方法

1.3.1 樣品前處理

將茶葉樣品放入樣品粉碎機中粉碎，樣品全部過20 目的標準網篩，得到均勻的茶葉樣品。稱取2.5 g試樣于50 mL 塑料離心管，加10 mL 水靜置30 min，加入10 mL 乙腈、6 g 硫酸鎂、1.5 g 醋酸鈉，劇烈振蕩1 min 后，6 500 r·min-1離心3 min，吸取6 mL 上清液到含900 mg 硫酸鎂及150 mgPSA 的15 mL 離心管中，渦旋混勻1 min。6 500 r·min-1離心3 min，準確吸取2 mL 上清液于15 mL 離心管中，氮吹濃縮至近干，1 mL 丙酮復溶，過0.22 μm 有機濾膜，供GCECD 儀器分析。

1.3.2 標準溶液的配制

標準儲備液（1 mg·mL-1）：稱取10 mg 格螨酯標準物質（精確至0.000 01 g）于10 mL 容量瓶，用正己烷定容至刻度，混勻，避光-18 ℃保存。

標準中間液（5 μg·mL-1）：準確移取格螨酯儲備液（1 mg·mL-1）125 μL 到25 mL 容量瓶，正己烷定容至刻度，混勻，避光-18 ℃保存。

基質工作液：稱取不含格螨酯的茶葉陰性樣品2.5 g試樣于50 mL 塑料離心管，加10 mL 水靜置30 min，加入10 mL 乙腈、6 g 硫酸鎂、1.5 g 醋酸鈉，劇烈振蕩1 min 后，6 500 r·min-1離心3 min，吸取6 mL 上清液到含900 mg 硫酸鎂及150 mg PSA 的15 mL 離心管中，渦旋混勻1 min。6 500 r·min-1離心3 min，準確吸取2 mL 上清液于15 mL 離心管中，氮吹濃縮至近干，加入1 mL 相應濃度的標準工作液復溶，過微孔濾膜，配制成0.005 μg·mL-1、0.010 μg·mL-1、0.020 μg·mL-1、0.050 μg·mL-1、0.100 μg·mL-1、0.200 μg·mL-1、0.500 μg·mL-1標準系列溶液，現配現用。

1.3.3 儀器條件

檢測器：Agilent 7890B（ECD）；色譜柱：Agilent 19091J-413 HP-5（30 m×320 μm，0.25 μm）；進樣口溫度：280 ℃；進樣量：1 μL；柱箱升溫程序：130 ℃（0.5 min）→40 ℃（1.0 min）→220 ℃（1.0 min）→25 ℃（1.0 min）→300 ℃（1.0 min）；載氣流量：2 mL·min-1；檢測器溫度：340 ℃。

1.3.4 計算公式

試樣中格螨酯含量的計算公式為

式中：x 為試樣中格螨酯的含量，mg·kg-1；c 為從基質曲線中得到的被測樣液中格螨酯的溶液濃度，μg·mL-1；v 為試樣溶液的定容體積，mL；m 為試樣的稱取質量，g；f 為試樣的稀釋倍數。

2 結果與分析

2.1 試樣前處理的選擇

茶葉樣品含水量較少，本研究稱取2 份2.5 g 不含格螨酯的陰性樣品，均添加0.10 mg·kg-1格螨酯標液，一份樣品按照1.3.1 節進行前處理，另一份樣品除不加入10 mL 水，其余步驟按照1.3.1 節進行前處理，平行測定6 次，以格螨酯的回收率和相對標準偏差（RSD%）評價2 種不同的前處理，結果如表1 所示。結果表明，稱取樣品后，加入10 mL 水，能夠提高樣品的提取效率和試驗的穩定性。

表1 樣品處理結果表

2.2 基質效應考察

基質效應指茶葉樣品中除格螨酯以外的其他成分對格螨酯測定值的影響，通常包括抑制或者增加格螨酯響應2 個方面。合理評價基質效應的影響，并選擇適當的方法減少或者消除茶葉基質對格螨酯的影響，可以提高格螨酯測定的準確性。按照1.3.1 節進行前處理，得到茶葉基質溶液，分別用茶葉基質溶液和正己烷試劑，配制基質曲線與溶劑曲線（正己烷），對比相同質量濃度格螨酯的峰面積，進而評估茶葉的基質效應，結果如表2 所示，表明茶葉基質對格螨酯有較強的抑制作用，格螨酯的茶葉基質峰面積與提取溶劑峰面積的比值均小于0.70。因此，本研究選擇空白茶葉基質曲線進行定量，從而達到減小茶葉基質影響的目的。

表2 基質效應考察表

2.3 線性范圍

以格螨酯的質量濃度（X，μg·mL-1）為橫坐標，峰面積Y為縱坐標，繪制基質曲線，結果見表3。由表3 可知，格螨酯在0.005～0.500 μg·mL-1質量濃度范圍內線性關系良好，相關系數R2大于0.995，可通過基質曲線方程對樣品中的格螨酯進行準確定量。

表3 格螨酯基質曲線方程表

2.4 定量限、加標回收和精密度

稱取一系列陰性樣品2.5 g 試樣于50 mL 塑料離心管，添加濃度為0.010 mg·kg-1、0.050 mg·kg-1、0.500 mg·kg-1的格螨酯標液，加10 mL 水靜置30 min，按照1.3.1 中的步驟進行處理，所得樣液供GC-ECD 儀器分析，結果如表4 所示。在0.010 mg·kg-1添加水平下，格螨酯回收率為62.1%～73.2%，相對標準偏差（RSD）為5.39%（n=6）；在0.050 mg·kg-1添加水平下，格螨酯回收率為69.8%～80.7%，相對標準偏差（RSD）為6.11%（n=6）；在0.5 mg·kg-1添加水平下，格螨酯回收率為78.9%～95.1%，相對標準偏差（RSD）為7.93%（n=6）。結果表明，在0.010 mg·kg-1的添加水平下，能準確地定量，回收率良好，信噪比大于10，故本方法定量限為0.010 mg·kg-1。

表4 格螨酯3 水平加標回收結果表（n=6）

3 結論與討論

建立茶葉中農藥殘留格螨酯的QuEChERS-氣相色譜測定方法。試樣經復水，乙腈提取、QuEChERS 凈化，采用HP-5 色譜柱分離，電子捕獲檢測器（ECD）檢測，外標法定量。在優化實驗條件下，格螨酯在0.005～0.500 μg·mL-1線性良好，線性相關系數為0.997 3。在陰性樣品添加0.010～0.500 mg·kg-1的格螨酯，平行檢測6 次，回收率為62.1%～95.1%，相對標準偏差為5.39%～7.93%。該方法靈敏度高、準確性好、重復性好，適用于茶葉中格螨酯的殘留檢測。