6 種藥劑對黃野螟不同齡期幼蟲的室內毒力測定

陳人豪，鄭偉，田樂宇，黃海，韋建杏

1.海南省楓木實驗林場，海南屯昌 571600；

2.海南大學林學院，海南海口570228

白木香屬瑞香科白木香屬，是中國特有的藥用植物。白木香在受到傷害后產生的含有樹脂的木材稱作沉香，具有治療胸腹脹悶疼痛、胃寒嘔吐呃逆及腎虛氣逆喘急等的功效[12]。白木香也是海南省珍貴的鄉土樹種之一，目前白木香種植面積現已達6666.67hm2，約900 萬株，遍布了海南省主要市縣。由于白木香國際市場需求量大，價值攀高，長期以來白木香野生資源遭到嚴重破壞，現已被列為國家二級瀕危保護植物[13]。

黃野螟是海南省各大白木香種植產區危害最嚴重的食葉害蟲，有著暴發性、暴食性、世代重疊等特點。前人對黃野螟的生物學特性研究表明，黃野螟幼蟲可分為5 齡，危害程度隨幼蟲齡期的增長而增大，每個世代幼蟲齡期的增長歷時平均為15d，1齡～2 齡幼蟲常群集取食葉肉，留下白色膜狀表皮，3 齡及以上幼蟲取食葉片，形成缺刻或吃光全葉，食物不足時，還會取食嫩枝條皮層、花、果皮[1]。初步統計每年海南黃野螟危害白木香300 萬株以上，平均蟲口密度達86/株，發生嚴重時，被害株率可達90%以上[14]。

目前，黃野螟的常見防治方法有生物防治[2]、物理防治[3]及化學防治，其中化學防治又是研究相對較廣的防治手段。前人對黃野螟幼蟲進行過多種生物和化學藥劑試驗發現乙基多殺菌素、乙多·甲氧酰肼、甲維·茚蟲威、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、森得保、苯氧威、高效氯氰菊酯等均有較好的防治效果[4-8]，然而這些研究很少考慮藥劑對黃野螟不同齡期幼蟲的防效，且長期使用單一類型的化學藥劑以及不恰當的施用濃度隨意對黃野螟不同發育階段幼蟲進行防治，更易使黃野螟產生抗藥性，進而導致田間防治達不到預期效果，因此針對黃野螟不同齡期幼蟲科學選擇藥劑種類及濃度尤為重要。該研究通過參考前人的防治試驗結果，選擇了6 種不同類型的常用藥劑，采用室內浸葉法測定了各藥劑對不同齡期黃野螟幼蟲的毒力，以期為黃野螟的田間防治提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

黃野螟幼蟲采集自海南省屯昌縣楓木實驗林場白木香苗圃，于室內人工氣候箱中飼養，飼養條件為：溫度24℃±2℃、相對濕度80%±5%、光周期L:D=12.5:11.5。不同齡期幼蟲放置在不同養蟲盒中，喂食新鮮白木香葉片。

1.2 供試藥劑

4.5%高效氯氰菊酯(EW)；20 億PIB/mL 棉鈴蟲核型多角體病毒（SC）；5%氯蟲苯甲酰胺(SC)；18%殺蟲雙(AS)；0.3%苦參堿（AS）；30%敵百蟲(EC)。

1.3 試驗方法

采用浸葉飼喂法進行室內毒力測定。根據藥劑每畝推薦劑用量的有效成分濃度將6 種供試藥劑用純凈水稀釋為5 個濃度梯度（表1）。由于核型多角體病毒單位不統一，采用張勝蘭等[9]的定量換算方法進行換算：取1mL 樣品于離心管，4000r/min 轉速下離心20min，棄除上清液，風干后稱量沉淀質量進行轉換。選取新鮮幼嫩白木香葉片5 片～6 片浸入藥劑10s 取出，自然晾干后置于干凈養蟲瓶內，每種濃度處理黃野螟各齡期幼蟲30 頭，重復3 次，設立1 組清水對照組（CK），在室溫條件下觀察24h 后的幼蟲死亡數，毛筆輕觸蟲體無反應則記為死亡，對照組死亡率不能超過10%。

表1 供試藥劑及使用濃度Tab.1 The Working Concentration of the Test Insecticide

1.4 數據分析

使用Excel 2020 整理原始數據，計算6 種藥劑處理24h 后黃野螟幼蟲的死亡率和校正死亡率。使用SPSS 22.0 的Probit 回歸分析，得出6 種藥劑的毒力回歸方程、相關系數、半致死濃度（LC50）及95%置信區間。

2 結果與分析

2.1 幾種藥劑處理黃野螟不同齡期幼蟲的死亡率

由表2 可知，處理24h 后，各齡期幼蟲死亡率隨著藥劑濃度的降低而減小。4.5%高效氯氰菊酯5 種濃度對1 齡～3 齡幼蟲致死率與4 齡～5 齡幼蟲致死率具有極顯著差異。其中1 齡～3 齡幼蟲的致死率均大于70.00%，最高致死率達100.00%，而對4齡～5 齡幼蟲的藥效較弱，致死率均小于50.00%；20億PIB/ml 棉鈴蟲核型多角體病毒140.06mg·L-1對5 個齡期幼蟲的致死率均為100.00%、46.69mg·L-1對5 個齡期幼蟲致死率無顯著差異，35.02mg·L-1、87.54mg·L-1兩個濃度對5 齡幼蟲的藥效與1 齡～4齡幼蟲均具有顯著差異，23.34mg·L-1對5 齡幼蟲的致死率最低僅有53.33%；5%氯蟲苯甲酰胺隨蟲齡的增大及濃度的減小，藥效明顯減弱，對3 齡～5 齡幼蟲致死率均未達到50.00%，且多個濃度致死率為0.00%，對1 齡幼蟲的致死率較高，但相比其他藥劑，該藥劑藥效偏低；18%殺蟲雙選擇的5 種濃度較大，對1 齡～4 齡幼蟲致死率均大于60.00%，對5 齡幼蟲致死率均小于60.00%，差異顯著；0.3%苦參堿對5個齡期幼蟲的藥效俱佳，僅有2.00mg·L-1濃度對2齡幼蟲的致死率小于80.00%；30%敵百蟲對1 齡～4齡幼蟲的致死率均大于80.00%，藥效較好，但選用濃度相較于其他藥劑偏大，且不同濃度對5 齡幼蟲的致死率存在明顯差異，375.00mg·L-1、300.00mg·L-1致死率均小于50.00%。

表2 6 種藥劑不同濃度處理黃野螟不同齡期幼蟲的死亡率Tab.2 Mortality Rate of Six Insecticides Against Different Instar Larvae of Heortia vitessoides

6 種藥劑對1 齡幼蟲的致死率為71.11%～100.00%，藥效差異性相對較小；對2 齡幼蟲致死率為28.69%～100.00%，5%氯蟲苯甲酰胺低濃度藥效與其他藥劑對比存在明顯差異；對3 齡幼蟲致死率為2.22%～100.00%，5%氯蟲苯甲酰胺各濃度致死率均比其他藥劑低、其次18%殺蟲雙低濃度藥效較其他藥劑差異明顯、0.3%苦參堿和30%敵百蟲兩種藥劑藥效無顯著差異；對4 齡幼蟲致死率為0～100.00%，5%氯蟲苯甲酰胺、4.5%高效氯氰菊酯和18%殺蟲雙三種藥劑藥效具有顯著差異、0.3%苦參堿和30%敵百蟲兩種藥劑藥效差異不顯著；對5 齡幼蟲致死率為100.00%，各藥劑之間藥效差異顯著，除0.3%苦參堿和5%氯蟲苯甲酰胺，其他藥劑的高低濃度藥效差異均顯著。

2.2 幾種藥劑對黃野螟不同齡期幼蟲的毒力測定

由表3 可知，藥后24h，4.5%高效氯氰菊酯對1齡幼蟲的毒力最大，3 齡和2 齡次之，分別為0.71、0.60 倍，對4 齡和5 齡的毒力相對較小，分別為0.08、0.09 倍；20 億PIB/ml 棉鈴蟲核型多角體病毒對5個齡期幼蟲的毒力相對均勻，其中對2 齡幼蟲的毒力最大，對5 齡幼蟲的毒力最小，分別是1 齡幼蟲的1.24、0.69 倍；5%氯蟲苯甲酰胺對2 齡～5 齡幼蟲的毒力指數分別為1 齡幼蟲的0.53、0.20、0.07、0.10倍，對1 齡幼蟲的毒力最大，對4 齡幼蟲的毒力最小；18%殺蟲雙對5 個齡期幼蟲的毒力不均勻，2齡～5 齡幼蟲的相對毒力指數分別為1 齡幼蟲的0.99、0.62、0.77、0.09 倍，藥效隨蟲齡的遞增上下波動，對5 齡幼蟲的毒力明顯偏小；0.3%苦參堿對5齡幼蟲的毒力最大，相對毒力指數為1 齡幼蟲的1.56 倍；對2 齡幼蟲的毒力最小，相對毒力指數僅為1 齡幼蟲的0.16 倍；30%敵百蟲毒力隨幼蟲齡期的增長出現不規則增減，對2 齡和5 齡幼蟲的毒力偏小，相對毒力指數是1 齡幼蟲的0.40、0.13 倍；對4 齡幼蟲的毒力最大，其相對毒力指數是1 齡幼蟲的1.33 倍。

表3 6 種藥劑對黃野螟不同齡期幼蟲的毒力Tab.3 Toxicity of Six Insecticides Against Different Instar Larvae of Heortia vitessoides

6 種藥劑對1 齡幼蟲的LC50 值在0.336mg·L-1～129.511mg·L-1之間，0.3%苦參堿的藥效最佳，18%殺蟲雙的藥效最弱，其相對毒力指數僅有0.07；對2 齡幼蟲LC50值在2.080mg·L-1～127.046mg·L-1之間，同為0.3%苦參堿的毒力最佳，18%殺蟲雙和30%敵百蟲毒力較小；對3 齡幼蟲LC50值在0.386mg·L-1～106.518mg·L-1之間，最大毒力藥劑為0.3%苦參堿，最小毒力藥劑為18%殺蟲雙；對4 齡～5 齡幼蟲的LC50值分別在0.422mg·L-1～203.893mg·L-1和0.279mg·L-1～702.261mg·L-1之間，0.3%苦參堿對兩個齡期幼蟲的相對毒力指數均遠大于其他5種藥劑，5%氯蟲苯甲酰胺對4 齡幼蟲毒力最弱，18%殺蟲雙對5 齡幼蟲毒力最弱。

3 結論與討論

3.1 結論

試驗選用6 種常用藥劑，通過不同濃度處理黃野螟5 個齡期幼蟲24h 后的毒殺效果，篩選出最佳防治藥劑。6 種藥劑中除5%氯蟲苯甲酰胺，其余5 種對黃野螟低齡幼蟲（1 齡～3 齡）均具有較強的觸殺作用，以0.3%苦參堿水劑毒力最佳，5%氯蟲苯甲酰胺對1 齡幼蟲的毒力效果也較為良好，但對1 齡以上的幼蟲毒力效果明顯下降。對于高齡幼蟲（4 齡～5 齡），20 億PIB/ml 棉鈴蟲核型多角體病毒和0.3%苦參堿均具有良好的毒殺效果，30%敵百蟲對4 齡幼蟲也具有較好的毒效。每種藥劑藥效均隨濃度的降低而降低。考慮到生態環保問題，0.3%苦參堿可以選用6.00mg·L-1濃度防治黃野螟高齡幼蟲、選用10.00mg·L-1防治低齡幼蟲；20 億PIB/ml 棉鈴蟲核型多角體病毒可以選用46.69mg·L-1防治高齡幼蟲、選用35.02mg·L-1防治低齡幼蟲。

3.2 討論

研究表明，初孵幼蟲表皮薄，體內的水解酶、解毒酶活性較低，藥劑觸殺作用更為明顯，隨著蟲齡的增加，發育逐漸完全，藥劑穿透速率降低，藥效也就隨之降低[10]。6 種藥劑除了0.3%苦參堿，其余5 種對黃野螟幼蟲的致死率均表現出低齡幼蟲較高齡幼蟲的死亡率高。魯艷輝等[11]通過比較26 種殺蟲劑對草地貪夜蛾三個發育階段的毒力發現多數藥劑對初孵幼蟲的藥效明顯高于中、高齡幼蟲。因此表明黃野螟的防治應在幼蟲低齡期進行。

高效氯氰菊酯屬于擬除蟲菊酯類殺蟲劑，CHEN Z Y 等[7]使用4.5%高效氯氰菊酯對黃野螟高齡和低齡幼蟲進行室內毒力測定發現該藥劑對低齡幼蟲的致死率均達100.00%，對高齡幼蟲致死率也在90.00%以上，與該試驗結果近似。邱瓊等[5]使用2.5%高效氯氰菊酯對黃野螟幼蟲進行林間防治試驗得出低濃度配劑有更明顯的觸殺作用，高濃度也有一定的胃毒作用，施藥4d 后的校正死亡率均為100.00%。氯蟲苯甲酰胺屬于酰胺類內吸殺蟲劑，作用效果遲緩，彭思穎等[4]研究發現氯蟲苯甲酰胺處理黃野螟幼蟲24h 后的致死率相比其他類型藥劑要低得多，該研究結果也表明該藥劑對黃野螟幼蟲的藥效較低。殺蟲雙屬于沙蠶毒素類殺蟲劑，是一種神經毒劑，目前還尚未見該類型藥劑防治黃野螟的相關研究，該研究結果顯示殺蟲雙的藥效較差，對5 個齡期幼蟲的致死中濃度均較大。敵百蟲是一種有機磷類殺蟲劑，Chen Z Y 等[7]使用90%敵百蟲原藥配置三種濃度得到其對黃野螟高齡幼蟲的致死率為93.10%～100.00%，而該試驗中不同濃度處理5 齡幼蟲的致死率有著較大差異。出現這一情況的可能原因為試驗選用的5 齡幼蟲發育時間不一致，在低濃度處理的同時選用了接近蛹期的5 齡幼蟲，導致幼蟲進食量少而未達到理論藥效。棉鈴蟲核型多角體病毒和苦參堿均為生物殺蟲劑，該類型藥劑有著安全無公害等特點，推行、應用廣泛，周亞奎等[6]測定了20 億PIB/g 棉鈴蟲核型多角體病毒和0.3%苦參堿兩種藥劑對黃野螟幼蟲的毒力和田間藥效，發現兩種藥劑的致死中濃度與田間試驗藥后1d 的致死率與該研究相差較大，可能原因為兩種藥劑的配置濃度均要高于前者，而高濃度配劑對黃野螟幼蟲有更好的觸殺作用。室內毒力測定僅為用藥選擇提供指導，選出的兩種生物殺蟲劑及濃度對黃野螟的田間效果還有待進一步驗證，該試驗測定時間是施藥24h 后，研究過程中發現幼蟲會出現中毒現象，在一段時間后又會恢復活力，所以需要選擇以更長的藥后時間進行試驗驗證藥效。