基于微RNA-22-3p探討雙醋瑞因聯合依托考昔治療痛風性關節炎的作用機制

安麗欣，張倩，李昆，劉耔序，石蕊

作者單位：秦皇島市第一醫院風濕免疫科，河北 秦皇島066000

痛風是由嘌呤代謝異常導致的反復發作性疾病［1］。有研究指出，40 歲以上男性人群是痛風性關節炎的高發人群［2］。目前臨床中在對痛風性關節炎病人進行治療時采用的傳統藥物多具有多種不同不良反應，因此亟待尋找不良反應少、新型、自源頭有效阻斷痛風發生藥物［3］。研究結果表明，在急性痛風性關節炎病人體內包括白細胞介素（IL）-1等炎性細胞因子起到重要作用，且IL-1 阻斷劑已逐漸成為對痛風性關節炎病人的選擇之一，因此雙醋瑞因聯合依托考昔聯合應用已逐漸成為重要的臨床治療方案，但其作用機制仍未見報道［4］。有研究認為，微RNA（miR）-22-3p 簇具有調節炎癥反應的作用［5］。因此本研究擬選擇痛風性關節炎病人作為研究對象，基于miR-22-3p分析雙醋瑞因聯合依托考昔治療痛風性關節炎的作用機制，為臨床應用提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2021 年3—9 月秦皇島市第一醫院收治的80例痛風性關節炎病人作為研究對象，并依照隨機信封法分為觀察組和對照組，每組40例。觀察組中男34 例，女6 例，年齡（48.92±5.19）歲，體質量指數（BMI）（25.49±0.74）kg∕m2，對照組中男35 例，女5 例，年齡（49.18±5.23）歲，BMI（25.37±0.68）kg∕m2，同期選擇50 例高尿酸血癥病人作為高尿酸組，其中男42 例，女8 例，年齡（48.39±6.02）歲，BMI（25.34±0.72）kg∕m2，三組性別、年齡及BMI 等一般資料差異無統計學意義（P＞0.05）。本研究經秦皇島市第一醫院倫理委員會審議并批準（院字〔2020〕13號）。

1.2 納入與排除標準

1.2.1納入標準（1）符合美國風濕病協會痛風診斷標準；（2）納入前3 個月內未使用過激素類藥物者；（3）納入前接受痛風性關節炎藥物治療；（4）臨床資料完整，知情并簽署知情同意書。

1.2.2排除標準（1）精神障礙等疾病者；（2）伴有肝、腎、心、腦和造血系統等嚴重原發性疾病者；（3）無法合作者；（4）伴有嚴重肝腎功能不全者；（5）病人及家屬未簽署知情同意書者。

1.3 治療方法對照組給予依托考昔進行治療，每天一次口服120 mg 依托考昔，持續治療一周。觀察組在對照組基礎上給予每天一次口服50 mg 雙醋瑞因。高尿酸組病人每天口服50 mg 苯溴馬隆進行排尿酸治療。病人治療期間足量飲水，避免關節損傷，避免高嘌呤食物，嚴格戒酒，避免情緒緊張、過度勞累、久處濕冷環境。

1.4 觀察指標治療后參照《中藥新藥臨床指導原則》中標準對病人治療臨床療效進行判斷，共分為治愈、顯效、有效、無效。治愈：病人關節活動正常，紅腫、疼痛等癥狀消失，癥候積分減少95%以上；顯效：病人關節活動不受限制，紅腫、疼痛癥狀消失，癥候積分減少70%～94%；有效：病人關節活動受輕度限制，關節紅腫、疼痛癥狀基本消失，癥候積分減少30%～69%；無效：病人關節活動情況無明顯改善，病人關節紅腫、疼痛情況未見好轉，癥候積分減少30%以下。治療前及治療后采用數字等級量表（NRS-11）對病人關節疼痛進行調查，滿分11 分，分數越高疼痛越嚴重。同時對病人癥狀體征積分進行評估，共包括三個維度分別為關節壓痛、關節急性紅腫及關節活動障礙情況，采用三級評分法，分數越高臨床癥狀越嚴重。治療前后采集受試者空腹靜脈血，行實驗室指標檢查包括C 反應蛋白（CRP）、血沉、肌酐、尿酸，并行ELISA 檢測受試者血清中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、IL-1、IL-6、IL-8 水平；采用密度梯度離心法分離外周血中單個核細胞（PBMCs），提取外周血PBMCs 中總RNA 水平，后采用實時熒光定量PCR 法進行檢測其中miR-22-3p 及U6 基因水平，并以2-ΔΔCt對基因相對表達水平進行計算。

1.5 統計學方法采用SPSS 23.0 軟件進行數據分析，結果數據近似正態分布以描述，組間比較采用t檢驗，多組間兩兩比較采用單因素的方差分析，采用Spearman 相關性檢驗分析miR-22-3p 探討雙醋瑞因聯合依托考昔治療痛風性關節炎療效相關性，采用線性回歸模型分析miR-22-3p 與尿酸水平關系。計數資料（臨床療效）以例（%）表示，行χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組臨床療效比較研究結果顯示，觀察組病人治療臨床總有效率為97.50%，顯著高于對照組的90.00%（P＜0.05），見表1。

表1 痛風性關節炎80例臨床療效比較∕例（%）

2.2 兩組病人NRS-11 及癥狀體征積分比較研究結果顯示，治療前兩組病人NRS-11及癥狀體征積分差異無統計學意義（P＞0.05），治療后兩組病人NRS-11 及癥狀體征積分均顯著低于治療前（P＜0.05），觀察組病人治療后NRS-11 及癥狀體征積分均顯著低于對照組（P＜0.05）。見表2。

表2 痛風性關節炎80例數字等級量表（NRS-11）及癥狀體征積分比較∕（分，）

表2 痛風性關節炎80例數字等級量表（NRS-11）及癥狀體征積分比較∕（分，）

2.3 兩組病人血中實驗室指標比較治療前兩組病人血中CRP、血沉、肌酐、尿酸差異無統計學意義（P＞0.05），治療后兩組病人CRP、血沉、肌酐、尿酸均明顯低于治療前（P＜0.05），且治療后觀察組均顯著低于對照組（P＜0.05）。見表3。

表3 痛風性關節炎80例血中實驗室指標比較∕

表3 痛風性關節炎80例血中實驗室指標比較∕

注：CRP為C反應蛋白。

2.4 兩組病人治療前后炎性因子水平比較治療前兩組病人血中IL-1、IL-6、IL-18、TNF-α 差異無統計學意義（P＞0.05），治療后兩組病人IL-1、IL-6、IL-18、TNF-α 均顯著低于治療前（P＜0.05），且治療后觀察組均顯著低于對照組（P＜0.05），見表4。

表4 痛風性關節炎80例治療前后炎性因子水平比較∕（ng∕L，）

表4 痛風性關節炎80例治療前后炎性因子水平比較∕（ng∕L，）

注：IL-1為白細胞介素-1，IL-6為白細胞介素-6，IL-8為白細胞介素-8，TNF-α為腫瘤壞死因子。

2.5 三組病人治療前后miR-22-3p 水平比較治療前觀察組和對照組病人血中miR-22-3p 水平差異無統計學意義（P＞0.05），治療后兩組病人miR-22-3p水平顯著高于治療前（P＜0.05），觀察組高于對照組，（P＜0.05）；治療前高尿酸組病人血中miR-22-3p 水平均明顯高于觀察組和對照組（P＜0.05）。見表5。

表5 痛風性關節炎80例和高尿酸血癥50例治療前后miR-22-3p水平比較∕

表5 痛風性關節炎80例和高尿酸血癥50例治療前后miR-22-3p水平比較∕

2.6 治療后觀察組病人血中miR-22-3p 與尿酸的關系本組研究結果顯示，治療后觀察組病人血中miR-22-3p 與尿酸水平呈顯著負相關關系，其相關性模型為Y=-119.58X+488.87，R2=0.914 3。

2.7 治療后觀察組病人血中miR-22-3p 與治療療效的關系研究結果顯示，痛風性關節炎病人血中miR-22-3p 與雙醋瑞因聯合依托考昔治療臨床療效呈顯著性負相關關系（r=-0.64，P＜0.05）。

3 討論

痛風臨床中共表現3 個階段即急性痛風發作期、高尿酸血癥、慢性痛風［6］。有研究指出，痛風病程遷延難愈，臨床中主要表現為關節畸形、痛風石、尿酸性尿路結石、慢性間質性腎炎等［7］。單鈉尿酸鹽結晶是目前公認的痛風致病因子，一般情況下關節軟骨淺層是尿酸鹽結晶主要形成部位。痛風病人臨床中主要表現為痛風石性痛風、反復發作性急性關節炎、尿酸性腎病、尿酸性尿路結石、關節殘疾畸形、腎功能不全［8-9］。

近年來流行病學研究結果表明，全球范圍內痛風的臨床發病率和患病率均呈現明顯逐年上市趨勢［10］，且也伴隨出現一定的年輕化趨勢。治療藥物是目前痛風治療的主要手段，并具有較高的臨床療效，但采用藥物方案治療過程中均可能導致病人出現不同程度不良反應［11］。有學者通過表觀遺傳學研究顯示，在痛風的治療過程中遺傳因素在其中扮演重要角色，且表觀遺傳學的可逆性也提示其可稱為對痛風進行靶向治療和早期診斷的方案之一［12］。本組研究結果顯示，治療后觀察組病人NRS-11及癥狀體征積分均明顯低于對照組，治療后觀察組病人CRP、血沉、肌酐、尿酸、IL-1、IL-6、IL-18、TNF-α均明顯低于對照組。分析認為，采用雙醋瑞因聯合依托考昔治療痛風性關節炎后可有效提高病人治療臨床療效，降低病人體內炎性因子及實驗室指標，改善病人臨床癥狀。

作為體內基因重要的表達調控因子，miRNA 在多種細胞的分化、生長、發育、凋亡過程中扮演重要的角色，且miRNA 表達失調可能導致機體出現不同程度的炎癥性疾病、免疫功能紊亂、自身免疫性疾病，但miRNA 在痛風發生發展中的作用機制仍鮮有報 道［13-14］。miR-22-3p 是 體內中的高度保守miRNAs，并在體內炎癥調節、免疫應答等方面扮演重要角色。類風濕關節炎病人滑膜組織、PBMC 中smiR-22-3p 呈明顯的高表達狀態，與TNF-α、IL-1 等炎性因子關系密切，在系統性紅斑狼瘡病人PBMCs 中miR-22-3p 表達則顯著降低［15-16］。研究發現，相較于健康者或間歇期痛風病人，在原發性急性痛風性關節炎病人體內miR-22-3p 呈現明顯的低表達狀態［17-18］。本研究顯示觀察組病人治療后miR-22-3p水平明顯高于對照組，分析病人各指標與尿酸水平關系結果顯示，治療后觀察組病人血中miR-22-3p與尿酸水平呈顯著負相關關系，其相關性模型為Y=-119.58X+488.87。進一步分析miR-22-3p 與病人治療療效關系顯示，痛風性關節炎病人血中miR-22-3p 與雙醋瑞因聯合依托考昔治療臨床療效呈顯著性負相關關系。分析認為，采用雙醋瑞因聯合依托考昔治療痛風性關節炎后可有效調控病人體內miR-22-3p 水平，進而有效調控病人體內尿酸水平，改善病人治療療效。

但本研究臨床樣本數較少，且并未對病人體內miR-22-3p 的動態變化水平進行監測，有待后續持續研究和追蹤。