含揮發油飲片配方顆粒國家標準現狀與制定技術對策分析

趙劍鋒，張雪，祁進，宋宗華*

1.國家藥典委員會，北京 100061；

2.北京市藥品檢驗研究院，北京 102206

2021 年11 月1 日，為期27 年的中藥配方顆粒試點工作結束，由國家藥品監督管理局頒布的首批160 個中藥配方顆粒國家標準同步實施。截至目前，國家藥品監督管理局已分2批頒布了196個中藥配方顆粒的國家標準，其中連翹（青翹）、蒼術（北蒼術）、荊芥、肉桂、薄荷與其他飲片配方顆粒在制法上存在一定差異，除煎煮、濃縮、干燥、制粒等共有工序外，還涉及揮發油提取及包合工序。揮發油是廣泛存在于中藥中的一類重要揮發性物質，在抗菌、抗炎、抗腫瘤、抗病毒等方面均具有一定的作用，是中藥發揮療效的重要物質基礎[1]。為了盡量減少揮發油的損失，中醫臨床煎煮富含揮發油的飲片時通常采取“后下”方式，縮短煎煮時間以最大化地保留揮發油成分；中藥現代化生產過程中通常采用包合等制劑工藝來增加揮發油的穩定性，減少揮發油的揮發[2]。中藥配方顆粒的提取媒介為水，僅有少數中藥飲片的煎液中能夠提取出一定量的揮發油，在大生產過程中，如果不單獨提取一定量揮發油并對其進行包合，經過提取、濃縮、干燥、制粒等操作，揮發油在中藥配方顆粒中難以保留。此外，受中藥飲片質量、生產設備及工藝等的影響，不同企業生產的中藥配方顆粒中揮發油的含量及配比可能存在一定差異[3]。因此，含有揮發油的飲片配方顆粒國家標準從制定之初就備受關注，企業及科研院所也將其質量控制作為研究重點[4-7]。本文結合《中藥配方顆粒質量控制與標準制定技術要求》（以下簡稱技術要求）中含揮發油飲片配方顆粒相關要求[8]，對揮發油在中藥配方顆粒國家標準中的現狀及質量控制進行對比分析，重點針對什么情況需要收集揮發油、揮發油加入量，以及如何控制中藥配方顆粒中揮發油含量等問題進行探討，以期為更好地制定含有揮發油飲片配方顆粒國家標準提供參考。

1 何種飲片配方顆粒需要收集揮發油

目前，中藥配方顆粒標準制定的主要依據是國家藥品監督管理局發布的技術要求，其中“對于中藥飲片標準中規定有揮發油含量測定項目的以及中醫臨床處方規定‘后下’的含揮發油成分的中藥飲片，其煎煮液應采用適宜的揮發油含量測定方法測定煎煮液中揮發油含量”[8]。通過對比目前頒布的5 個含揮發油飲片配方顆粒的國家標準，發現連翹、荊芥、肉桂、薄荷均收載于《中華人民共和國藥典》（以下簡稱《中國藥典》）2020 年版（一部），且品種項下設置了揮發油含量測定項目，并規定了含量下限[9]。此外，在中醫臨床處方中規定荊芥、肉桂、薄荷“后下”，企業根據技術要求對連翹、荊芥、肉桂、薄荷標準煎液揮發油進行了表征，并將表征結果轉移到大生產實際工藝中，在標準制法項收集一定量的揮發油。蒼術（北蒼術）同樣收載于《中國藥典》2020 年版（一部），品種項下未對揮發油含量限度進行規定，其也不是中醫臨床處方中“后下”的品種，但是蒼術（北蒼術）配方顆粒標準制法項下規定了揮發油工序（表1）。目前，對蒼術（北蒼術）化學成分的研究主要集中在揮發油方面，其揮發油中主要含有蒼術素、茅術醇和桉葉醇等成分，具有抗炎、抑制小腸蠕動和利尿等作用[10-11]。企業在對蒼術（北蒼術）標準煎液研究時發現，如果蒼術（北蒼術）配方顆粒中不加入煎煮過程中同時收集的一定量揮發油，可能會影響其中蒼術素的含量，甚至有可能影響蒼術（北蒼術）配方顆粒的療效。因此，企業對蒼術（北蒼術）飲片標準煎液揮發油進行了收集和表征，蒼術（北蒼術）配方顆粒制法項下同時收集了揮發油。

表1 已頒布5個含揮發油飲片配方顆粒標準對比情況

此外，筆者發現即使《中國藥典》2020 年版中部分品種飲片項下明確規定了揮發油限度，但是相應的配方顆粒標準中卻未提取、收集揮發油。例如，《中國藥典》2020 年版規定，干姜揮發油質量分數測定不得少于0.8%，但是干姜標準煎液中揮發油含量非常低，甚至提取不到。因此，干姜配方顆粒制法項下未同時收集干姜揮發油。揮發油也并不一定都是有效成分，甚至有一定毒性[12]，如《中國藥典》2020 年版細辛藥材項下收載了揮發油含量測定項目，但是據文獻研究表明細辛揮發油具有一定毒性[13-14]，因此在細辛配方顆粒標準煎液研究中，即使其中能提取出一定量揮發油，也不再考慮收集揮發油加入清膏中，以此降低細辛配方顆粒的毒性。這類品種在未來中藥配方顆粒標準研究中應予以重視，是未來中藥配方顆粒標準研究中值得重點關注的問題。

2 含揮發油配方顆粒標準中揮發油加入量的確定

技術要求中明確“對于中藥飲片含揮發油且其傳統煎煮需‘后下’的，商業規模生產時可先行提取揮發油，然后按‘標準湯劑’中揮發油含量轉移率范圍，計算出揮發油加入量，按比例重新加入。”[8]為提高中藥配方顆粒中揮發油的含量與穩定性，目前含揮發油飲片配方顆粒均采用環糊精對揮發油進行包合，盡量與標準湯劑中揮發油限度保持一致。從已頒布的5 個含揮發油飲片的中藥配方顆粒標準比較來看，連翹（青翹）和蒼術（北蒼術）飲片配方顆粒揮發油加入量最為明確，制粒連翹配方顆粒1000 g 需加入同時收集的揮發油0.7 mL；蒼術（北蒼術）配方顆粒制法項下規定：揮發油加入量為飲片量（每生產配方顆粒1000 g 需投料飲片2700 g）的0.04%，即需加入揮發油1.08 g。由于連翹（青翹）與蒼術（北蒼術）配方顆粒國家標準均未設置揮發油含量測定項目，因此在制法項下明確了揮發油具體用量。荊芥配方顆粒、肉桂配方顆粒、薄荷配方顆粒國家標準制法均未明確揮發油加入量，不同企業根據實際生產工藝確定揮發油加入量。

目前，不同中藥配方顆粒企業生產設備、生產工藝均存在差異，對揮發油提取和包合都有一定的影響。各企業應結合實際生產情況，對標準煎液揮發油含量及包合、干燥等工藝影響因素進行考察，從而確定揮發油加入量。連翹（青翹）與蒼術（北蒼術）配方顆粒中揮發油加入量也應當根據不同企業工藝適當調整，而并非明確具體用量，但前提是應該通過含量測定等方法控制中藥配方顆粒中揮發油的質量。本文以薄荷配方顆粒為例，介紹了含揮發油飲片配方顆粒國家標準中揮發油加入量的確定過程。企業提供的薄荷標準湯劑數據顯示，18 批薄荷標準湯劑揮發油質量分數實測值為0.075%～0.250%（以飲片量計，mL·g–1），均值為0.133%；以出膏率計揮發油質量分數為0.25%～1.01%，均值為0.58%，揮發油轉移率實測值為9.38%～33.78%，均值為17.90%（表2）。企業結合標準湯劑關鍵參數及包合工藝中包合率、包合產率，取飲片量相當的揮發油，用β-環糊精等配料包合，形成包合物。

表2 18批薄荷標準湯劑中揮發油含量及轉移率

3 中藥配方顆粒中揮發油質量控制現狀

揮發油是中藥發揮療效的一類重要活性成分，但其含量低且提取過程影響因素眾多，因此是中藥質量控制的難題之一[15]。《中國藥典》2020年版（四部）收載了揮發油測定法（通則2204），采用水蒸氣蒸餾法直接從煎煮液中蒸餾出揮發油，通過讀取揮發油量計算揮發油的含量，根據揮發油相對密度分為甲法和乙法[16]。為了更好地控制中藥制劑中揮發油質量，《中國藥典》2020 年版（一部）收載了指紋圖譜及氣相色譜法含量測定等方法。近年來，氣相色譜法在含揮發油的中藥質量控制應用中也越來越普及[17-19]。目前，中藥配方顆粒國家標準揮發油質量控制主要應用《中國藥典》2020 年版中收載的揮發油測定法。荊芥、肉桂及薄荷飲片配方顆粒在制法項下均未明確揮發油加入量，但是在含量測定項下規定了揮發油含量的上、下限。連翹（青翹）與蒼術（北蒼術）飲片配方顆粒在制法項下均明確了揮發油加入量，但由于配方顆粒生產過程中加入揮發油量過少，導致容量法測定配方顆粒中揮發油含量需較大樣本量，因此在含量測定項未制定揮發油含量測定方法。為防止中藥配方顆粒出現揮發油添加量不足或者不添加等問題，對中藥配方顆粒國家標準制法項明確加入揮發油的應當采用適當技術方法對其質量進行合理控制。例如，研究發現蒼術（北蒼術）煎液中蒼術素與揮發油含量存在一定的相關性，因此，對蒼術（北蒼術）飲片配方顆粒中蒼術素進行含量測定的同時，還可以達到間接控制蒼術（北蒼術）中揮發油含量的目的。據文獻報道，連翹揮發油具有重要的生物活性，可以探索采用有機溶劑萃取結合氣相色譜-質譜法對連翹揮發油中某種相對穩定的成分（如β-蒎烯）進行含量測定，實現對連翹配方顆粒中揮發油的間接控制[20]。

揮發油在中藥配方顆粒中的作用應當引起重視。在以標準湯劑為基準衡量的基礎上，應當堅持“傳承精華、守正創新”，在中醫藥理論指導下，將相關科研成果轉化為中藥配方顆粒國家標準，通過現代科學技術應用更合理地開展含揮發油飲片配方顆粒標準的制定工作。但在現有科學證據不充足的條件下，應當堅持中醫臨床用藥特點，重點關注中藥飲片標準中規定有揮發油含量測定項目的及中醫臨床處方規定“后下”的含揮發油成分的中藥飲片，堅持以標準湯劑為核心依據，按照“應加盡加”的原則，盡量還原中藥傳統煎煮工藝。國家藥典委員會應當進一步發揮國家藥品標準引領作用，適時制定含有揮發油飲片配方顆粒質量控制指導原則，持續引導企業發揮國家藥品標準制定主體作用[21]，加強飲片標準煎劑研究、完善生產工藝、健全含有揮發油配方顆粒質量控制體系、制定揮發油內控標準，逐步完善含揮發油飲片配方顆粒國家藥品標準，確保中藥配方顆粒國家藥品標準可以更好地服務于產業發展。