INSM1、CD200、突觸素在胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤診斷中的作用及實(shí)用性探討

都芳鵑，宮媛，張梅娟

1.山東省聊城市第二人民醫(yī)院消化內(nèi)科，山東聊城 252600；2.解放軍總醫(yī)院第二醫(yī)學(xué)中心消化內(nèi)科，北京 100853；3.山東省千佛山醫(yī)院消化內(nèi)科，山東濟(jì)南 250013

胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤主要是一種源于神經(jīng)分泌系統(tǒng)的異質(zhì)性腫瘤，屬于多能干細(xì)胞的一類腫瘤，其在胰腺腫瘤中占比達(dá)7%左右，發(fā)病年齡為56歲左右，女性表現(xiàn)增多，其主要分為類癌、胰島細(xì)胞瘤以及APUD瘤。根據(jù)其臨床癥狀一般將其分為功能性胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌瘤以及無功能性胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌瘤。功能性胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌瘤有胰島素瘤、促胃液素瘤、血管活性腸肽瘤、胰高血糖素瘤，同時還有生長抑素瘤、生長激素釋放激素瘤、促腎上腺皮質(zhì)激素瘤以及甲狀旁腺素瘤，無功能性胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤占比50%以上[1-2]。胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤是胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的一種常見類型，因?yàn)橐认偕窠?jīng)內(nèi)分泌腫瘤會對患者健康造成極大影響，因此需要做好其病理診斷。INSM1與CD200是判斷以及診斷胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的關(guān)鍵性指標(biāo)，通過以上兩者的表達(dá)可以為疾病確診提供輔助。通過胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的有效病理學(xué)診斷，增強(qiáng)診斷結(jié)果準(zhǔn)確性，并為醫(yī)生在臨床制訂合理治療方案提供參考。本次以免疫組織化學(xué)法為基礎(chǔ)對山東省聊城市第二人民醫(yī)院2019年10月—2020年1月參與研究的66例胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤患者進(jìn)行病理診斷，主要探析INSM1在胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中的表達(dá)及病理診斷意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院66例胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤患者為研究對象，其中，男35例，女31例；年齡52~71歲，平均（65.32±4.16）歲。選取同期就診的胰腺非神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤患者60例，其中，男32例，女28例；年齡52~70歲，平均（65.28±4.05）歲。兩組患者基本資料對比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本研究經(jīng)過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者就診后獲得明確診斷，臨床資料完整，可隨訪；②患者溝通能力及表達(dá)能力正常；③患者已簽署知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①有精神疾病病史、心臟病病史者；②合并其他部位惡性腫瘤者；③有其他影響研究的合并癥者。

1.3 方法

以免疫組織化學(xué)法為基礎(chǔ)對參與研究的兩組腫瘤患者進(jìn)行病理診斷，用到的儀器是全自動免疫組織化學(xué)檢測儀。突觸素以及CgA為工作液。INSM1主要使用陽性表達(dá)肺小細(xì)胞癌作為陽性對照對象，CD200用陽性表達(dá)胎盤組織作為陽性對照對象。所有抗體用到磷酸緩沖液，將一抗取代作為陰性對象。

1.4 觀察指標(biāo)

①統(tǒng)計(jì)INSM1、CD200、突觸素在胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤以及胰腺非神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中的陽性表達(dá)情況。陽性判定方法：根據(jù)腫瘤細(xì)胞染色百分?jǐn)?shù)、染色強(qiáng)度分別實(shí)施評分，將兩項(xiàng)分?jǐn)?shù)相乘，獲得抗體表達(dá)情況評分，根據(jù)評分進(jìn)行判斷。陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)占比0%~5%，為0分；占比6%~25%，為1分；占比26%~50%，為2分；占比51%~75%，為3分；占比76%~100%，為4分。染色強(qiáng)度：未見陽性染色，計(jì)0分，為淺黃色，計(jì)1分；為黃色，計(jì)2分；為棕黃色，計(jì)3分?？贵w表達(dá)水平：1分及以上為陰性，2~4分為弱陽性，5~8分為陽性，9分及以上為強(qiáng)陽性。

②分析單項(xiàng)標(biāo)志物檢測、聯(lián)合標(biāo)志物檢測的特異度、敏感度、準(zhǔn)確度。特異度=真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陽性例數(shù)）×100%；敏感度=真陽性例數(shù)/（真陽性例數(shù)+假陰性例數(shù)）×100%；準(zhǔn)確度=（真陽性例數(shù)+真陰性例數(shù)）/總例數(shù)×100%。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)和百分比(%)表示，組間差異比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 INSM1、CD200、突觸素在胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤以及胰腺非神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中的陽性表達(dá)率比較

胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中INSM1、CD200、突觸素的陽性率均明顯高于胰腺非神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

表1 INSM1與CD200、突觸素在胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤以及胰腺非神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中的陽性表達(dá)率比較[n(%)]

2.2 各項(xiàng)標(biāo)志物檢測的特異度以及靈敏度比較

以病理結(jié)果作為各指標(biāo)判定胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的診斷結(jié)果的金標(biāo)準(zhǔn)。各項(xiàng)標(biāo)志物對胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的診斷結(jié)果：INSM1：敏感度84.85%，特異度83.33%，準(zhǔn)確度84.13%；CD200：敏感度86.36%，特異度86.67%，準(zhǔn)確度86.51%；突觸素：敏感度87.88%，特異度83.33%，準(zhǔn)確度85.71%。3種指標(biāo)診斷胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的特異度、敏感度及準(zhǔn)確度，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。將INSM1、CD200、突觸素3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合起來，其診斷胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的診斷效能：敏感度98.48%，特異度100.00%，準(zhǔn)確度99.21%，和單項(xiàng)指標(biāo)診斷效能對比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

表2 各項(xiàng)標(biāo)志物對胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的診斷結(jié)果

3 討論

胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌瘤能夠長時間持續(xù)分泌超出生理水平的激素，進(jìn)而導(dǎo)致患者存在臨床癥狀，其中25%以上的臨床癥狀與分泌激素有極大關(guān)系，部分患者可能會在同一時間段內(nèi)分泌出多種激素，但一般以一種激素為基礎(chǔ)。無功能性胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌瘤也會分泌超量激素，但是不會有較為顯著臨床癥狀[3-4]。胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤屬于一種顯著異質(zhì)性腫瘤，不同基因表型、分化程度、病理學(xué)類型、分期、分級以及臨床特征的胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤治療與預(yù)后可能存在巨大差異。胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤起源于胰神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞，主要可分為高分化胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤及低分化胰神經(jīng)內(nèi)分泌癌[5-6]。高分化胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤與低分化胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤生物學(xué)行為在臨床上存在較大差別[7-8]。在對此類患者治療前，首先需要采取有效方法進(jìn)行診斷，而一些腫瘤標(biāo)志物可在其中發(fā)揮重要價(jià)值。

INSM1其被用作胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤診斷的生物學(xué)標(biāo)志物，與腫瘤生長和進(jìn)展密切相關(guān)[9-10]。該指標(biāo)對神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤診斷的特異性以及敏感性較高。對嗜鉻細(xì)胞瘤等診斷也具有較高的敏感性和特異性。CD200也是潛在治療靶點(diǎn)，其在胰島細(xì)胞以及神經(jīng)分泌細(xì)胞中會有高表達(dá)[11]。另外，胰腺實(shí)體腫瘤中，尤其在實(shí)性－假乳頭狀腫瘤中，突觸素以及CgA也存在一定程度的陽性表達(dá)。該指標(biāo)可以區(qū)別胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤以及非胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤[12-14]。

本研究結(jié)果顯示，INSM1陽性信號位置：腫瘤細(xì)胞核，INSM1在胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤和胰腺非神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中的陽性表達(dá)率對比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。CD200陽性信號位置為腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)、胞膜，CD200在胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤以及胰腺非神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的陽性表達(dá)率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），突觸素的分析也得到同樣的結(jié)果。由此可知，INSM1與CD200、突觸素在胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤、胰腺非神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤診斷的陽性表達(dá)率對比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），可以看出INSM1與CD200對胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的檢出有積極意義，且可以更好地區(qū)別胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤、胰腺非神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤，為疾病在后期得到準(zhǔn)確且有效治療奠定基礎(chǔ)，保障患者獲得及時治療，同時對其部分患者生存率改善也有積極意義。本研究中INSM1對診斷胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤患者的敏感度以及特異度為84.85%、83.33%。單項(xiàng)檢測時，INSM1與CD200、突觸素對胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的診斷效能差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），三者聯(lián)合檢測時，診斷的敏感度、特異度及準(zhǔn)確度為98.48%、100.00%、99.21%，明顯高于單項(xiàng)指標(biāo)的診斷效能（P<0.05）。可見聯(lián)合檢測對胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤病理學(xué)診斷有一定支持意義。

本次研究與相關(guān)學(xué)者的研究有共通之處，主要體現(xiàn)于靈敏度、特異度層面，其INSM1在胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤和非胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中的陽性表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。INSM1對診斷胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的靈敏度為85.5%，特異度為95.5%[15]。疾病的準(zhǔn)確能夠?yàn)榕R床治療提供重要參考信息，目前針對胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤治療方式應(yīng)用比較多的是新輔助治療，其對惡性腫瘤切除有較大意義，同時可以將已轉(zhuǎn)移病灶消滅，但是對生存率提升還無確切的證據(jù)。新輔助治療的基本原則在于選擇合適時機(jī)，通過合理且科學(xué)治療方案為患者生存率提升提供支持[16]。

目前，隨著新輔助治療以及轉(zhuǎn)化治療在越多惡性腫瘤中的成功嘗試，新輔助治療以及轉(zhuǎn)化治療均可以在一定程度上保障手術(shù)切除率的有效提升，減少惡性腫瘤的復(fù)發(fā)以及轉(zhuǎn)移。從宏觀角度來看，各種新輔助治療以及轉(zhuǎn)化治療研究以及推廣增多，可為胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤實(shí)現(xiàn)針對性治療提供保障，同時也可以保證治療的個體化、精準(zhǔn)化及規(guī)范化。但目前臨床時間中，新輔助治療以及轉(zhuǎn)化治療能否將進(jìn)展期患者生存時間延長還有待研究，可能會對患者生存率提升有一定意義?，F(xiàn)階段，針對胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤治療指征，方案選擇、預(yù)后以及治療效果均存在爭議，臨床應(yīng)用仍處于探索過程中。本研究結(jié)合美國國立綜合癌癥網(wǎng)絡(luò)（NCCN）、歐洲神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤協(xié)會（ENETS）發(fā)布最新指南、中華醫(yī)學(xué)會外科學(xué)分會聯(lián)合中國抗癌協(xié)會胰腺癌專業(yè)委員會發(fā)布的《中國胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤診療指南（2020）》（簡稱中國指南）等資料，對現(xiàn)階段針對胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的新輔助治療及轉(zhuǎn)化治療的循證醫(yī)學(xué)證據(jù)進(jìn)行系統(tǒng)梳理，同時對INSM1與CD200、突觸素在胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中的表達(dá)及病理診斷進(jìn)行探析，并進(jìn)行相關(guān)資料的查閱，掌握診斷與相關(guān)治療的研究進(jìn)程以及發(fā)展，為胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤在臨床上獲得精確診斷以及科學(xué)治療提供必要的支持。

綜上所述，INSM1與CD200、突觸素是胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤臨床診斷中的新型標(biāo)志物，其對胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤得到有效診斷有積極意義，將三者聯(lián)合應(yīng)用，能進(jìn)一步提升診斷效能。