齦溝液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39與重度牙周炎患者治療后預后的關系*

朱麗娜,包麗娜

1.陜西省核工業二一五醫院口腔科,陜西咸陽 712000;2.陜西省咸陽市第一人民醫院口腔科,陜西咸陽 712000

牙周炎是口腔科臨床常見疾病之一,往往是由菌斑微生物所致,患者表現為牙周袋的形成、牙齦紅腫以及牙槽骨吸收等[1]。牙周炎的治療手段以基礎治療以及外科治療為主,其主要目的是清除菌斑、牙石以及遭受感染的袋內壁、根面,實現對牙周炎癥的完全清除[2]。牙周基礎治療內容有口腔衛生干預、齦上潔治以及齦下刮治、根面平整等,實際工作中發現部分患者在接受基礎治療后仍存在療效不佳,需開展激光輔助治療或手術治療[3]。因此,如何早期有效預測患者牙周基礎治療后預后不良顯得尤為重要。牙周炎發病易導致牙槽骨、牙齦等組織出現炎癥,進一步破壞牙槽骨[4]。Shh蛋白可通過相關信號通路介導急慢性炎癥損傷,可能參與了牙周炎的發生、發展過程[5]。牙周組織中dickkopf相關蛋白1(DKK1)表達的增加會對Wnt信號通路所介導的促成骨分化、牙槽骨形成起到抑制作用,進而促進了牙槽骨的吸收[6]。人類軟骨糖蛋白-39(HC-gp39)屬于新型炎癥指標,可加劇炎癥反應,對炎癥疾病進展起到促進作用[7]。目前,臨床上關于Shh蛋白、DKK1、HC-gp39與前牙區重度牙周炎患者牙周基礎治療后預后關系的研究少見報道。鑒于此,本文擬研究齦溝液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39與前牙區重度牙周炎患者牙周基礎治療后預后的關系,現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年1月至2022年1月陜西省核工業二一五醫院收治的120例重度牙周炎患者作為研究對象,其中男71例、女49例,年齡25～67歲、平均(41.55±11.45)歲,有吸煙史12例。納入標準:(1)前牙區重度牙周炎的診斷均符合《重度牙周炎診斷標準及特殊人群牙周病治療原則的中國專家共識》[8]中推薦的重度牙周炎診斷標準,患牙炎癥較明顯,伴或不伴有牙周膿腫,牙齒松動,患牙牙槽骨吸收超過根長的1/2;(2)均接受牙周基礎治療;(3)年齡>18歲;(4)臨床資料完整;(5)初診時前牙區牙周袋探診深度(PD)≥6 mm。排除標準:(1)合并其他感染性疾病或免疫性疾病;(2)牙齒部位異?；?和)無法完成口腔衛生維護;(3)接受正畸治療;(4)神志異常或因故無法完成相關治療;(5)正處于妊娠期或哺乳期女性;(6)入組前30 d內有抗菌藥物或(和)激素類藥物治療史。所有納入患者均已簽署知情同意書,本研究經陜西省核工業二一五醫院醫學倫理委員會批準。

1.2方法

1.2.1治療方法 治療方法包括齦上潔治、齦下刮治以及根面平整術等,同時實施口腔衛生宣教,正確刷牙以及使用牙線,拔除無保留價值的患牙。

1.2.2觀察指標 (1)根據醫院病歷系統統計所有患者治療前PD、臨床附著喪失(CAL)、齦溝出血指數(SBI)、菌斑指數(PLI)等資料。(2)齦溝液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39檢測:首先采集齦溝液,取裁剪呈2 mm×10 mm的濾紙條,分別在各EP管中置入6條,消毒干燥處理后稱重備用。去除目標牙位齦上菌斑以及軟垢,以棉球隔濕,順著牙面氣槍吹干牙面,在取樣牙齦溝置入濾紙條,遭遇阻力時停止,靜置30 s后取出、稱重。根據齦溝液比重完成齦溝液含量的計算,并滴加適量的PBS緩沖液,離心獲取標本保存至低溫冰箱中。齦溝液Shh蛋白、DKK1水平采用酶聯免疫吸附試驗檢測,HC-gp39水平采用夾心酶聯免疫吸附試驗檢測,所有步驟嚴格按照試劑盒說明書進行操作。齦溝液Shh蛋白試劑盒購自上?？泼羯锟萍加邢薰?DKK1試劑盒購自上海信裕生物科技有限公司,HC-gp39試劑盒購自上海藍基生物科技有限公司。

1.2.3預后分組 治療90 d后,將患者按照治療后PD的差異分為預后不良組和預后良好組。PD≥5 mm判斷為預后不良,PD<5 mm判斷為預后良好。

2 結 果

2.1120例患者預后情況分析 治療90 d后,預后不良組有36例,預后良好組有84例。

2.2兩組齦溝液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39水平對比 預后不良組齦溝液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39水平均高于預后良好組,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組齦溝液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39水平對比

2.3不同預后患者基線資料對比 有吸煙史比例、治療前PD及治療前CAL在預后不良組與預后良好組間比較,差異均有統計學意義(P<0.05);而性別、年齡、治療前SBI、治療前PLI在預后不良組與預后良好組間比較,差異均無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 不同預后患者基線資料對比

2.4多因素Logistic回歸分析前牙區重度牙周炎患者牙周基礎治療后預后的影響因素 以前牙區重度牙周炎患者牙周基礎治療后預后為因變量,賦值為預后良好=0、預后不良=1。以表1、表2中兩組差異有統計學意義的指標為自變量,吸煙史賦值為有=1、無=0,治療前PD、治療前CAL、Shh蛋白、DKK1、HC-gp39以所有患者的均值(7.60 mm、7.00 mm、4.00 μg/L、9.00 μg/L、60.00 ng/mL)分層。經多因素Logistic回歸分析發現:有吸煙史、治療前PD>7.60 mm、治療前CAL>7.00 mm、Shh蛋白>4.00 μg/L、DKK1>9.00 μg/L及HC-gp39>60.00 ng/mL均是前牙區重度牙周炎患者牙周基礎治療后預后不良的危險因素(P<0.05)。見表3。

表3 前牙區重度牙周炎患者牙周基礎治療后預后影響因素的多因素Logistic回歸分析

2.5齦溝液Shh蛋白、DKK1及HC-gp39預測前牙區重度牙周炎患者牙周基礎治療后預后不良的ROC曲線分析 齦溝液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39單項檢測及3項聯合檢測預測前牙區重度牙周炎患者牙周基礎治療后預后不良的曲線下面積(AUC)分別為0.755、0.783、0.721、0.845,3項聯合檢測預測的效能優于單項檢測。見圖1和表4。

圖1 齦溝液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39單項及聯合檢測預測前牙區重度牙周炎患者牙周基礎治療后預后不良的ROC曲線

表4 齦溝液Shh蛋白、DKK1及HC-gp39判斷前牙區重度牙周炎患者牙周基礎治療后預后不良的效能分析

3 討 論

牙周炎主要特征包括牙齦炎癥以及牙槽骨喪失,是全球范圍內成年人牙齒缺失的重要原因之一[9]。重度牙周炎作為牙周炎中的嚴重類型,影響牙齒支持組織的健康,并可累及牙齒的咀嚼功能,對患者的日常生活產生影響[10]。目前普遍認為牙周炎發病機制為菌斑生物膜引發的宿主免疫炎癥反應,且大部分牙周損害的發生與宿主對感染的應答有關,并非單純微生物感染所致[11-13]。在免疫炎癥反應過程中,因存在多種細胞因子、趨化因子以及蛋白酶的大量釋放,從而導致組織損傷和牙槽骨吸收破壞程度增加[14-16]。Sonic Hedgehog信號通路廣泛介導多種器官急、慢性炎癥損傷,前期研究證實種植體周圍炎患者齦溝液內存在Shh蛋白的表達,作為Sonic Hedgehog信號通路的關鍵性蛋白,Shh可通過調控上述信號通路活性,進而影響白細胞介素(IL)-10以及腫瘤壞死因子(TNF)-α等炎癥因子水平,進一步介導牙周炎的發生、發展過程[17]。DKK1是Wnt通路經典抑制劑,可通過調控上述信號通路,調控牙周韌帶細胞朝成骨細胞方向分化,從而抑制骨形成的作用,促進骨破壞,其表達的升高可能損害牙周組織,介導牙周炎的發生、發展[18]。HC-gp39是急性時相反應蛋白之一,在正常生理狀態下低表達,而在感染、炎癥以及損傷時,其表達異常升高,會加劇炎癥反應程度,促進炎癥疾病進展[19]。HC-gp39在齦溝液中的研究較為少見,而齦溝液中炎癥因子水平可有效反映牙周狀況,因此對齦溝液中HC-gp39水平進行觀察,可明確其與牙周炎發生、發展的相關性。

本文結果發現,預后不良組齦溝液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39水平均高于預后良好組。且經多因素Logistic回歸分析發現Shh蛋白>4.00 μg/L、DKK1>9.00 μg/L及HC-gp39>60.00 ng/mL均是前牙區重度牙周炎患者牙周基礎治療后預后不良的危險因素,提示齦溝液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39與前牙區重度牙周炎患者牙周基礎治療后預后不良密切相關。Shh蛋白可能通過促進IL-6等炎癥介質的大量合成、分泌,促進炎癥發展,對牙周組織造成更大的損害,不利于預后[20]。DKK1與牙周炎有關,隨著牙周組織受損程度的增加,齦溝液中DKK1分泌顯著增加,牙周炎患者牙周基礎治療難度增加,預后不良風險增加[21]。HC-gp39水平可在一定程度上反映牙周炎患者病情嚴重程度以及治療效果[22]。隨著HC-gp39水平的升高,加劇了牙周局部炎癥,進而對牙周組織產生進一步損害,導致了預后不良。經多因素Logistic回歸分析還發現,有吸煙史、治療前PD>7.60 mm、治療前CAL>7.00 mm均是前牙區重度牙周炎患者牙周基礎治療后預后不良的危險因素。究其原因,吸煙所產生的煙霧含有大量有毒物質,可能導致牙周袋內微環境發生異常改變,并增加了牙周致病菌含量,繼而引發或加劇炎癥,導致牙周袋的持續加深,影響預后[23]。PD、CAL的增加往往反映了牙周炎患者牙周組織炎癥明顯以及病情嚴重,預后效果相對較差。

經ROC曲線分析發現,齦溝液Shh蛋白、DKK1及HC-gp39聯合檢測預測前牙區重度牙周炎患者預后不良的效能均優于3項指標單項預測,聯合檢測上述3項指標水平可為口腔科醫生判斷預后提供輔助參考依據。

綜上所述,齦溝液Shh蛋白、DKK1及HC-gp39水平升高均是前牙區重度牙周炎患者牙周基礎治療后預后不良的危險因素,初步研究表明Shh蛋白、DKK1及HC-gp39聯合檢測判斷前牙區重度牙周炎患者牙周基礎治療后預后不良的效能較高。