HIV感染患者血清白細胞介素與淋巴細胞水平的關系

韓陽 葉衛豐 侯振宇 朱青 韓強

人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency Virus,HIV)進入人體后主要侵犯免疫系統,損害機體細胞免疫功能,表現為CD4+、CD8+T淋巴細胞水平不斷降低,最終導致人體免疫功能缺陷,增加各種感染、腫瘤發生風險,已成為重大公共衛生挑戰之一[1,2]。血液中CD4+、CD8+T淋巴細胞水平可有效反映機體細胞免疫功能,是HIV感染患者病情判定、臨床進展、治療效果的重要評價指標[3,4]。積極尋找與T淋巴細胞相關的指標,或可為HIV感染患者的治療提供新的靶點。白細胞介素是參與機體免疫激活、免疫應答、信息傳遞、免疫調節等多種過程的一類細胞因子。相關研究指出,HIV感染后,患者體內多種白細胞介素表達可發生明顯改變[5]。由此,推測HIV感染患者血清白細胞介素與T淋巴細胞水平存在某種聯系。鑒于此,本研究觀察HIV感染患者血清白細胞介素、淋巴細胞水平,并分析其關系,以期為臨床治療尋找新的靶點。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2019年3月至2022年7月醫院收治的128例HIV感染患者臨床資料。128例HIV感染患者中男102例,女26例;年齡:<60歲119例,≥60歲9例;婚姻狀況:未婚58例,已婚32例,喪偶2例,離異36例;感染途徑:性傳播107例,血液傳播21例。

1.2 納入與排除標準

1.2.1 納入標準:①HIV感染符合《中國艾滋病診療指南(2018版)》[6]中相關診斷標準,經免疫印跡實驗證實HIV感染;②首次就診;③因機會性感染入院就診;③臨床資料完整。

1.2.2 排除標準:①既往有抗病毒治療史;②近6個月使用免疫抑制劑、干擾素、調節劑、糖皮質激素等影響機體免疫狀態的藥物;③合并嚴重免疫系統功能異常;③合并嚴重血液系統疾病;⑤合并嚴重肝腎功能不全;⑥妊娠期女性。

1.3 方法

1.3.1 血清白細胞介素檢測:入院24 h內采集患者空腹靜脈血3 ml,離心(離心速度3 500 r/min)10 min,取血清,采用酶聯免疫吸附法測定白細胞介素-1β(interleukin-1 β,IL-1β)、白細胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白細胞介素-10(interleukin-10,IL-10)水平,嚴格按照檢測試劑盒(晶美生物科技)說明進行相關操作。

1.3.2 淋巴細胞水平檢測:取50 μl抗凝全血,加入20 μl CD4-FITC/CD8-PE/CD3-PerCP單克隆混合抗體振蕩混勻,室溫下避光孵育20 min,使用紅細胞裂解液裂解紅細胞,經流式細胞儀(BD FACSAria Ⅱ)檢測CD4+、CD8+T淋巴細胞數。

1.3.3 資料收集:詳細記錄患者性別(男、女)、年齡(<60歲、≥60歲)、婚姻狀況(未婚、已婚、喪偶、離異)、感染途徑(性傳播、血液傳播)、病毒載量[取2 ml抗凝全血,離心(離心速度2 000 r/min)10 min,分離血漿并將其移至-76℃無菌凍存管中備用。于37℃下震蕩助融樣本,上機檢測。取1 100 μl血漿于全自動病毒載量儀上定量檢測HIV RNA。實驗設強陽性、弱陽性、陰性質控品各一個,采用內標法定量檢測樣本,檢測線性范圍:40～107copies/ml。參照李強等[7]研究,依據病毒載量分為<40 copies/ml、40～103copies/ml、>103copies/ml]、吸煙史[有、無,吸煙指數(吸煙支數×吸煙年限)>200視為有吸煙史]。

2 結果

2.1 HIV感染患者血清白細胞介素、淋巴細胞水平 128例HIV感染患者IL-1β水平(2.92±1.04)pg/ml、IL-6水平為(4.36±1.56)pg/ml、IL-10水平為(3.62±1.13)pg/ml、CD4+水平為(416.41±68.59)個/μl、CD8+水平為(1 418.93±94.18)個/μl。

2.2 不同臨床特征的HIV感染患者CD4+水平比較 病毒載量<40 copies/ml的HIV感染患者CD4+水平高于病毒載量40～103copies/ml及>103copies/ml的患者,有吸煙史的HIV感染患者CD4+水平低于無吸煙史的患者,差異有統計學意義(P<0.05);不同性別、年齡、婚姻狀況、感染途徑的HIV感染患者CD4+水平比較,差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 不同臨床特征的HIV感染患者CD4+水平比較 個/μl,

2.3 不同臨床特征的HIV感染患者CD8+水平比較 病毒載量<40 copies/ml的HIV感染患者CD8+水平高于病毒載量40～103copies/ml及>103copies/ml的患者,有吸煙史的HIV感染患者CD8+水平低于無吸煙史的患者,差異均有統計學意義(P<0.05);不同性別、年齡、婚姻狀況、感染途徑的HIV感染患者CD8+水平比較,差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 不同臨床特征的HIV感染患者CD8+水平比較 個/μl,

2.4 HIV感染患者血清白細胞介素與淋巴細胞水平的關系 經Pearson相關性分析,HIV感染患者血清IL-1β、IL-6、IL-10水平與CD4+及CD8+呈負相關(P<0.05)。見表3。

表3 HIV感染患者血清白細胞介素與淋巴細胞水平的關系

2.5 病毒載量、吸煙史與HIV感染患者淋巴細胞水平的關系 經Kendall’stau-b相關性分析,病毒載量與HIV感染患者CD4+、CD8+水平呈負相關(P>0.05);經點二列相關性分析,結果顯示,吸煙史與HIV感染患者CD4+、CD8+水平呈負相關(P<0.05)。見表4。

表4 病毒載量、吸煙史與HIV感染患者淋巴細胞水平的關系

3 討論

HIV主要損害靶細胞為T淋巴細胞,HIV感染患者CD4+、CD8+T淋巴細胞的各項功能可受到明顯限制。在HIV感染初期,CD4+、CD8+T淋巴細胞水平可明顯上升,并分泌多種細胞以消滅被感染的細胞,但隨病情進展,CD4+、CD8+水平可逐漸降低,引發免疫系統功能缺陷[8]。

T淋巴細胞數量、功能紊亂在HIV感染過程中發揮核心作用,其中CD4+主要起到協助細胞免疫、體液免疫的作用,CD8+主要起到殺傷和抑制的作用,可維持、誘導免疫耐受[9,10]。一般情況下,健康人群的CD4+T淋巴細胞數量為500～1 600/ml,但當HIV感染時,機體CD4+T淋巴細胞數量可逐漸降低,當其降至200/ml時,機體則可能發生感染或腫瘤[11]。CD8+T淋巴細胞屬機體免疫效應因子,可通過T淋巴細胞效應釋放多種因子清除感染靶細胞的病毒,是抵御HIV感染的重要細胞[12]。因此,臨床常采用CD4+、CD8+T淋巴細胞數量來判斷HIV感染患者預后情況。

研究指出,IL-1β在健康人群血清中呈低表達,感染、炎性等刺激可誘導IL-1β水平升高[13]。當機體發生HIV感染時,可對巨噬細胞、中性粒細胞等產生刺激,促使IL-1β大量釋放,引起炎性反應,直接導致炎性損傷;此外,IL-1β還可介導多種促炎性細胞因子合成,間接起到促炎作用,影響患者預后[14]。已有研究證實,HIV感染可刺激巨噬細胞、中性粒細胞增加IL-6分泌量,即便在病毒抑制條件下,HIV感染患者血清IL-6水平仍處于較高水平[15]。有研究指出,IL-6與HIV感染患者癌癥、心血管疾病、感染性疾病等不良臨床結局有關[16,17]。血清IL-6水平異常升高表明存在活動性炎性,可能對患者預后產生重要影響。IL-10是Th2型細胞因子,可由多種類型免疫細胞產生,可對Th1反應產生間接抑制的作用。有研究指出,HIV導致的慢性感染狀態下,IL-10可對T細胞產生持續抑制作用,從而促進病毒感染活性[18]。

本研究發現,IL-1β、IL-6、IL-10與CD4+、CD8+呈負相關,即IL-1β、、IL-6、IL-10水平越高CD4+、CD8+水平越低。分析其原因,血清IL-1β、IL-6、IL-10水平異常升高可引起過度炎性反應,而過度炎性反應又可引起免疫功能紊亂,加重機體免疫損傷,降低CD4+、CD8+T淋巴細胞水平。而CD4+、CD8+T淋巴細胞水平降低可導致細胞溶解功能、殺傷能力降低,致使免疫應答負性調節占據優勢,為HIV復制創造良好條件,進而引起炎性介質、細胞因子釋放入血[19]。此外,IL-10可對T細胞產生直接作用,對其增殖、功能分化產生限制;還可對抗原提呈細胞產生作用,抑制刺激分子表達,阻礙初始T細胞成熟,減少CD4+、CD8+T淋巴細胞數目[20]。由此可見,白細胞介素在HIV感染中扮演重要角色,在未來,臨床或許可采取抗炎措施,盡可能降低患者血清炎性因子水平,促進CD4+、CD8+T淋巴細胞水平恢復,從而改善患者預后。

HIV病毒載量越高則表明患者體內復制數量越多,在病毒直接或間接作用下,CD4+、CD8+T淋巴細胞破壞越多,進而減少其數量。此外,本研究結果還顯示,吸煙史與HIV感染患者CD4+、CD8+水平呈負相關。其原因主要是吸煙時多種有害物質可反復刺激呼吸道,長此以往可降低肺功能,影響機體免疫力,降低CD4+、CD8+T淋巴細胞水平。因此,針對HIV感染患者,臨床應積極給予抗病毒治療及戒煙干預,以改善患者CD4+、CD8+T淋巴細胞水平,促進免疫功能恢復,利于患者預后。

綜上所述,HIV感染患者血清IL-1β、IL-6、IL-10水平與CD4+、CD8+水平密切相關,深入研究血清IL-1β、IL-6、IL-10影響CD4+、CD8+水平的具體機制,或許可為HIV感染患者的治療開辟新的思路。