混合染色法在對患者進行骨髓細胞形態學檢驗中的應用觀察

任莉 孫暉 郝旭

(西安市第一醫院檢驗科,陜西 西安 710002)

貧血為臨床常見癥狀,可通過測定血液指標診斷疾病。臨床在診斷貧血時常采用血液檢查,通過細胞內多項指標不僅可以確診疾病,還可鑒別疾病種類。然而,有研究[1]指出,應用血液檢驗診斷貧血患者病因存在一定局限性,使用骨髓細胞診斷具有顯著效果,可促進疾病的治療,對患者具有重要意義。近年來,骨髓細胞學檢驗一直是專家及社會各界關注的焦點,如今尚未找到一種特別高效的儀器用于骨髓細胞學檢驗,所以只能人工檢驗[2]。做骨髓細胞學檢查,可以判斷患者體內骨髓細胞狀況,判定是否有失血性貧血、溶血性貧血、缺鐵性貧血等疾病,從而能及早地治療患者,使患者健康盡快康復[3]。本文旨在探究混合染色法在對患者進行骨髓細胞形態學檢驗中的應用效果,現報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2020年1月至2022年1月我院進行骨髓細胞學檢查的患者80例,其中男36例,女44例;年齡20～79歲,平均(36.54±3.17)歲。本研究經倫理委員會(批準號IRB-2020-019)進行審查通過。

1.2方法 首先要收集骨髓液,確保為新鮮的骨髓液,大多數情況下采集的骨髓液來源于胸骨和肋骨等位置,最佳的為胸骨部位的骨髓液,在抽取骨髓液時,患者會感到輕微的痛感,骨髓液內見到油珠,這才說明所采集的骨髓液為合格的。之后是染色問題,在對骨髓細胞學進行檢驗時,分別使用瑞氏染色法、姬氏染液法和混合染色法對骨髓涂片進行染色,混合染色法主要的操作為將存放超過3個月的配好的瑞氏染色液將姬氏染色液稀釋,直到將其稀釋為十倍左右,然后滴在骨髓的膜上,確保整個骨髓的膜都被覆蓋住,進行均勻染色,保證質量,染色時間越長,濃度越低,染色的效果越好,在進行涂片時,要注意均勻涂色,不要留下空隙,快速進行涂片。

1.3觀察指標 顯微鏡下觀察的指標主要有細胞內部的核膜及核仁、細胞漿的情況是否清晰,細胞著色情況是否良好。染色結束后5 min、10 min、20 min、30 min、1 h、1.5 h、2 h分別用顯微鏡觀察涂片。把染色效果差、不能有效分辨細胞質、細胞輪廓比較模糊的涂片定為0分;把染色效果好、細胞結構清楚、細胞漿和細胞核區別明顯的涂片定為10分,評分越高表明染色效果越好。

2 結 果

通過開展采用混合染色法染色骨髓液涂片顯微鏡觀察,發現采用混合染色法處理骨髓液涂片后,細胞有著非常鮮艷的色彩,而且細胞內部結構染色情況表現得比較清晰,在細胞漿這一區域,主要色彩為藍色,觀察細胞內核仁和核膜,發現細胞內情況同樣非常清楚。混合染色法在各個時間段的染色效果評分上顯著高于瑞氏染色法、姬氏染色法(P<0.05)。見表1。

表1 染色效果數字法評分分,n=80]

3 討 論

隨著醫療水平的不斷發展,骨髓檢查內容日益豐富,技術手段不斷增加,現代骨髓檢查已經由早期的單純形態學檢查發展為涉及細胞化學、免疫學、細胞遺傳學及分子生物學、超微結構分析多方面的檢查,常規形態學檢查逐漸走向規范化。將混合染色法用于骨髓細胞學檢驗,具有重要研究價值,該染色法操作比較簡單,能清楚地顯示檢驗結果,是骨髓細胞學檢驗的一種較為先進的方法[4]。有研究[5]表明,髓液涂片染色效果將直接影響檢驗人員觀察其血細胞形態。而實際工作中,由于受各種因素的影響,使得髓液涂片在染色過程中存在諸多問題,從而造成檢測結果不真實或出現假陰性現象。這些問題嚴重影響了臨床診斷和治療方案的制定。研究[6]證明,只需滿足“長時間和低濃度”染色要求即可保證涂片染色效果層次感清晰,獲得理想染色效果。

本文結果顯示,采用混合染色法,骨髓涂片經顯微鏡染色,骨髓液涂片細胞色澤艷麗,染色狀況較清晰,胞漿以藍色為主,能明顯看到細胞內核膜及核仁。混合染色法在各個時間段的染色效果評分上顯著高于瑞氏染色法、姬氏染色法(P<0.05),這說明骨髓細胞學檢驗采用混合染色法有優良的效果,利于觀察細胞形態,能清楚地顯示細胞內結構和水平,具有染色充分的優勢,誤診率較低,對骨髓細胞學檢驗有很好的推廣價值。瑞氏染色法細胞核染色反應較好,而細胞質染色反應比較差;姬氏染色法和瑞氏染色法則相反。混合染色法對骨髓涂片有較好的染色效果,而瑞氏染色法和姬氏染液法均不能達到滿意的涂片及染色效果。在實際的骨髓細胞學檢驗過程中,應用混合染色法可以很好地顯示出細胞內部層次,降低誤診率,提高骨髓細胞學檢驗結果的準確性,為臨床疾病的診斷提供了可靠基礎。盡管這種人工操作方式比較簡單,但在具體操作中,仍存在許多需要特別注意的問題。因骨髓細胞學檢查過程中目前只能人工操作,所以醫生及做檢查的有關人員應著重從以下兩方面培養:(1)培養職業責任感:顯微鏡下看骨髓染色、提取、制片過程,認真負責,認真細致,嚴格遵守規范制度,絕不敷衍了事;另外,還要注重自身素質的提升。(2)培養醫生及有關檢驗人員業務素質能力:相關人員要有發展眼光,用發展眼光看問題,不斷地豐富自己,學習當今技術與知識,與時俱進,要有獨立執行各種任務,避免工作失誤,盡力把誤診率降到最低,盡可能做到不發生影響患者治療和康復。

綜上所述,在采用混合染色法進行骨髓細胞學檢測過程中,可以達到針對某些形態結構比較簡單的細胞學,將其內部結構展現出來,顯著提高細胞學檢測準確度,可以更好地表達細胞結構,在臨床上有重要應用價值。