2019~2021年花溪區H5、H7亞型禽流感免疫抗體監測情況及分析

浦同燦　李世靜　周莉　羅時霞

摘 要：為了解2019～2021年花溪區的禽流感免疫效果，對其管轄的部分涉農鄉鎮（街道）隨機采集120～400日齡的雞群血清樣品4 391份，采用血凝抑制試驗對禽流感H5和H7亞型進行免疫抗體檢測，根據高致病性禽流感診斷技術中抗體效價標準進行判定，HI抗體效價≥4log2，判定個體免疫效力合格；群體免疫抗體合格率≥70%，判為群體抗體合格率達標。檢測結果顯示，花溪區（H5+H7亞型）禽流感免疫抗體合格率2019、2020、2021年依次為91.03%、91.78%、96.19%，呈現逐年上升趨勢；H7亞型抗體合格率高于H5亞型，規模化雞場抗體合格率高于大戶和散養戶。綜上所述，禽流感免疫抗體合格率均高出國家標準，說明全區免疫工作較扎實有效；監測禽流感免疫抗體為花溪區科學預防H5、H7亞型禽流感的流行提供數據支撐，推動花溪區的家禽業健康持續發展。

關鍵詞：H5、H7亞型禽流感；血凝抑制試驗；抗體合格率；評估

中圖分類號：S855.3? ? ?文獻標識碼：B文章編號：1673-1085（2023）07-0037-06

禽流感（Avian Influenza，AI）是禽流行性感冒的簡稱，屬于正黏病毒科流感病毒屬A型禽流感病毒（Avian Influenza virus，AIV）引起的人獸共患烈性傳染病之一[1]，能夠感染所有的家禽、野禽。被世界動物衛生組織（OIE）定為A類傳染病，我國將其列為一類傳染病[2-3]。

高致病性禽流感對養禽業的打擊幾乎是毀滅性的，該病發生后對雞群的發病率和致死率極高，給家禽養殖場戶帶來極大的經濟損失。目前，世界范圍內流行的高致病性禽流感亞型主要為H5亞型和H7亞型。農業農村部官網數據顯示，2019年中國一共報告高致病性禽流感疫情4起，2020年共報告高致病性禽流感疫情7起，2021年共報告高致病性禽流感疫情8起，家禽、野禽均存在不同程度感染[4]，高致病性禽流感疫情在我國的發生呈上升趨勢，防控壓力十分嚴峻。

為遏制禽流感疫情發生，我國從2005年開始對全國家禽實施H5亞型禽流感強制免疫，2017年秋季開始在免疫H5亞型禽流感的基礎上，對全國家禽全面開展H7N9免疫。實踐證明，疫苗免疫接種是預防高致病性禽流感的有效手段。我國的禽流感疫苗發展，從最初的禽流感H5N1（Re-6）單苗到二價滅活疫苗（H5N1Re-8+H7N9Re-2），直到現在已被廣泛使用的重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗（H5N1Re-6株+Re-12株，H7N9 H7-Re2株）。隨著禽流感病毒毒株流行情況的變化，采用最新毒株研制的疫苗能將疫情帶來的風險降到最低水平。

為強化花溪區家禽養殖持續引領“強省會”示范帶動作用，切實鞏固花溪“小班哥”“雙無抗”優質雞蛋品牌，區農業部門對禽業疫病的防控尤為重視，對全區高致病性禽流感免疫抗體水平進行長期跟蹤監測，以便實時掌握花溪區免疫抗體水平及分布情況，及時發現預警全區高致病性禽流感防控的薄弱環節，實時更新或采取科學防疫措施。本文對花溪區2019～2021年高致病性禽流感免疫抗體監測情況進行匯總、整理、分析，以期為花溪區高致病禽流感流行概況進行科學風險評估及研判，對下一步完善花溪區禽流感的防控措施具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

樣品來源和數量：根據2019～2022年花溪區疫病監測與流行病學調查計劃，按鄉鎮養殖存欄分配情況，覆蓋花溪區轄區內的大部分規模養雞場、蛋雞養殖大戶和農村散養戶，共采集4 391份免疫過重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗（H5N1Re-6株+Re-12株，H7N9 H7-Re2株）的雞群血清樣品。樣品采集方法和處理：血清樣品一般于疫苗免疫28 d后采集，雞翅靜脈采血不少于2 mL，放于無抗凝劑的真空采血管，待血液凝固后，3 000 r/min離心5 min，取上層清亮液體移置于1.5 mL EP管中，靜置保存于4 ℃冰箱備用。

1.2 試驗試劑

1.2.1 檢測試劑 禽流感H5亞型標準抗原、陽性血清、陰性血清購自哈爾濱國生生物科技有限公司，H7亞型標準抗原、陽性血清、陰性血清購自中國哈爾濱維科生物開發公司，0.1 mol/L、pH7.2的磷酸鹽緩沖液（PBS）購自博士德生物工程有限公司。

1.2.2 1%濃度的紅細胞懸液 采用真空抗凝管采集未經免疫的健康公雞（由本單位實驗室提供）靜脈全血，輕微搖晃均勻，用配制好的pH7.2、0.01 mol/L磷酸鹽緩沖液（PBS）反復多次洗滌干凈后，按照比例配制成1%紅細胞懸液，在4 ℃下保存備用。

1.3 檢測方法

本試驗操作均參照GB/T 18936-2003、GB/T 18936-2020高致病性禽流感診斷技術進行，使用血凝抑制試驗（Heamoglutination Inhibition，HI）檢測雞血清樣品中禽流感抗體效價。試驗用標準抗原稀釋倍數為4 HAU，采取完全抑制4 HAU抗原的血清最高稀釋倍數作為HI滴度。根據高致病性禽流感診斷技術規范中抗體效價標準進行判定，即HI效價≥4log2，即判定為個體免疫抗體水平合格；群體免疫抗體合格率≥70%，判為群體抗體合格率達標。

1.4 數據分析

通過EXCEL2019軟件對血清樣品檢測結果進行個體抗體合格率、群體抗體合格率分類統計，整理分析花溪區2019～2021年禽流感在家禽群體間的分布情況。

2 花溪區免疫雞群H5、H7亞型免疫抗體水平

對2019、2020、2021年從花溪區麥坪鎮、石板鎮、馬鈴鄉等13個涉農鄉鎮（街道）的多個養殖場（規模場、大戶、散戶）采集的4 391份雞血清樣品通過HI檢測抗體效價，H5、H7亞型免疫抗體合格率檢測結果見表1，比較圖見圖1。

2.1? ? H5、H7亞型抗體合格率三年的總體情況

從表1可看出，2019～2021年全區高致病性禽流感免H5亞型抗體合格的樣品總數為4 020份，抗體合格率為91.55%；H7亞型抗體合格的樣品總數為4 098份，抗體合格率為93.33%；（H5+H7）抗體平均合格率為92.42%；抗體合格率均超過了90%，大大高于國家標準水平（70%）。

2.2? ? H5、H7亞型抗體合格率比較

從表1可看出，2019年H5亞型抗體合格率90.7%（1 258/1 387），H7亞型抗體合格率91.35%（1 267/1 387）；2020年H5亞型抗體合格率91.58%（1 392/1 520），H7亞型抗體合格率91.97%（1 398/1 520）；2021年H5亞型抗體合格率92.32%（1 370/1 484），H7亞型抗體合格率96.56%（1 433/1 484）；2019～2021年H5亞型抗體合格率為91.55%，H7亞型抗體合格率為93.33%。

從圖1明顯看出，2019～2021年H5和H7亞型抗體合格率均呈逐年上升趨勢，但2020～2021年間H7亞型抗體水平變化最明顯，而且H7亞型每一年的抗體合格率和三年的抗體平均合格率均高于H5亞型。

2.3? ?規模場與大戶、散戶的H5、H7亞型免疫抗體水平

檢測結果見表2，H5、H7亞型抗體合格率比較見圖2所示。

2.3.1 H5亞型抗體合格率 從表2可知，2019年規模場H5亞型抗體合格率為92.04%，大戶、散養戶為88.17%，二者平均合格率為90.7%；2020年規模場為91.95%，大戶、散養戶為90.87%，平均抗體合格率為91.58%；2021年規模場為92.94%，大戶、散養戶為91.3%，平均合格率為92.32%。

2.3.2 H7亞型抗體合格率 從表2可知，2019年規模場H7亞型抗體合格率為92.98%，大戶、散養戶為88.38%，二者平均合格率91.35%；2020年規模場為92.05%，大戶、散養戶為91.82%，平均合格率91.97%；2021年規模場為97.5%，大戶、散養戶為95.03%，平均合格率96.56%。

2.3.3? 規模場與大戶、散養戶抗體合格率比較 地位比較：從表2可知，規模場采集的樣品數占到了總樣品數的60%以上（2019、2020、2021年分別為65.25%、65.39%、62.06%），說明規模化雞場在花溪區養雞業占主流地位。

H5、H7亞型抗體合格率比較：2019～2021年參與隨機抽樣的免疫雞群的H5亞型和H7亞型抗體合格率，規模場均在90%以上，大戶、散養戶均在88%以上，規模場每一年的H5、H7亞型抗體免疫水平總體上要好于大戶、散養戶（圖2），其中2020年規模場與大戶、散戶的H5、H7亞型抗體合格率差值最小，分別為1.08%、0.23%。但無論是規模場還是大戶、散養戶，H7亞型抗體合格率均高于H5亞型。

抗體合格率變化趨勢比較：2019、2020、2021年連續三年，大戶、散養戶的H5、H7亞型抗體合格率變化一直保持上升態勢，但規模場抗體合格率在2020年均出現下降趨勢，見圖2所示。

3 分析與討論

3.1 禽流感抗體總體水平逐年上升

2019、2020、2021年，花溪區高致病性禽流感抗體總水平依次為91.03%、91.78%、96.19%。從監測結果看，三年來，花溪區禽流感免疫抗體水平合格率逐年上升，均高于農業農村部規定的群體合格率（≥70%），說明花溪區對高致病性禽流感防疫工作高度重視，業務技術督促指導到位，扎扎實實做好了家禽群體免疫、防疫工作，且取得良好的成效，為推動花溪區的家禽業健康持續發展做出了貢獻。

3.2? ?規模場禽流感抗體水平略好于養殖大戶、散養戶

從監測結果可看出，無論是H5亞型還是H7亞型，規模雞場的免疫抗體水平均略高于養殖大戶和散養戶，說明規模場的免疫工作做得更到位。分析主要有兩方面的原因：一是規模場設備機械化程度更高、管理比較規范、疫病防控意識更強，且場內的獸醫和技術人員專業水平相對較高，待遇較好，人員穩定性高、流動性小，另外制定的免疫程序更科學合理，因此雞場的免疫工作更為扎實，雞群整體的抗體水平達標率更高；二是近年來，基層獸醫工作負擔越來越重，各版塊重點技術工作人員缺乏，為此大多基層單位存在人員混用的現象，加上防疫經費不足、部分在編人員為非專業人員，使原本薄弱的基層動物疫病防控力量逐漸減弱，因此對散養戶，基層村級防疫人員在每年春秋防疫工作開展難度大，導致部分鄉（鎮、街道）、村畜禽免疫環節和防控措施未嚴格落實到位，免疫環節出現“漏網之魚”，是造成抗體水平參差不齊的主要因素之一。

4 小結

抗體檢測是反映疫苗免疫效果的一個重要依據，是評價和指導動物疫病防控工作的重要措施之一，也是評判疫苗免疫效果的重要手段之一。2019～2021年花溪區監測轄區內大部分免疫雞群高致病性禽流感H5和H7亞型免疫抗體水平，群體合格率超出了國家標準達標率，免疫工作成效顯著。目前及今后，花溪區禽流感防控的重中之重依然是做好高致病性禽流感疫苗免疫工作，無論是監管部門、基層防疫部門還是各類型養殖場，在禽流感防控工作中要杜絕一切僥幸和倦怠心理。區鄉都要充分認識到這項工作的重要性，尤其是部分鄉鎮，要加強對村級防疫人員的監督管理，認真組織開展對散養戶家禽免疫工作，確保不漏戶、不漏禽。抗體監測不僅僅是為了完成上級部門安排的任務，還要區級嚴格建立免疫效果的追溯機制，對抗體檢測效果不理想的養殖場（大戶、散戶），加強督促、指導鄉鎮對轄區家禽群體完成補免工作，確保在二次監測時達到群體免疫合格達標，減少一切影響禽流感疫情的風險因素，為當地家禽養殖業的持續快速發展提供安全和保障。

參考文獻：

[1]? 馮秀紅，郝建勇，曹建偉，等.廣東江門地區2011-2013年H5、H9亞型禽流感抗體監測結果分析[J].廣東畜牧獸醫科技，2015，40（6）：30-31.

[2]? 成進，彭曉玲，夏俊，等.2009-2010年新疆地區家禽禽流感免疫抗體監測與分析[J].中國動物檢疫，2011，28（7）：51-53.

[3] 甘孟侯.禽流感[M].2版.北京：中國農業出版社，2002：1-3.

[4]? 鄧蒲媛，楊葉，李寧.漢中市H5亞型禽流感抗體監測與分析[J].中國畜牧業，2022（2）：121-122.

Surveillance and Analysis of Immune Antibodies against Avian Influenza H5 and H7 in Huaxi District during 2019 to 2021

PU Tongcan，LI Shijing，ZHOU Li，LUO Shixia

（Guiyang Huaxi District Agriculture and Rural Bureau，

Guiyang? 550025，Guizhou，China）

Abstract：? To understand the immunization effect of avian influenza in Huaxi district，during 2019 to 2021， 4 391 serum samples were randomly collected from scale field （free-range farm） in some agriculture-related townships （streets） in Huaxi District， and antibodies against H5 and H7 subtypes of avian influenza were detected by hemagglutination inhibition test，according to the antibody titers of diagnostic techniques for highly pathogenic avian influenza，the HI antibody titers were ≥4log2，which indicated that the individual's immune efficacy was qualified.The qualified rate of group antibody was ≥70%， which was judged as the qualified rate of group antibody.The results showed that during 2019 to 2021， the total antibody levels of highly pathogenic avian influenza were 91.03%， 91.78%， 96.19%， indicating that the qualified rate of avian influenza antibody in Huaxi district showed an increasing trend year by year.The antibody level of H7 subtype was higher than H5 subtype. The level of immune antibody in scale farm was higher than that in large and free-range farm. In conclusion，the qualified rate of immune antibody for avian influenza is higher than the national standard，indicating that the prevention and control of avian influenza in Huaxi District was relatively solid. Monitoring of AIV antibody provides data support for scientific prevention of H5 and H7 subtype avian influenza in Huaxi District， and promotes the healthy and sustainable development of poultry industry in Huaxi District.

Keywords：H5 and H7 subtypes of Avian influenza; Hemagglutination inhibition; Qualified rate of antibody; Evaluate

收稿日期：2023-05-31

第一作者簡介：浦同燦（1980—），男，博士研究生，高級獸醫師，主要從事動物疫病預防控制及畜牧技術推廣工作，E-mail：447236210@qq.com。

*通信作者簡介：李世靜（1990—），女，碩士研究生，獸醫師，主要從事動物疫病預防控制及衛生監督工作，E-mail：3316867704@qq.com。