豬丁型冠狀病毒的病原特征及致病機制

岳 彬

（阜新市細河區(qū)動物疫病預防控制中心，遼寧 阜新 123000）

豬丁型冠狀病毒是一種長源性、高接觸性傳染病，嘔吐、脫水、腹瀉為主要臨床癥狀，對哺乳期仔豬造成嚴重威脅。此病易同其他豬病混合感染或繼發(fā)感染其他疾病，嚴重影響生豬養(yǎng)殖業(yè)的經濟收益。現(xiàn)對豬丁型冠狀病毒的病原特征與綜合防止做簡要介紹，為養(yǎng)殖戶提供該病的防控參考。

1 病原學特征

豬丁型冠狀病毒為δ 冠狀病毒屬成員之一，是不分節(jié)段的單鏈正股有包膜的RNA病毒，病毒顆粒呈典型的冠狀病毒的球形，半徑60～90納米，囊膜上有凸起的“皇冠”狀結構，其基因組是冠狀病毒中最小的，為25.4～31.7 kb。豬丁型冠狀病毒對外界溫度比較敏感，在50℃的環(huán)境中1小時或60℃中半小時可失活，經酸處理后病毒的穩(wěn)定性略有下降，但是對氯仿不敏感。本病毒在25℃的環(huán)境中，能夠在飼料和原料中生存21天，21天以后病毒存活量略有減少。

豬丁型冠狀病毒的毒株為50余種，全基因的遺傳進化關系為，中國毒株、韓國毒株和美國毒株同屬一個分支，韓國毒株同美國毒株關系更近，全基因的同源率高達99.6%；泰國毒株屬于另一分支。

豬丁型冠狀病毒能夠用豬腎上皮細胞與豬睪丸細胞進行分離培養(yǎng)，一般情況下，對此病毒進行分離培養(yǎng)較難，應添加胰腺酶或胰酶等，細胞病變后表現(xiàn)為呈圓形、匯集，直至脫落。

2 病毒的致病性

豬丁型冠狀病毒能夠引發(fā)腹瀉、嘔吐、嗜睡等癥狀，偶見采食量減少、體表溫度升高的癥狀，與豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉的臨床癥狀難以區(qū)分，應借助實驗室診斷加以辨別診斷。有報道，兩周齡以內的仔豬易感染此病毒，通常伴有輕中度腹瀉，病變部位為小腸；隨后腹瀉情況嚴重、嘔吐，排泄病毒并伴隨較重的萎縮性腸炎，證實豬丁型冠狀病毒具備一定的腸道致病性。人工感染與自然感染引發(fā)的生豬的臨床表現(xiàn)極為相似。人工感染無菌小豬的腹瀉癥狀較為嚴重，感染21天后在普通仔豬排泄物中仍可檢測到病毒。

3 流行特點

2012年此病毒首次在中國香港被報道，兩年后在美國首次在乳豬和母豬糞便中檢測到此病毒，臨床表現(xiàn)為厭食、脫水、腹瀉，甚至死亡。隨后在韓國與我國腹瀉豬的糞便中檢測到此病毒。有研究證實豬丁型冠狀病毒為腸道性病原體，不同年齡的生豬均可感染，其臨床癥狀同豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉類似，但是死亡率低于后兩者。目前豬丁型冠狀病毒已在多個國家和地區(qū)廣泛流行，常與豬流行性腹瀉混合感染。

4 臨床癥狀

該病毒能夠感染各個年齡段的生豬，通過糞-口和被污染的飼養(yǎng)用具等非生物媒介傳染給健康豬只。日齡越小的仔豬臨床表現(xiàn)越顯著。主要癥狀為腹瀉、嘔吐和脫水，同博卡病毒、庫布病毒的癥狀相比較輕，并能引發(fā)肺部炎癥。若5～15日齡的生豬感染此病，發(fā)病較重，迅速蔓延，持續(xù)腹瀉3～4日后，造成脫水衰竭死亡。成年豬染病后癥狀較輕，可耐過自愈，但是其飼料轉化率與生長性能受到嚴重的影響。

5 病理變化

豬丁型冠狀病毒主要感染空腸與回腸，剖檢可見小腸內壁變薄，盲腸與結腸腫脹，充滿黃色物質，小腸與胃內可見尚未完全消化的乳凝塊，病情嚴重者可見胸腔和腹腔出現(xiàn)積水，胸腺萎縮，小腸和腸系膜充血。

6 病毒的檢測

豬丁型冠狀病毒、豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉引發(fā)的生豬的臨床表現(xiàn)與病理變化比較相似，難以分辨，需要借助實驗室診斷開展鑒別診斷。此病毒的檢測方法主要有血清學和病毒學方法。血清學檢測方法包括間接熒光抗體測定、熒光微球免疫實驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗、病毒中和試驗。病毒學檢測方法為電子顯微鏡檢測病毒顆粒、檢測或病毒、檢測病毒核酸和檢測病毒抗原。

6.1 血清學檢測方法

第一，中和試驗。將豬丁型冠狀病毒毒株混合連續(xù)倍比稀釋的等量血清，在37℃的環(huán)境下中和1小時，接種于培養(yǎng)板上的單層豬睪丸細胞或豬腎細胞，進行培養(yǎng)，中和效價等于或大于1∶2即可判定為陽性。此方法靈敏度高，但操作程序復雜，受到細胞與技術水平等條件的限制，臨床應用存在一定的困難。

第二，免疫熒光試驗。研究人員使用免疫熒光染色試驗已在豬丁型冠狀病毒感染的細胞培養(yǎng)中，進行病毒分離。此技術檢測效率高、敏感度較高、特異性強，但操作步驟繁瑣，且尚未解決非特異性染色問題。

6.2 病原學檢測方法

第一，電子顯微鏡。通過電子顯微鏡能夠觀察到此病毒的形態(tài)。但電鏡敏感度低，且對病毒顆粒數(shù)量要求較多，且設備價格昂貴，需要專業(yè)技術人員進行操作，因而不適合用于臨床常規(guī)檢測方法。

第二，PCR檢測法。利用豬睪丸細胞和豬腎細胞對豬丁型冠狀病毒進行擴增培養(yǎng)后，通過PCR進行鑒定。RT-PCR檢測法無需分離病毒，其優(yōu)點為靈敏度高、省時、省力、高效。實時熒光定量RT-PCR法的優(yōu)勢為特異性強、敏感度高、定量準確、檢測速度快、重復性佳、全封閉反應等。目前商業(yè)化的實時熒光定量RT-PCR檢測試劑盒，可進行豬丁型冠狀病毒、豬傳染性胃腸炎病毒和豬流行性腹瀉病毒的鑒別檢測，適合應用于此病毒的常規(guī)檢測。

7 綜合防控

7.1 早發(fā)現(xiàn)早治療

豬丁型冠狀病毒可引發(fā)養(yǎng)殖場內生豬產生腹瀉，其預防措施和有針對性的治療仍處于探索階段，也未研發(fā)出商品化疫苗以控制該病，臨床治療參照豬傳染性胃腸炎和流行性腹瀉的治療方案。此病的防治應遵循“早發(fā)現(xiàn)早治療”的原則，在養(yǎng)殖場內開展生物安全防控，發(fā)現(xiàn)染病豬只，立即隔離，阻斷傳播途徑，臨床上通常采用止瀉、補液、防止酸中毒和脫水的措施。對染病生豬可采用抗生素治療，如恩諾沙星、氟哌酸、磺胺類等藥物、體液電解質、吸附劑等藥物，以減少因該病造成的病毒與細菌繼發(fā)感染而導致仔豬的死亡。此外，對新生仔豬灌服康復豬的全血或血清，有一定的防治效果。

7.2 強化飼養(yǎng)管理

應強化生豬的飼養(yǎng)管理，建立健全生豬養(yǎng)殖生物安全體系，投喂營養(yǎng)物質豐富的全價飼料，少食多餐，嚴禁投喂質量不佳或霉變飼料，保證豬只機體健康，提升機體抗病能力。定期為豬舍及周圍環(huán)境進行消毒，保證舍內干凈整潔，通風良好，及時清理產房與保育舍的排泄物，定期沖洗飼喂工具等。堅持“自繁自養(yǎng)”原則，禁止從發(fā)生過疫病的養(yǎng)殖場引種，減少病原引入概率，引入健康種豬需要進行全面健康檢測，隔離飼養(yǎng)1個月以上。加強母源抗體，在母豬分娩前3周采用肌注或鼻內接種豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉疫苗，使仔豬通過采食初乳獲得被動免疫，通過人工固定乳頭幫助仔豬盡早吸吮初乳。

8 結束語

豬丁型冠狀病毒為養(yǎng)豬場廣泛流行的病毒，其高致病力引發(fā)飼養(yǎng)人員的高度關注。因此，重視與加強豬丁型冠狀病毒的監(jiān)測、疫苗與特效治療藥物的研發(fā)以減少此病的傳播與蔓延。