紅曲地龍蛋白壓片糖果降脂保肝作用探析

◎ 邸玉青，李 靜

（1.北京核工業醫院心血管內科，北京 102413；2.煙臺南山學院，山東 煙臺 265700）

高血脂是臨床常見的疾病，多由長期高糖、高脂、高油飲食引起。高血脂會導致脂肪在肝臟累積，形成脂肪肝，極易引發心腦血管疾病。據不完全統計[1-2]，我國成人血脂異常總體患病率達到40.40%，且呈大幅度上升趨勢，而30%～50%高血脂人群會合并脂肪肝。科學降脂、保肝護肝成為社會性的自我保健課題，利用藥食同源以及新資源食品資源，探索開發出具有防治疾病功能的新型食品成為一種新趨勢。

紅曲，又稱紅曲米，古時稱為丹曲，被廣泛用于食物加工烹飪中。紅曲應用歷史悠久，《本草綱目》中記載“紅曲：消食、活血、健脾燥胃”等。研究表明[3-4]，紅曲米中的活性成分洛伐他汀和人體膽固醇合成中的羥甲基戊二酰輔酶A（HMG-CoA）還原酶結構相似，是HMG-CoA還原酶的競爭性抑制劑，能有效減少或阻斷內源性膽固醇的合成，從而達到降脂的作用。

《神農本草經》《黃帝內經》中多有記載地龍“活血化瘀”的特性。地龍蛋白是采用現代生物技術從地龍體內提取的復合營養物，含有膠原酶、纖溶酶、纖溶激活蛋白（FA蛋白）、核酸、微量元素等多種成分，已于2009年被原衛生部認定為“新資源食品”。地龍中地龍蛋白含量高達55%～68%，富含纖溶酶、纖溶酶原激活物和膠原酶等活性成分，能溶解微血管內的血栓，讓硬化的微血管恢復彈性，從而解除微血管的堵塞、扭曲變形情況，改善微循環，對機體心血管系統、血液系統、中樞神經系統等有較好的預防作用[5-6]。壓片糖果作為糖果制品類的一種新型食品形態發展迅速，除了工藝先進之外，服用也更為方便，深受年輕消費者的喜愛。通過現代化萃取工藝將紅曲米和地龍蛋白包埋添加到壓片糖果中，制成的紅曲地龍蛋白壓片糖果成分天然，咀嚼服用更利于吸收。本實驗旨在探討新型食品紅曲地龍蛋白壓片糖果的降脂保肝作用，為后續開發新型食品提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

紅曲地龍蛋白壓片糖果（國內某食品廠研發，由紅曲和地龍蛋白組合，其余為輔料，0.45 g/片，推薦食用量為紅曲0.12 g·d-1、地龍蛋白0.6 g·d-1）；辛伐他汀片（杭州默沙東制藥有限公司）；生理鹽水（北京化學試劑公司）；普通飼料（北京華阜康生物科技股份有限公司）；肝組織生化指標試劑盒（上海酶聯生物科技有限公司）。

高脂飼料配比：普通飼料中添加1%膽固醇、10%豬油、0.5%脫氧膽酸鈉（進一步誘發小鼠高脂血癥）及適量膽酸鹽（增加外源性膽固醇的吸收）。

1.2 儀器與設備

微量移液器，賽默飛世爾科技（中國）有限公司；全自動生化儀、低速冷凍離心機，科大創新股份有限公司；恒溫水浴鍋，南京太倉醫用設備儀器廠；MS-TS電子天平，梅特勒-托利多國際有限公司；AH-20全自動均質器，睿科集團股份有限公司。

1.3 試驗動物

昆明種清潔級健康雄性小鼠60只，體重21～26 g，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供，試驗前適應性喂養一周。

1.4 試驗方法

1.4.1 動物造模分組

雄性昆明種小鼠60只適應性喂養結束后，取血檢測，取10只血脂正常小鼠為正常對照組，飼以普通飼料，其余50小鼠飼以高脂飼料，持續45 d后，禁食不禁水12 h，尾靜脈取血測血脂，總膽固醇（Total Cholesterol，TC）、三酰甘油（Triglyceride，TG）、低密度脂蛋白膽固醇（Low Density Lipoprotein Cholesterol，LDL-C）升高、高密度脂蛋白膽固醇（High Density Lipoprotein Cholesterol，HDL-C）降低則為造模成功。取造模成功小鼠40只，按血脂水平將其隨機均分為模型對照組、辛伐他汀組、壓片糖果低（0.15 g·kg-1，即紅曲0.02 g·kg-1、地龍蛋白0.1 g·kg-1）、高劑量組（0.30 g·kg-1，即紅曲0.04 g·kg-1、地龍蛋白0.2 g·kg-1），每組10只。辛伐他汀組每日灌胃10 mL·kg-1辛伐他汀溶液，壓片糖果組給予不同濃度溶液（臨用前用1%羧甲基纖維素鈉溶液配制成相應濃度）。正常對照組、模型對照組每日給予等量生理鹽水。5組小鼠的灌胃體積均為10 mL·kg-1，每天1次，持續6周，飼喂飼料同前。

1.4.2 小鼠血清生化指標的測定

末次灌胃后，各組小鼠禁食不禁水12 h，腹部主動脈取血，置于3 200 r·min-1離心機中離心10 min，全自動生化儀測定血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C和谷草轉氨酶（Aspartate Aminotransferase，AST）、谷丙轉氨酶（Alanine Transaminase，ALT）含量，記錄試驗數據。

1.4.3 小鼠肝指數的測定

處死小鼠，經濾紙處理后，稱量肝臟重量，并根據公式（1）計算出肝指數。

1.4.4 小鼠肝臟生化指標及氧化指標的測定

TC測定：取5 g小鼠肝組織，置于預冷后的生理鹽水中，制成10%勻漿液，4 ℃下靜置抽提24 h，于3 000 r·min-1離心機中離心15 min，取上清液測定TC含量。

TG、超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）、丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量測定：取1 g小鼠肝組織置于生理鹽水中，制成10%勻漿液，4 ℃下靜置抽提48 h，于3 000 r·min-1離心機中離心15 min，取上清液測定各指標。

1.5 統計學分析

所有試驗數據使用Excel建立數據庫，使用SPSS 17.0軟件進行數據統計分析，組間差異采取方差檢驗，P＜0.05表明數據具有顯著性差異，P＜0.01表明數據具有極顯著差異。

2 結果與分析

2.1 紅曲地龍蛋白壓片糖果對血清生化指標的影響

表1試驗結果顯示，模型對照組小鼠TC、TG、LDL-C含量顯著高于正常對照組，HDL-C含量低于正常對照組（P＜0.05或P＜0.01）。與模型對照組相比，辛伐他汀組與壓片糖果低、高各劑量組TC、TG、LDL-C含量顯著降低，HDL-C含量顯著增加（P＜0.05或P＜0.01）。

表1 紅曲地龍蛋白壓片糖果對血清生化指標的影響表

2.2 紅曲地龍蛋白壓片糖果對肝指數及肝臟功能的影響

表2試驗結果顯示，與模型對照組相比，辛伐他汀組和壓片糖果低、高劑量組的小鼠肝指數明顯下降，ALT和AST活性明顯降低，各指標均有顯著差異（P＜0.05或P＜0.01）。

表2 紅曲地龍蛋白壓片糖果對肝指數及肝臟功能的影響表

2.3 紅曲地龍蛋白壓片糖果對肝臟生化指標及氧化指標的影響

表3試驗結果顯示，與模型對照組相比，辛伐他汀組、壓片糖果各劑量組TC、TG、MDA含量減少，SOD含量增加，各指標均有差異顯著（P＜0.05或P＜0.01）。

表3 紅曲地龍蛋白壓片糖果對肝臟生化指標及氧化指標的影響表

3 結論與討論

本實驗采用高脂飼料誘導高脂血癥小鼠模型，模型對照組小鼠血清TC、TG、LDL-C含量升高，HDL-C含量降低，表明小鼠造模成功。AST、ALT是臨床上常用于檢測肝功能的指標，一般主要存在于肝臟中，當肝臟受損，這兩種轉氨酶則會被釋放到血清中，使血清中AST、ALT增高[7]。本實驗中，模型組小鼠的AST、ALT活性增高，且肝臟系數增加，說明小鼠肝臟脂肪顆粒堆積，且出現了一定的肝損傷。試驗結果顯示，與模型對照組相比，壓片糖果低、高各劑量組TC、TG、LDL-C含量顯著降低，HDL-C含量顯著增加，（P＜0.05或P＜0.01），說明壓片糖果可以調節血清中各生化指標，調理血液脂質代謝；與此同時，低、高劑量組的小鼠肝指數明顯下降，血清ALT和AST活性明顯降低，表明壓片糖果可以減輕其脂肪肝，降低肝損傷程度，對肝臟有一定的保護作用。另外，高脂飼料喂養后，模型對照組小鼠肝臟TC、TG含量增加，體內過氧化反應增加、肝臟抗氧化能力降低，二者相互作用導致小鼠脂質代謝異常。試驗結果顯示，與模型對照組相比，壓片糖果各劑量組TC、TG、MDA含量減少，SOD含量增加，各指標均有顯著性差異（P＜0.05或P＜0.01）。提示紅曲地龍蛋白壓片糖果可以輔助降低小鼠肝臟脂質水平，改善肝臟氧化應激的狀態。

綜上所述，紅曲地龍蛋白壓片糖果可調節血脂水平和脂質代謝紊亂，減少肝臟氧化應激損傷，具有降脂保肝作用，是一款健康的新型食品。