血清Caspase-3、Lp-PLA2水平與突發性耳聾病情嚴重程度和預后的關系

崔彥儒，高偉，鄭艷秋

內蒙古醫科大學附屬醫院耳鼻咽喉頭頸外科，呼和浩特 010059

突發性耳聾（SD）是指72 h內突然發生，沒有可識別原因，且至少兩個相鄰頻率聽力下降≥20 dBHL的感音神經性聽力損失，可伴有頭暈、耳鳴、耳脹等不適感［1］。近年來，SD發病率呈上升趨勢，盡管SD具有自愈傾向，但部分患者恢復程度不一，可能出現不可逆的聽力損失，影響患者生活質量［2］。研究表明，耳蝸細胞凋亡和炎癥反應參與SD發生、發展［3］。半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）是一種通過裂解細胞脫氧核糖核酸促進細胞凋亡的蛋白酶［4］。據報道，Caspase-3在順鉑誘導的耳聾小鼠耳蝸組織內表達上調［5］。脂蛋白相關磷脂酶A2（Lp-PLA2）是一種磷脂酶，能水解氧化磷脂參與炎癥反應［6］。Lp-PLA2基因多態性與SD有關［7］。本研究探討血清Caspase-3、Lp-PLA2水平與SD病情嚴重程度和預后的關系，以期為SD防治提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2019年1月—2022年8月我院收治的100例SD患者（SD組），其中男59例、女41例，年齡20～81（49.46 ± 13.63）歲；體質量指數18.70～28.43（22.36 ± 1.73）kg/m2；癥狀：耳鳴86例、暈眩31例、耳脹27例；聽力曲線分型［8］：低頻下降型33例、高頻下降型26例、平坦下降型33例、全聾型8例。納入標準：①符合《突發性聾診斷和治療指南（2015）》［8］診斷標準；②年齡≥18歲；③單耳SD。排除標準：①合并偏頭痛、梅尼埃病、傳導性聽力損失、慢性中耳炎、聽覺創傷等其他耳部疾病；②先天遺傳聾或耳科手術史；③近期急慢性感染或既往心力衰竭、中風；④合并造血系統、免疫系統、神經系統損害、嚴重心肝腎功能損害、惡性腫瘤；⑤近3個月有免疫抑制劑、抗生素使用史；⑥復發性SD。參考全球疾病負擔聽力損失專家組定義［9］將SD患者分為輕度聽力損失20例［純音平均聽閾（PTA）：20～40 dB‐HL］、中度聽力損失43例（PTA：41～60 dBHL）、重度聽力損失25例（PTA：61～80 dBHL）、極重度聽力損失12例（PTA：>81 dBHL）。SD患者均參考指南［8］根據不同聽力損失情況接受治療，并根據臨床療效分為預后不良（無效）38例（預后不良組）、預后良好（痊愈+顯效+有效）62例（預后良好組）。另選取同期60例體檢健康且聽力正常者為對照組，其中男35例、女25例，年齡18～78（50.14 ± 10.75）歲；體質量指數18.53～26.87（22.42 ± 1.62）kg/m2。兩組一般資料比較差異無統計學意義（P均>0.05）。患者及家屬對本研究知情并簽署同意書，且經醫院倫理委員會批準（審批編號：2019-0243）。

1.2 血清Caspase-3、Lp-PLA2檢測 收集SD組入院后次日和對照組體檢時采集3 mL靜脈血，3 000 r/min離心15 min（離心半徑10 cm），取上層血清，采用酶聯免疫吸附法（北京百奧萊博科技有限公司，編號：ZN2053-OJR、ZN2369-LZH）檢測Caspase-3、Lp-PLA2。

1.3 統計學方法 采用SPSS28.0統計軟件。計量資料符合正態分布以表示，兩組間比較采用t檢驗，多組間比較采用F檢驗；不符合正態分布計量資料以M（P25，P75）表示，兩組間比較采用U檢驗，多組間比較采用H檢驗，組間兩兩比較采用Bonferroni校正；計數資料以例（%）表示，比較采用χ2檢驗；Spearman相關性分析SD患者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平與PTA的相關性；多因素Logistic回歸分析SD患者預后不良的影響因素；受試者工作特征（ROC）曲線分析血清Caspase-3、Lp-PLA2水平對SD患者預后不良的預測價值。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 SD組與對照組血清Caspase-3、Lp-PLA2水平比較 SD組與對照組血清Caspase-3水平分別為17.32（12.56，21.77）、10.86（9.59，11.44）pg/mL，Lp-PLA2水平分別為（18.36 ± 3.85）、（13.12 ±2.44）ng/mL，SD組血清Caspase-3、Lp-PLA2水平高于對照組（P均<0.05）。

2.2 不同病情嚴重程度SD患者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平比較 輕度、中度、重度、極重度聽力損失者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平依次升高（P均<0.05）。見表1。

表1 不同病情嚴重程度SD患者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平比較

2.3 SD患者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平與PTA的相關性 SD患者PTA為22～96［52.00（44.00，70.00）］dBHL，Spearman相關性分析顯示，SD患者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平與PTA呈正相關（r分別為0.816、0.848，P均<0.05）。

2.4 SD患者預后不良的影響因素 預后不良組年齡大于預后良好組，PTA、全聾型比例和血清Caspase-3、Lp-PLA2水平高于預后良好組（P均<0.05），見表2。以年齡、PTA、全聾型（是為“1”，否為“0”）、Caspase-3、Lp-PLA2為自變量，預后不良（是為“1”，否為“0”）為因變量。多因素Logistic回歸分析顯示，年齡增加、PTA升高、全聾型、Caspase-3升高、Lp-PLA2升高為SD患者預后不良的獨立危險因素（P均<0.05）。見表3。

表2 預后不良組與預后良好組臨床資料比較

表3 影響SD患者預后不良的多因素Logistic回歸分析

2.5 血清Caspase-3、Lp-PLA2水平對SD患者預后不良的預測價值 ROC曲線分析顯示，血清Caspase-3、Lp-PLA2水平聯合預測SD患者預后不良的曲線下面積（AUC）大于Caspase-3、Lp-PLA2單獨預測（Z分別為3.038、3.174，P均<0.05）。見表4。

表4 血清Caspase-3、Lp-PLA2水平對SD患者預后不良的預測價值

3 討論

SD是耳鼻喉科的常見急癥，男女發病率相似，以單側發病為主，雙側較少見，目前病因尚不完全明確，多數學者認為與睡眠障礙、生活不規律、情緒波動、壓力增加、精神緊張等有關［10］。盡管近年來局部和全身的激素、抗病毒、高壓氧、改善血液流變學藥物、抗病毒藥物、中耳瘺管修補術等治療方法不斷完善，但SD病因不明導致治療上仍缺乏針對性，使得不同患者預后存在較大差異［11］。因此有必要探索SD相關生物標志物，為SD治療和預后評估提供理論依據。

SD發病確切機制尚不明確，目前研究認為與炎癥反應、病毒感染、內耳微循環障礙、免疫性疾病等密切相關［12］。近年研究發現，耳蝸毛細胞凋亡也參與SD發生、發展，耳蝸毛細胞是聽覺感受器，與內耳中管狀器官耳蝸中的神經相連，耳毒性藥物、炎癥、噪聲暴露、年齡增長老化等因素均可導致毛細胞不可逆損害，當眾多因素引起耳蝸毛細胞凋亡則會阻礙信號傳至中樞，導致SD發生［13］。胱天蛋白酶是一組以酶原形式存在于細胞質內并介導細胞凋亡的半胱氨酸蛋白酶，Caspase-3是該家族內介導細胞凋亡的關鍵執行分子，在細胞凋亡早期被激活，能裂解相應的胞質胞核底物加速細胞凋亡［14］。HAYASHI等［15］實驗報道，病毒感染能通過腫瘤壞死因子相關的凋亡誘導配體誘導耳蝸毛細胞Caspase-3表達，抑制Caspase-3表達能抑制耳蝸毛細胞凋亡。XIE等［16］實驗報道，Caspase-3在脂多糖誘導的豚鼠聽力損失模型中大量表達，抑制耳蝸毛細胞內Caspase-3表達能改善豚鼠聽力。這些研究均提示Caspase-3與體力損失密切相關。本研究結果顯示，SD患者血清Caspase-3水平升高，并隨著聽力損失程度增加而升高，說明血清Caspase-3水平升高參與SD發生、發展，分析原因可能是SD患者耳蝸毛細胞凋亡導致Caspase-3被釋放入血，引起血清Caspase-3水平升。而Caspase-3作為細胞凋亡的關鍵執行分子，其水平升高加劇耳蝸毛細胞凋亡，導致聽力損失加重［14-16］。

炎癥反應是SD發生發展的關鍵機制之一，不僅能直接破壞耳蝸內毛細血管完整性引起聽力障礙，還能引起內耳局部組織細胞缺血、缺氧和炎癥，通過內耳微循環障礙減少內耳血供，導致聽力障礙［17］。Lp-PLA2是巨噬細胞和中性粒細胞等免疫細胞分泌的一種血管特異性炎癥因子，能通過其酶活性水解低密度脂蛋白中氧化磷脂，形成氧化游離脂肪酸和溶血卵磷脂等脂類促炎物質，這些物質又能通過趨化炎癥細胞生成更多促炎物質，參與炎癥發生、發展［18］。近年研究證實，SD的發病機制與心腦血管疾病相似［3］。Lp-PLA2作為血管特異性炎癥因子，已被證實與冠心病、腦卒中等心腦血管疾病相關［19］。同時有研究發現，Lp-PLA2基因多態性參與SD發生［7］。本研究結果顯示，SD患者血清Lp-PLA2水平升高，并隨著聽力損失程度增加而升高，說明血清Lp-PLA2水平升高參與SD發生、發展，分析原因可能是SD患者耳蝸炎癥反應導致Lp-PLA2升高。Lp-PLA2升高能激活血管壁炎癥通路，促進炎癥反應，增加耳蝸內毛細血管破壞，導致聽力損失加重。同時Lp-PLA2還可能損傷血管內皮導致管腔狹窄或堵塞，可能導致內耳微循環障礙，造成內耳局部組織細胞缺血、缺氧、水腫等，加重聽力損失［20］。

本研究通過分析SD患者預后不良影響因素發現，血清Caspase-3、Lp-PLA2水平升高為SD患者預后不良的獨立危險因素，提示二者可能成為SD患者預后不良的輔助預測指標，分析原因是Caspase-3、Lp-PLA2均參與SD發生、發展，血清Caspase-3、Lp-PLA2水平升高反映聽力損失程度更嚴重，因此預后更差。本研究結果還發現，年齡增加、PTA升高和全聾型能獨立影響SD患者預后，分析原因是隨著年齡增長，血管壁順應性、微循環血液流變學和內耳聽覺功能退化，影響聽力恢復，因此療效更差［21］；PTA升高和全聾型反映SD患者聽力損失程度更嚴重，因此預后更差。繪制ROC曲線發現，血清Caspase-3、Lp-PLA2水平分別為16.82 pg/mL、20.92 ng/mL時，預測SD患者預后不良的AUC分別為0.784、0.780，血清Caspase-3、Lp-PLA2水平聯合預測SD患者預后不良的AUC增至0.901，說明血清Caspase-3、Lp-PLA2水平可能成為SD患者預后不良的輔助預測指標，且二者聯合能提升預測價值。

綜上所述，SD患者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平明顯升高，與SD患者聽力損失加重和預后不良密切相關，可能成為SD患者預后不良的輔助預測指標，且二者聯合能提升預測價值。