老年PMR抗MPO抗體、GPⅠb及抗CarP抗體檢測意義

姜建昌 楊美綠 張智勇 盧陽

[摘要]?目的?探討老年風濕性多肌痛（polymyalgia?rheumatica，PMR）血抗髓過氧化物酶（anti-myeloperoxidase，抗MPO）抗體、血小板糖蛋白Ⅰb（platelet?glycoprotein?Ⅰb，GPⅠb）及抗氨甲酰化蛋白（anti-carbamylated?protein，抗CarP）抗體檢測的臨床意義。方法?選取2019年7月至2022年1月溫州市人民醫院風濕免疫科收治的65例老年PMR患者（年齡≥60歲）為觀察組，65例非老年PMR患者（年齡<60歲）為對照組，兩組均予以潑尼松15mg/d連續治療4周，檢測兩組患者治療前后PMR活動度評分（PMR?activity?score，PMR-AS）、C反應蛋白（C-reactive?protein，CRP）、紅細胞沉降率（erythrocyte?sedimentation?rate，ESR）、抗MPO抗體、GPⅠb和抗CarP抗體的變化；各指標和PMR-AS間的相關性采用Pearson相關分析；繪制受試者操作特征曲線（receiver?operating?characteristic?curve，ROC曲線）分析各指標對疾病活動程度判斷的準確性。結果?治療后兩組患者的PMR-AS、CRP、ESR、抗MPO抗體、GPⅠb和抗CarP抗體水平及病例異常率均較治療前明顯下降（P<0.05），且觀察組患者下降更顯著（P<0.05）；老年PMR患者的CRP、ESR、抗MPO抗體、GPⅠb和抗CarP抗體水平與PMR-AS均呈正相關（r=0.580、0.808、0.755、0.739、0.811，P均<0.001）；CRP、ESR、抗MPO抗體、GPⅠb和抗CarP抗體對疾病活動度準確性判斷的ROC曲線下面積（area?under?the?curve，AUC）分別為0.753、0.811、0.830、0.856、0.887，診斷敏感度分別為62.50%、75.25%、65.50%、75.00%和79.50%，診斷特異性分別為75.25%、80.05%、82.55%、87.50%和90.05%。結論?血抗MPO抗體、GPⅠb和抗CarP抗體水平與老年PMR患者病情活動度呈正相關，潑尼松治療后各指標水平值下降明顯，有望成為老年PMR患者疾病活動情況和治療效果的監測指標。

[關鍵詞]?風濕性多肌痛；抗髓過氧化物酶抗體；血小板糖蛋白Ⅰb；抗氨甲酰化蛋白抗體

[中圖分類號]?R446.11??????[文獻標識碼]?A??????[DOI]?10.3969/j.issn.1673-9701.2023.21.007

Significance?of?detecting?anti-MPO?antibody，?GPⅠb?and?anti-CarP?antibody?in?elderly?PMR?patients

JIANG?Jianchang，?YANG?Meilyu，?ZHANG?Zhiyong，?LU?Yang

Department?of?Rheumatology?and?Immunology，?Wenzhou?Peoples?Hospital，?Wenzhou?325000，?Zhejiang，?China

[Abstract]?Objective?To?investigate?the?clinical?significance?of?blood?anti-myeloperoxidase?（anti-MPO）?antibody，?platelet?glycoprotein?Ⅰb?（GPⅠb）?and?anti-carbamylated?protein?（anti-CarP）?antibody?in?elderly?polymyalgia?rheumatica?（PMR）.?Methods?65?elderly?PMR?patients?（age≥60?years）?were?included?in?observation?group?and?65?non-elderly?PMR?patients?（age<60?years）?were?included?in?control?group，?the?two?groups?were?treated?with?prednisone?15mg/d?for?4?weeks.?The?changes?of?PMR?activity?score?（PMR-AS），?C-reactive?protein?（CRP），?erythrocyte?sedimentation?rate?（ESR），?anti-MPO?antibody，?GPⅠb?and?anti-CarP?antibody?were?measured?before?and?after?treatment.?Pearson?correlation?analysis?was?used?to?analyze?the?correlation?between?each?index?and?PMR-AS.?The?receiver?operating?characteristic?（ROC）?curve?was?used?to?analyze?the?accuracy?of?each?index?to?the?degree?of?disease?activity.?Results?After?treatment，?the?levels?and?case?abnormal?rates?of?PMR-AS，?CRP，?ESR，?anti-MPO?antibody，?GPⅠb?and?anti-CarP?antibody?in?two?groups?were?significantly?lower?than?those?before?treatment?（P<0.05），?and?the?decrease?was?more?significant?in?observation?group?（P<0.05）.?The?levels?of?serum?CRP，?ESR，?anti-MPO?antibody，?GPⅠb?and?anti-CarP?antibody?in?elderly?patients?with?PMR?were?positively?correlated?with?PMR-AS?（r=0.580，?0.808，?0.755，?0.739，?0.811，?P<0.001）.?The?ROC?curve?show?that?the?area?under?the?curve?（AUC）?of?CRP，?ESR，?anti-MPO?antibody，?GPⅠb?and?anti-CarP?antibody?in?judging?the?accuracy?of?disease?activity?were?0.753，?0.811，?0.830，?0.856?and?0.887?respectively，?where?diagnostic?sensitivity?was?62.50%，?75.25%，?65.50%，?75.00%?and?79.50%?respectively，?and?the?diagnostic?specificity?was?75.25%，?80.05%，?82.55%，?87.50%，?90.05%?respectively.?Conclusion?The?levels?of?blood?anti-MPO?antibody，?GPⅠb?and?anti-CarP?antibody?were?positively?correlated?with?the?disease?activity?of?elderly?PMR?patients，?where?the?level?decreased?significantly?after?prednisone?treatment，?which?are?expected?to?become?a?monitoring?index?of?disease?activity?and?treatment?effect?of?elderly?PMR?patients.

[Key?words]?Polymyalgia?rheumatica;?Anti-MPO?antibody;?Platelet?glycoproteinⅠb;?Anti-CarP?antibody

風濕性多肌痛（polymyalgia?rheumatica，PMR）是一組與遺傳、環境和炎癥等多種因素有關的疾病[1]。本病常見于50歲以上人群，受年齡影響且易被臨床忽視，主要臨床表現為肩頸帶肌及髖部帶肌等四肢近端肌群疼痛和僵硬，可伴發熱、乏力、體質量下降、C反應蛋白（C-reactive?protein，CRP）升高和紅細胞沉降率（erythrocyte?sedimentation?rate，ESR）加快等。該病誤診和漏診率較高，治療以糖皮質激素為主，缺乏特異性診斷和療效判斷的血清生物學指標[2]。抗髓過氧化物酶（anti-myeloperoxidase，抗MPO）抗體是一種與自身免疫性血管炎、類風濕關節炎、自身免疫性肝炎等自身免疫性疾病有一定關聯的血清學標志物[3]。血小板糖蛋白Ⅰb（platelet?glycoprotein?Ⅰb，GPⅠb）是一種反映血小板病變的物質，大多數風濕免疫系統疾病常是凝血系統和免疫系統的共同異常作用導致[4]。抗氨甲酰化蛋白（anti-carbamylated?protein，抗CarP）抗體是一種機體在免疫原刺激作用下發生免疫應答產生的自身抗體，且受慢性炎癥進程影響，對自身免疫性疾病活動度和關節損傷具有一定的預測和診斷價值[5]。目前關于老年PMR患者血抗MPO抗體、GPⅠb和抗CarP抗體水平及潑尼松治療前后表達變化的文獻報道甚少，故本研究旨在探討血抗MPO抗體、GPⅠb和抗CarP抗體水平與老年PMR的相關性及臨床意義，現報道如下。

1??資料與方法

1.1??一般資料

選取2019年7月至2022年1月溫州市人民醫院風濕免疫科收治的65例初診確診的老年PMR患者（年齡≥60歲）作為觀察組，其中男20例，女45例，平均年齡（72.02±5.33）歲，平均體質量（52.91±4.51）kg，平均病程（12.11±5.85）個月；選取65例初診確診的非老年PMR患者（年齡<60歲）作為對照組，其中男23例，女42例，平均年齡（53.01±4.12）歲，平均體質量（53.15±4.39）kg，平均病程（11.95±6.01）個月。兩組患者在性別比、體質量、平均病程等方面比較差異無統計學意義（P>0.05）。本研究經溫州市人民醫院倫理委員會批準（倫理審批號：2021-272）。納入標準：①年齡≥60歲；②雙肩部疼痛；③CRP和（或）ESR、抗MPO抗體、GPⅠb、抗CarP抗體水平升高[6]。在滿足上述3項條件的前提下，再對患者進行其他癥狀評分：①晨僵時間在45min以上（2分）；②類風濕因子或抗環瓜氨酸抗體陰性（2分）；③髖關節疼痛或活動受限（1分）；④無其他關節受累情況（1分）。上述評分之和≥4分即診斷為PMR。排除標準：①合并嚴重心、肝、腎臟器疾病或其他嚴重內科疾病者；②合并關節腫瘤、血液系統疾病、彌漫性結締組織病或其他惡性腫瘤者；③近期急性炎癥或慢性乙肝、慢性阻塞性肺疾病等長期慢性炎癥者；④妊娠、哺乳期者；⑤近期服用抗生素、糖皮質激素、抗凝藥物、免疫抑制劑者；⑥無法良好溝通，患有精神方面疾病，依從性差者。

1.2??方法

1.2.1??血CRP、ESR、抗MPO抗體、GPⅠb和抗CarP抗體檢測??空腹抽取6ml靜脈血分別置于含EDTA-K2抗凝劑、1∶4枸櫞酸鈉抗凝劑和不含抗凝劑的真空采血管中。含EDTA-K2抗凝劑的血液經1500轉/min離心4min后分離獲得上層富血小板血漿，加1%甲醛室溫固定，磷酸鹽緩沖液調整血小板濃度為（2.5～3.5）×107/L，取100μl該濃度血小板溶液與50?CD42b-FITC溶液（美國Becton?Dickinson公司）振蕩混勻，避光孵育30min后加2ml溶血素，15min后1500轉/min離心5min，棄上清液再用磷酸鹽緩沖液洗滌2遍用1%甲醛固定30min，用美國Beckman?EPICSX型流式細胞儀進行平均熒光強度測定并記錄陽性百分標記率。1∶4枸櫞酸鈉抗凝劑采血管中血液采用魏氏法進行ESR檢測。參考值：男性<15mm/h，女性<20mm/h。不含抗凝劑的血液3000轉/min離心10min后取上清液置于日立7600全自動生化分析儀上采用免疫比濁法進行CRP檢測，參考值<8mg/L；采用多重微珠免疫法進行抗MPO抗體檢測（試劑盒購自上海一滴準生物科技有限公司），參考值<120AU/ml；采用酶聯免疫吸附試驗（enzyme?linked?immunosorbent?assay，ELISA）進行抗CarP抗體檢測（試劑盒購自上海藍基生物科技有限公司），參考值<10?g/ml。

1.2.2??PMR活動度評分（PMR?activity?score，PMR-AS）[7]??記錄患者初次就診時的生命體征、一般情況、晨僵時間、上臂抬舉情況、疼痛部位和程度及外周關節受累等情況。計算公式PMR-AS=CRP+患者視覺模擬評分法評分+醫生視覺模擬評分法評分+上臂抬舉評分+晨僵時間×0.1。上臂抬舉評分標準：上臂完全無法抬起計3分；上臂抬起高度低于肩胛帶計2分；上臂抬起高度平行于肩胛帶計1分；上臂抬起高度高于肩胛帶計0分。效果判斷：疾病緩解為PMR-AS<1.5分；疾病低度活動為PMR-AS<7分；疾病中度活動為7≤PMR-AS<17分；疾病高度活動為PMR-AS≥17分。

1.2.3??治療方法?給予兩組患者醋酸潑尼松片（批準文號：國藥準字H12020123，生產單位：天津力生制藥股份有限公司，規格：5mg/片）15mg/d，晨8點頓服治療4周。

1.2.4??觀察指標?比較兩組患者治療前后血CRP、ESR、抗MPO抗體、GPⅠb、抗CarP抗體和PMR-AS變化情況。

1.3??統計學方法

應用SPSS?28.0軟件對數據進行分析。計數資料采用例數（百分率）[n（%）]表示，行χ2檢驗；計量資料以均數±標準差（）表示，行t檢驗。各指標和PMR-AS的相關性采用Pearson相關分析。各指標對疾病活動度的準確性判斷采用受試者操作特征曲線（receiver?operating?characteristic?curve，ROC曲線）。檢驗標準設置a=0.05。

2??結果

2.1??兩組患者治療前后各指標比較

治療后兩組患者的PMR-AS、血CRP、ESR、抗MPO抗體、GPⅠb和抗CarP抗體水平均較治療前明顯下降，且觀察組患者的下降更顯著，同組治療前后和兩組間治療后比較差異有統計學意義（P<0.05），見表1和表2。

2.2??兩組患者治療前后各指標病例異常率比較

治療后兩組患者的血CRP、ESR、抗MPO抗體、GPⅠb和抗CarP抗體病例異常率較治療前明顯降低，觀察組患者的下降更顯著，同組治療前后和兩組間治療后病例異常率比較差異有統計學意義（P<0.05），見表3。

2.3??老年PMR患者的各指標與PMR-AS的相關性

老年PMR患者的血CRP、ESR、抗MPO抗體、GPⅠb和抗CarP抗體水平與PMR-AS均呈正相關性（r=0.580，0.808，0.755，0.739和0.811，P均<0.001），見圖1。

A.CRP與PMR-AS的相關性；B.ESR與PMR-AS的相關性；C.抗MPO抗體與PMR-AS的相關性；D.GPⅠb與PMR-AS的相關性；E.抗CarP抗體與PMR-AS的相關性

2.4??各指標對老年PMR疾病活動度的準確性分析

繪制ROC曲線發現：血CRP、ESR、抗MPO抗體、GPⅠb和抗CarP抗體對疾病活動度準確性判斷的曲線下面積（area?under?the?curve，AUC）分別為0.753、0.811、0.830、0.856、0.887，診斷敏感度分別為62.50%、75.25%、65.50%、75.00%和79.50%，診斷特異性分別為75.25%、80.00%、82.55%、87.50%和90.05%，見圖2。

3??討論

PMR暫無診斷金標準，其病因和發病機制尚不清楚，可能涉及的機制為自身免疫功能紊亂所致凝血障礙和過度炎癥反應，故從二者著手探索相關生物學標志物用于PMR診斷、病情評估、預后和療效及分子機制分析具有重要意義[8-9]。

CRP和ESR是多年來臨床常用的PMR疾病活動度評估指標。抗MPO抗體由活化后的中性粒細胞胞漿嗜苯胺旅顆粒產生，可使中性粒細胞發生脫顆粒反應并釋放大量的毒性蛋白水解酶和氧自由基而發生免疫反應導致小血管炎的發生[10]。本研究發現PMR患者血清抗MPO抗體水平升高，提示PMR的發病可能與血管損傷存在一定的相關性。GPⅠb可作為信號受體穩固血小板的黏附和聚集作用，激活血小板參與凝血途徑，與肌動蛋白結合后連接在血小板膜骨架上對血小板的大小和形狀進行調控，還能介導血小板識別和結合其他分子參與調控血小板的凋亡和清除[11]。本研究發現PMR患者GPⅠb水平升高，說明PMR的發病可能是凝血與免疫系統共同作用的結果，其發生可能與血管炎癥反應有關，高炎癥反應可導致血管內皮細胞功能損傷，進一步促進炎癥因子釋放，加劇氧自由基對血管壁的損傷，造成血液高凝狀態，級聯反應作用使GPⅠb釋放和血小板聚集而導致患者栓塞的發生。

抗CarP抗體是2011年發現的對類風濕性關節炎診斷具有較高特異性、與氨基甲酰化導致蛋白質活性和功能發生改變相關的全新自身抗體，但少有關于抗CarP抗體在其他風濕免疫系統疾病中的變化的相關報道[12]。本研究發現PMR患者血清抗CarP抗體水平升高，表明氨基甲酰化在PMR的發生發展中發揮作用，這種變化可能與中性粒細胞介導的氨基甲酰化進程增強PMR患者的致病性免疫反應和骨破壞過程有關[13]。

既往研究發現PMR的發生與性別存在明顯相關性，女性發病者多于男性，且CRP、ESR等炎癥指標水平的變化也呈性別差異性，但PMR的發生及實驗室指標與年齡是否具有差異性的報道甚少[14]。臨床PMR治療主要使用非甾體抗炎藥（nonsteroidal?anti-inflammatory?drug，NSAID）和小劑量糖皮質激素，NSAID用于輕癥患者有一定療效，但效果不如小劑量糖皮質激素。本研究發現治療后兩組患者的血CRP、ESR、抗MPO抗體、GPⅠb和抗CarP抗體水平及病例異常率均較治療前明顯下降，且觀察組下降更顯著，表明潑尼松對老年PMR患者的治療效果優于非老年患者，且血CRP、ESR、抗MPO抗體、GPⅠb和抗CarP抗體可用于老年PMR患者的治療效果判斷，但在使用糖皮質激素治療過程中應警惕骨質疏松、高血壓和高血糖等不良反應的發生。

PMR-AS可用于PMR患者病情活動度評估，得分越高，病情越嚴重[15]。本研究發現老年PMR患者的血CRP、ESR、抗MPO抗體、GPⅠb和抗CarP抗體水平與PMR-AS均呈正相關，表明隨著PMR患者的病情進展，血抗MPO抗體、GPⅠb和抗CarP抗體水平升高越快。ROC曲線進一步提示抗CarP抗體和GPⅠb較CRP、ESR和抗MPO抗體能更加準確地反映老年PMR患者的疾病活動度。

綜上所述，血抗MPO抗體、GPⅠb和抗CarP抗體水平與老年PMR患者病情活動度呈正相關，潑尼松治療后上述各指標下降明顯，有望成為老年PMR患者疾病活動度和治療效果的監測指標。

[參考文獻][1] 朱盈姿，?董凌莉.?風濕性多肌痛診療進展[J].?內科急危重癥雜志，?2017，?23（2）：?154–159.

[12] 姚曉陽，?蔣秀娣，?馬晨蕓，?等.?抗氨甲酰化蛋白抗體檢測對類風濕關節炎診治的臨床價值[J].?中華檢驗醫學雜志，?2018，?41（1）：?77–80.