血清NGAL、mAlb、β2-MG及L-FABP聯合診斷2型糖尿病并發早期腎損傷的臨床價值

張克永

（曹縣人民醫院檢驗科，山東 菏澤 274400）

2 型糖尿病（Type 2 Diabetes,T2DM）是一種以慢性高血糖為主要臨床特征的內分泌代謝性疾病，隨病情進展相關并發癥會逐漸增多。其中腎損傷是T2DM 的常見并發癥，發病率在20% 以上，多因高血糖損傷腎小球血管而誘發[1]。由于T2DM 并發早期腎損傷發病較為隱匿，且初期無特異性癥狀，故易出現漏診。隨著病情進一步發展，腎臟可受到不可逆轉的損傷，嚴重者可發展成為尿毒癥或腎功能衰竭，對生命安全造成嚴重威脅。由此可見，加強T2DM 并發早期腎損傷的診斷十分重要。血清中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白（NGAL）、尿微量白蛋白（mAlb）、β2微球蛋白（β2-MG）及肝型脂肪酸結合蛋白（L-FABP）均是反映腎功能狀況的常用標志物。它們在機體內的含量、達峰時間不同，診斷早期腎功能損傷的靈敏度、特異度也有差異[2-4]。本研究旨在探討血清NGAL、mAlb、β2-MG 及L-FABP 聯合檢測對T2DM 并發早期腎損傷的診斷靈敏度、特異度，現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選 取2022 年1 月 至2023 年1 月 本 院 收 治 的T2DM 患者60 例，納入標準：（1）符合《中國2 型糖尿病防治指南（2020 年版）》[5]中的相關診斷標準；（2）臨床資料完整。排除標準：（1）其他類型糖尿病患者；（2）非T2DM 引起的早期腎損傷；（3）血糖、血壓波動大者；（4）入組前2 周內服用過免疫抑制劑等影響腎功能的藥物者；（5）合并其他代謝性疾病、嚴重心腦血管疾病者；（6）合并嚴重精神疾病者。根據臨床癥狀、24 h 尿微量白蛋白等實驗室檢查結果明確患者是否并發早期腎損傷，然后將其分為單純T2DM 組（n=42）和早期腎損傷組（n=18）。單純T2DM 組：男28 例，女14 例；年齡35 ～69 歲，平均（49.05±4.07）歲。早期腎損傷組：男12 例，女6 例；年齡33 ～71 歲，平均（50.20±4.18）歲。另選取50 名健康志愿者為對照組，其中男32 例，女18例；年齡30 ～63 歲，平均（49.83±3.93）歲。三組的一般資料相比，P＞0.05，具有可比性。本研究經醫院倫理委員會批準，所有研究對象均知情同意參與研究。

1.2 方法

1.2.1 血清NGAL、β2-MG 及L-FABP 檢測 采集所有受試者的空腹靜脈血5 mL，血樣采用湖南湘儀公司提供的CTK120C 型自動脫蓋離心機離心10 min（離心半徑10 cm，離心轉速3000 r/min），分離出血清；采用顆粒增強免疫比濁法檢測NGAL 水平，采用免疫透射比濁法檢測β2-MG 水平，采用酶聯免疫吸附法檢測L-FABP 水平，配套試劑盒由武漢賽培生物提供，操作均按照說明書進行。

1.2.2 尿mAlb 檢測 囑咐所有受試者檢測前1 d保持空腹12 h，于次日凌晨采集尿液標本，采用IMMAGE800 型 特 定 蛋 白 分 析 儀（美 國Beckman Coulter 公司提供）進行mAlb 檢測，檢測方法為免疫比濁法。

1.3 統計學方法

選用SPSS 26.0 統計學軟件分析數據，計數資料以百分率（%）表示，采用χ2檢驗；計量資料以（±s）表示，采用t檢驗或F 檢驗；血清NGAL、mAlb、β2-MG及L-FABP 聯合檢測對T2DM 并發早期腎損傷的診斷靈敏度、特異度采用受試者工作特征（ROC）曲線進行分析；P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血清NGAL、mAlb、β2-MG 及L-FABP水平的比較

早期腎損傷組患者的血清NGAL、mAlb、β2-MG 及L-FABP 水平均高于單純T2DM 組和對照組，組間比較差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 各組血清NGAL、mAlb、β2-MG 及L-FABP 水平的比較（± s）

表1 各組血清NGAL、mAlb、β2-MG 及L-FABP 水平的比較（± s）

注：# 與對照組比較，P ＜0.05 ；* 與單純T2DM 組比較，P ＜0.05。

組別 例數 NGAL（ng/mL）mAlb（mg/L）β2-MG（mg/L）L-FABP（ng/mL）對照組 50 47.86±8.88 8.35±3.00 1.60±0.35 16.75±3.30單純T2DM 組 42 66.25±13.31# 12.65±3.96# 3.05±1.45# 23.73±5.33#早期腎損傷組 18 74.36±15.30#* 15.45±4.50#* 4.32±1.65#* 30.22±6.49#*F 值 44.814 30.692 43.172 59.919 P 值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.2 血清NGAL、mAlb、β2-MG 及L-FABP 聯合檢測對T2DM 并發早期腎損傷的診斷效能

血 清NGAL、mAlb、β2-MG 及L-FABP 聯 合檢測診斷T2DM 并發早期腎損傷的AUC 為0.968（0.937 ～0.999），診 斷 靈 敏 度、特 異 度 分 別 為94.4%、90.1%，均高于血清NGAL、mAlb、β2-MG及L-FABP 單獨檢測，見表2、圖1。

圖1 血清NGAL、mAlb、β2-MG 及L-FABP 聯合檢測診斷T2DM 并發早期腎損傷的ROC 曲線

表2 血清NGAL、mAlb、β2-MG 及L-FABP 聯合檢測對T2DM 并發早期腎損傷的診斷效能

3 討論

腎損傷是T2DM 常見并發癥之一，以微血管病變為主。此病的發病是一個復雜的病理過程。臨床研究表明，長期糖代謝異常可導致腎小球處于高濾過、高灌流狀態，使腎小球毛細血管負荷加重，進而可引起腎小球損傷[6-7]。有研究認為，葡萄糖對組織的毒性作用在T2DM 并發早期腎損傷的病理生理過程中發揮著重要作用。葡萄糖在高濃度狀態下可激活蛋白酶C、糖化蛋白的終產物，導致系膜增生和損傷等病理變化[8]。然而T2DM 并發早期腎損傷初期無特異性癥狀，當出現明顯且持續的微量白蛋白尿時，腎臟已受到不可逆轉的損傷，最終可發展為終末期腎病。因此，積極探索預測T2DM 并發早期腎損傷的高靈敏度、高特異度指標，對延緩病情進展，改善患者預后具有積極意義。

NGAL 是一種主要由近端腎小管表達的脂質運載蛋白，在急性腎損傷患者血清、尿液中均表達上調，已被證實是腎臟結構損傷、全身炎癥及氧化應激的標志物，但其具體作用機制尚未完全闡明[9]。朱慶華等[10]的研究表明，糖尿病腎損傷患者血清中NGAL的水平會升高，且隨病程進展呈明顯上升趨勢，進一步經ROC 曲線分析顯示，將77.1 ng/mL 作為血清NGAL 臨界值診斷T2DM 患者早期腎損傷的靈敏度、特異度分別為63.8%、91.0%。Meta 分析顯示，尿液中NGAL 對兒童潛在的急性腎損傷具有一定的預測價值[11]。mAlb 屬于小分子蛋白質，在正常生理狀態下，由于腎小球濾過膜對蛋白質具有電荷屏障和體積屏障的作用，其在尿液中的含量往往微不可察；當血糖持續升高時，腎小球毛細血管壁濾過壓和通透性增加，改變了腎小球濾過膜，導致mAlb 濾過量增加，甚至可形成蛋白尿。曾瑜等[12]的研究表明，mAlb 檢測對妊娠糖尿病早期腎功能損傷的預測靈敏度、特異度分別為75.0%、75.5%。由此可見，持續性mAlb 升高是臨床預測糖尿病引起腎小球損傷的有效指標，需引起臨床醫生的高度關注。

血清β2-MG 是反映腎小球濾過功能的靈敏指標，主要由淋巴細胞、血小板產生，由于其分子量較小，故可從腎小球濾過膜自由濾過，并在近端腎小管完全吸收。研究表明，當腎小球濾過功能受損時，血β2-MG 水平會持續升高，此指標可用于診斷腎小管間質損傷[13]。L-FABP 主要表達于近端腎小管和肝臟，可參與機體脂肪酸代謝、細胞抗氧化等病理生理過程。在心臟手術后，患者腎小球濾過功能受損，L-FABP水平會顯著升高，提示血清L-FABP 對心臟手術后潛在的急性腎損傷有一定的預測價值[14]。最近的研究結果顯示，2 型糖尿病腎病患者的L-FABP 水平會呈進行性升高，且與腎功能損傷程度顯著相關[15]。由于上述指標在機體內的含量、達峰時間不同，且單一指標檢測容易受到血壓、檢查條件等因素的影響，導致結果的準確性有差異，故需進行聯合檢測，以提高臨床診斷效能。本研究結果顯示，早期腎損傷組患者的血清NGAL、mAlb、β2-MG 及L-FABP 水平均高于單純T2DM 組和對照組（P＜0.05），這與相關文獻報道[16]基本一致。說明血清NGAL、mAlb、β2-MG 及LFABP 水平與T2DM 并發早期腎損傷密切相關。ROC曲線分析顯示，血清NGAL、mAlb、β2-MG 及LFABP 聯合檢測診斷T2DM 并發早期腎損傷的AUC 為0.968（0.937 ～0.999），診斷靈敏度、特異度分別為94.4%、90.1%。說明對T2DM 患者來說，在臨床未出現大量蛋白尿之前，聯合檢測血清NGAL、mAlb、β2-MG 及L-FABP 水平可客觀、準確地反映其腎功能損傷情況。

綜上所述，T2DM 并發早期腎損傷患者的血清NGAL、mAlb、β2-MG 及L-FABP 水平均顯著升高，進行相關聯合檢測可提高T2DM 并發早期腎損傷的診斷效能，減少誤診。