卵巢腫瘤患者超聲造影參數與淋巴結轉移及血管生成的相關性分析

曹春寧，翟 虹，米娜娃爾·吾提庫，周 靜，紀甜甜

(新疆醫科大學附屬中醫醫院腹部超聲科,新疆 烏魯木齊 830000)

卵巢腫瘤多于20～50歲發病,早期無明顯癥狀,隨腫瘤增大伴有腹脹、下墜等輕微癥狀,部分患者因下腹明顯包塊就醫,此時腫瘤較大,多屬晚期。晚期卵巢腫瘤是威脅婦女生命最嚴重的惡性腫瘤之一,常伴腹水、食欲減退、消瘦等癥狀,5 a生存率為20%～30%[1-2]。有研究發現,淋巴結轉移與卵巢腫瘤疾病進展密切相關,且淋巴結轉移主要集中在主動脈區及盆骨,出現淋巴結轉移意味著患者病情較為嚴重[3]。因此,有效評估淋巴結轉移是診治卵巢腫瘤的關鍵。卵巢腫瘤的生長、轉移主要依賴腫瘤新生血管的生成,有效評估卵巢腫瘤組織中血管生成對延緩卵巢腫瘤進展、評估治療效果及預后具有重要價值[4]。微血管密度(microvascular density,MVD)計數是評估腫瘤組織新生血管生成的“金標準”,但MVD計數無法在術前對腫瘤組織血管生成進行評估,存在一定局限性[5]。影像學技術的發展使得早期卵巢腫瘤檢出率顯著提高,其中超聲造影較常規超聲檢查具有更高的分辨率、敏感性及特異性,可增強實質性器官的血流多普勒信號,繼而反映病變組織的血流灌注情況[6]。本研究通過分析卵巢腫瘤超聲參數與淋巴結轉移及血管生成的相關性,使醫生在術前無法獲得腫瘤組織標本的情況下較為準確地獲得腫瘤組織血流及微血管信息,以期為評估卵巢腫瘤性質、治療效果及預后提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2020年1月至2022年8月于新疆醫科大學附屬中醫醫院行手術切除治療的110例卵巢腫瘤患者為研究對象。病例納入標準:(1)經臨床病理學檢查確診為原發性卵巢腫瘤;(2)年齡≥18歲;(3)首次發病;(4)具有手術指征且手術成功;(5)患者意識清晰、溝通交流能力正常且愿意配合研究;(6)簽署關于本研究的知情同意書。排除標準:(1)入院前接受過新輔助化療、相關手術治療;(2)合并心肝腎等重要臟器器質性病變、生殖系統異常或代謝性疾病;(3)患有焦慮癥、抑郁癥或雙相情感障礙等精神疾病;(4)處于妊娠期或哺乳期。本研究已獲醫院醫學倫理委員會審核批準。

1.2 方法

1.2.1 超聲造影檢查

所有患者入組后接受超聲造影檢查。將精準E9三維彩色超聲診斷儀(美國GE公司)機械指數設定為0.11、探頭頻率設置為9 MHz,對入組患者進行常規超聲檢查,確定卵巢腫瘤位置、形態等信息后將超聲診斷儀切換為超聲造影模式,經肘靜脈團注2 mL SonoVue超聲造影劑(意大利Bracco公司)后,注入5 mL生理鹽水沖管,沖管后計時并觀察超聲造影劑灌注、回聲強度情況,記錄基礎強度、峰值強度、達峰時間并計算增強強度。增強強度為基礎強度與峰值強度之差。

1.2.2 免疫組織化學染色法檢測卵巢腫瘤組織中MVD

術后保留患者卵巢腫瘤病灶組織并制備成厚約4 μm的冰凍切片,65 ℃烤箱中烤片1 h,依次常規脫蠟、抗原高壓熱修復,滴加阻斷劑、一抗CD34(滴度1100)、辣根過氧化物酶標記的二抗(滴度12 000),室溫下孵育30 min,二氨基聯苯胺顯色,蘇木精復染、梯度乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片固定,然后將切片置于顯微鏡下觀察。CD34陽性表達判定標準:卵巢腫瘤組織切片中血管內皮細胞質內有棕黃色顆粒。參考Weidner校正方法[7]計數MVD:在低倍鏡(×100)下觀察切片,選擇3個CD34陽性表達最多的血管高密度區,然后在高倍鏡(×400)下計數3個血管高密度區中被染成棕黃色的微血管數量,取均值。

1.2.3 淋巴結轉移情況

患者出院后隨訪1 a,記錄患者是否出現淺表淋巴結腫大、下肢水腫、大量腹水或腹股溝局部明顯腫塊等淋巴結轉移癥狀,并經臨床穿刺病理學確診。根據是否發生淋巴結轉移將110例卵巢腫瘤患者分為轉移組(n=59)和未轉移組(n=51)。

1.3 統計學處理

2 結果

2.1 轉移組與未轉移組患者超聲造影參數比較

110例卵巢腫瘤患者中,發生淋巴結轉移59例,未發生淋巴結轉移51例。轉移組患者超聲造影參數達峰時間顯著長于未轉移組,差異有統計學意義(P<0.05)。轉移組與未轉移組患者的增強強度比較差異無統計學意義(P>0.05)。結果見表1。

表1 轉移組與未轉移組患者超聲造影參數比較Tab.1 Comparison of contrast-enhanced ultrasound parameters of patients between the metastatic group and the non-metastatic group

2.2 卵巢腫瘤患者超聲造影參數與淋巴結轉移的相關性

Spearman相關性分析結果顯示,卵巢腫瘤患者超聲造影參數中達峰時間與淋巴結轉移呈正相關(r=0.580,P<0.05),增強強度與淋巴結轉移無相關性(r=0.002,P>0.05)。

2.3 卵巢腫瘤患者超聲造影參數與MVD的相關性

110例卵巢腫瘤患者超聲造影參數中的達峰時間、增強強度和MVD分別為(27.29±7.46)s、(80.09±8.26)dB、25.70±5.14。Pearson相關性分析結果顯示,卵巢腫瘤患者超聲造影參數中達峰時間、增強強度與MVD均呈正相關(r=0.491、0.456,P<0.05);見圖1。

圖1 卵巢腫瘤患者超聲造影參數與MVD的相關性Fig.1 Correlation between contrast-enhanced ultrasound parameters and MVD in patients with ovarian tumor

3 討論

早期卵巢腫瘤5 a生存率達90%以上,但早期卵巢腫瘤僅表現出消化不良、月經紊亂等輕微癥狀,因缺乏顯著臨床癥狀而不易被發現,且常規臨床篩查效果有限,約70%的卵巢腫瘤患者確診時疾病已進展至晚期,治療效果、預后情況均不理想[8-9]。卵巢腫瘤早期即可發生淋巴結轉移,有研究發現,淋巴結轉移是導致卵巢腫瘤患者死亡的獨立危險因素,有效評估淋巴結轉移對卵巢腫瘤臨床分期、構建治療方案、預后評估具有重要參考價值[10]。卵巢腫瘤細胞生長、浸潤均離不開新生血管的生成,腫瘤新生血管血流豐富,在為腫瘤細胞生長提供所需養分的同時可與腫瘤細胞直接接觸而促進腫瘤細胞轉移,因此,明確卵巢腫瘤組織內血管生成情況有助于評估臨床治療效果。

超聲造影是近年來興起的影像學檢查方式,可顯示病灶內血流灌注情況,通過動態記錄血流變化還可評估新生血管的特征。本研究結果顯示,轉移組患者超聲造影參數中的達峰時間顯著長于未轉移組,達峰時間主要反映血流阻力,達峰時間越長意味著血流阻力越大,轉移組達峰時間較長說明淋巴結轉移時病灶組織發生液化和纖維化。正常情況下淋巴結血供較為缺乏,卵巢腫瘤發生淋巴結轉移后血供充足,但常規超聲檢查只能依據病灶回聲進行診斷,且易受腸道氣體的影響,加之腹壁脂肪較少,檢查結果存在較大偏差;而超聲造影可通過定量參數分析卵巢腫瘤血流動態變化,在臨床中具有較高的應用價值[11-12]。此外,本研究中Spearman相關性分析結果顯示,達峰時間與卵巢腫瘤患者淋巴結轉移呈正相關,提示超聲造影檢查時達峰時間越長,卵巢腫瘤患者發生淋巴結轉移的概率越大,達峰時間對臨床醫師制定卵巢腫瘤患者治療方案具有重要指導意義。MITAMURA等[13]對接受放化療后的卵巢腫瘤淋巴結轉移患者進行超聲造影檢查,結果發現,有效組患者的達峰時間較無效組短。結合本研究結果推測,達峰時間越長,卵巢腫瘤患者病情緩解程度越弱,甚至可能有加重的趨勢,這可能與淋巴結轉移的發生有關,后續臨床研究可進一步探索超聲造影參數與卵巢腫瘤患者治療效果的相關性。

本研究中Pearson相關性分析結果顯示,超聲造影參數中的達峰時間、增強強度與MVD均呈正相關,即卵巢腫瘤患者達峰時間越長、增強強度越強,腫瘤血管生成概率越高,進展為惡性腫瘤的概率越大。新生血管網絡是供應腫瘤細胞不斷增殖、代謝所需營養的重要途徑,其可促進腫瘤細胞增殖后不斷向宿主輸出腫瘤細胞以滿足腫瘤細胞自身的轉移,繼而加速卵巢腫瘤進展,MVD是目前評估腫瘤新生血管生成的“金標準”,但臨床工作中多采用免疫組織化學法檢測手術切除的腫瘤組織標本中MVD,因此,尋找一種快捷、在活體上可重復檢測的用以評估腫瘤血管生成的方法尤為關鍵[14-15]。近年來超聲影像技術飛速發展,超聲造影在造影前團注的造影劑自由通過微循環后可較好地顯示腫瘤內微循環分布情況,通過造影劑在腫瘤組織內的流量、流速隨時間的變化定量分析腫瘤組織新生血管的生成情況。本研究中Pearson相關性分析結果顯示,達峰時間、增強強度與卵巢腫瘤組織中MVD均呈正相關,即卵巢腫瘤患者超聲造影檢查中達峰時間越長、增強強度越強,腫瘤血管生成概率越高,惡性腫瘤概率越大,超聲造影中達峰時間、增強強度可為術前評估卵巢腫瘤組織血管是否生成提供參考依據。從機制上分析,病灶組織新生血管越多,腫瘤血管床的微泡灌注量越大,腫瘤細胞過度侵襲的可能性越大,病灶組織纖維化和液化越嚴重,達峰時間更長,基礎強度與峰值強度差值越大[16-17]。

4 結論

卵巢腫瘤超聲造影參數中達峰時間與淋巴結轉移呈正相關,達峰時間、增強強度與MVD呈正相關。本研究可為卵巢腫瘤的診治提供參考依據,但因選取樣本量有限,相關結論仍需大樣本多中心臨床試驗進一步佐證。