血小板抗體篩查在多次輸血白血病患者中的應(yīng)用價(jià)值研究

魏祥坤　鄭寶梅

【摘要】? 目的? ? 分析多次輸血白血病患者應(yīng)用血小板抗體篩查的價(jià)值。方法? ? 選取2020年8月—2021年8月在泉州市第一醫(yī)院多次輸血的58例白血病患者作為觀察組，同期的58例健康體檢者作為對(duì)照組。根據(jù)觀察組輸血次數(shù)再分亞組，將輸血次數(shù)<3次的患者編為A組（n=24），將輸血3～6次的患者編為B組（n=19），將輸血次數(shù)≥7次的患者編為C組（n=15）；根據(jù)觀察組不同輸注方式將其分為交叉配型組（n=29）與隨機(jī)輸注組（n=29）。比較對(duì)照組與觀察組血小板抗體陽(yáng)性情況；比較觀察組中A、B、C組血小板抗體陽(yáng)性情況；比較觀察組不同血小板抗體類(lèi)型的血小板輸注效果；比較觀察組不同輸注方式輸注1 h、24 h后血小板計(jì)數(shù)增高指數(shù)。結(jié)果? ? 對(duì)照組陽(yáng)性率為0.00％，觀察組陽(yáng)性率為31.03％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；A組陽(yáng)性率為16.67％，B組陽(yáng)性率為21.05，C組陽(yáng)性率為66.67％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；觀察組血小板抗體陰性血小板輸注總有效率為85.00％，血小板抗體陽(yáng)性血小板輸注總有效率為22.22％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；交叉配型組注輸1 h、24 h后血小板計(jì)數(shù)增高指數(shù)均較隨機(jī)輸注組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論? ? 對(duì)多次輸血的白血病患者應(yīng)用血小板抗體篩查發(fā)現(xiàn)血小板輸注無(wú)效與血小板抗體陽(yáng)性具有相關(guān)性，血小板抗體陽(yáng)性率與患者輸血次數(shù)呈正相關(guān)，于輸注前進(jìn)行交叉配型試驗(yàn)?zāi)軌蛱嵘斪⑿Ч?/p>

【關(guān)鍵詞】? 白血病；多次輸血；血小板特異性抗原抗體；人類(lèi)白細(xì)胞抗原-Ⅰ類(lèi)抗原抗體

中圖分類(lèi)號(hào)：R446.62? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1672-1721（2023）10-0075-03

DOI：10.19435/j.1672-1721.2023.10.024

白血病具有較高的發(fā)病率和病死率，是臨床常見(jiàn)的惡性血液疾病。白血病因化療或疾病發(fā)展等原因易產(chǎn)生骨髓抑制，導(dǎo)致血小板數(shù)量下降，臨床為避免患者體內(nèi)血小板過(guò)少引起相關(guān)并發(fā)癥，多采取血小板輸注使外周血血小板含量增多[1]。實(shí)踐表明，反復(fù)向機(jī)體輸注血小板可對(duì)免疫系統(tǒng)形成刺激，促使特異性抗體或相關(guān)抗體產(chǎn)生，導(dǎo)致輸血治療無(wú)法達(dá)到預(yù)期效果。血小板抗體篩查可對(duì)血液中的血小板相關(guān)抗體進(jìn)行檢測(cè)，能夠?yàn)榕R床診療提供可靠的參考依據(jù)[2]。本文進(jìn)一步探究了其在反復(fù)輸血白血病患者中的應(yīng)用價(jià)值，報(bào)告如下。

1? ? 資料與方法

1.1? ? 一般資料? ? 選取2020年8月—2021年8月在泉州市第一醫(yī)院多次輸血的58例白血病患者及同期58例健康體檢者作為研究對(duì)象，將健康體檢者編入對(duì)照組，將白血病患者編入觀察組。根據(jù)觀察組輸血次數(shù)再分亞組，將輸血次數(shù)<3次的患者編為A組（n=24），將輸血3～6次的患者編為B組（n=19），將輸血次數(shù)≥7次的患者編為C組（n=15）。對(duì)照組男32例，女26例；年齡34～64歲，平均年齡（50.23±8.74）歲。觀察組男30例，女28例；年齡33～65歲，平均年齡（51.17±8.58）歲。2組一般資料差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

1.1.1? ? 納入標(biāo)準(zhǔn)? ? 自愿參與本次研究；白血病患者經(jīng)血常規(guī)檢查和骨髓檢查確診；白血病患者輸血次數(shù)>1次，有血小板、紅細(xì)胞懸液等血液制品輸注史。

1.1.2? ? 排除標(biāo)準(zhǔn)? ? 對(duì)照組有妊娠史、輸血史；彌散性血管內(nèi)凝；活動(dòng)性出血；合并嚴(yán)重的重要臟器疾病；伴有脾腫大、發(fā)熱；合并溝通或認(rèn)知障礙；正在接受免疫抑制治療或3個(gè)月內(nèi)接受過(guò)免疫抑制及造血干細(xì)胞移植、器官移植治療；伴自身免疫性疾病。

1.2? ? 方法? ? 本研究采用的血小板抗體篩檢細(xì)胞、血小板抗體檢測(cè)指示紅細(xì)胞、血小板抗體篩查試劑盒均由長(zhǎng)春博德生物有限公司提供。離心機(jī)型號(hào)為T(mén)D-B型，由長(zhǎng)春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司生產(chǎn)。患者的血液配型采用泉州市中心血站提供的ABO同型供血者血小板。血小板抗體篩查試劑盒包括血小板特異性抗原及人類(lèi)白細(xì)胞抗原-Ⅰ類(lèi)。血小板抗體檢測(cè)方法：抽取2組3～5 mL的清晨空腹靜脈血作為血樣，將血樣置于離心機(jī)進(jìn)行速度為3 000 r/min的離心，持續(xù)10 min，分離血清、血漿。在單采血小板的有效期內(nèi)進(jìn)行血小板抗體篩查，取3份單采血小板加入生理鹽水稀釋制備成混懸液，設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照孔和陰性對(duì)照孔及患者樣本孔，各加入血小板混懸液50μL混勻，進(jìn)行3 000 r/min的離心，持續(xù)5 min；將液體去除，洗滌3次，利用吸水紙吸干殘液；將低離子強(qiáng)度溶液置入陽(yáng)性對(duì)照孔和陰性對(duì)照孔及患者樣本孔，各孔溶液量為100μL，再各加50μL陽(yáng)性對(duì)照血清和陰性對(duì)照血清、患者血清，充分混勻，置于溫度為37 ℃的空氣中，30 min后進(jìn)行洗滌，持續(xù)5次，吸干殘液，加入50μL的指示紅細(xì)胞和50μL的抗人免疫球蛋白G，離心5 min后對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

根據(jù)觀察組不同輸注方式將其分為交叉配型組（n=29）與隨機(jī)輸注組（n=29），交叉配型組血小板輸注治療前進(jìn)行ABO血型交叉配血。血小板輸注治療前1 h，抽取3 mL靜脈血，注入含有乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）的真空抗凝管，血小板采用LHX-750型血細(xì)胞分析儀測(cè)定；選用泉州市中心血站提供的血小板，血小板含量≥2.5×10¹¹/L，每袋容量為200～250 mL；輸注速度以患者的最高耐受度為宜，在輸注過(guò)程中觀察脾腫脹、感染、發(fā)熱等癥狀發(fā)生情況，若存在異常給予相應(yīng)處理措施。血小板輸注治療后24 h，抽取3 mL靜脈血，注入含有EDTA-K2的真空抗凝管，重復(fù)檢測(cè)血小板的操作，以獲取輸注后24 h血小板數(shù)據(jù)。

1.3? ? 觀察指標(biāo)? ? （1）統(tǒng)計(jì)2組血小板抗體陽(yáng)性例數(shù)。（2）分別統(tǒng)計(jì)觀察組中A、B、C組血小板抗體陽(yáng)性例數(shù)。（3）評(píng)估血小板抗體陰性和陽(yáng)性的血小板輸注效果。（4）比較輸注1 h、24 h后隨機(jī)輸注組與交叉配型組血小板計(jì)數(shù)增高指數(shù)。血小板抗體檢測(cè)結(jié)果判斷：血漿中有血小板抗體，指示紅細(xì)胞平鋪于微孔板底部，則為陽(yáng)性；血漿中不含血小板抗體，指示紅細(xì)胞于微孔板底部聚集，則為陰性。對(duì)觀察組輸注血小板后1 h和24 h的外周血血小板計(jì)數(shù)進(jìn)行檢測(cè)，血小板輸注效果依據(jù)血小板計(jì)數(shù)增高指數(shù)來(lái)評(píng)價(jià)，若輸注1 h后血小板計(jì)數(shù)增高指數(shù)<7.5×10⁹/L，24 h后血小板計(jì)數(shù)增高指數(shù)<4.5×10⁹/L，則記為血小板輸注無(wú)效[3]。血小板計(jì)數(shù)增高指數(shù)=體表面積（m2）×輸注后血小板增加數(shù)（/μL）/輸入血小板總數(shù)（×10¹¹）。體表面積=身高（cm）×0.006 1+0.012 8×體重（kg）-0.015 3。

1.4? ? 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法? ? 使用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以x±s表示，行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以百分比表示，行χ²檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2? ? 結(jié)果

2.1? ? 2組血小板抗體陽(yáng)性情況比較? ? 觀察組血小板抗體陽(yáng)性率較對(duì)照組高（P<0.05），見(jiàn)表1。

2.2? ? 觀察組中A、B、C組血小板抗體陽(yáng)性情況比較? ? C組血小板抗體陽(yáng)性率均較A組、B組高（P<0.05），見(jiàn)表2。

2.3? ? 觀察組不同血小板抗體類(lèi)型血小板輸注效果比較? ? 觀察組血小板抗體陽(yáng)性輸注總有效率較血小板抗體陰性低（P<0.05），見(jiàn)表3。

2.4? ? 觀察組不同輸注方式輸注1 h、24 h血小板計(jì)數(shù)增高指數(shù)比較? ? 交叉配型組輸注1 h、24 h后血小板計(jì)數(shù)增高指數(shù)較隨機(jī)輸注組高（P<0.05），見(jiàn)表4。

3? ? 討論

白血病屬于血液再生障礙性疾病，以乏力、貧血、發(fā)熱為主要臨床表現(xiàn)，由于機(jī)體細(xì)胞存在生長(zhǎng)障礙，使白細(xì)胞無(wú)法正常發(fā)育，大量累積于其他造血組織及骨髓中，對(duì)正常的造血機(jī)制形成影響，導(dǎo)致機(jī)體血小板數(shù)量下降。臨床通常給予血小板、紅細(xì)胞懸液等血液制品輸注治療，可及時(shí)緩解血小板不足[4]。研究表明，部分患者反復(fù)接受該方法治療會(huì)發(fā)生血小板數(shù)量銳減，甚至?xí)斐蓮浬⑿匝軆?nèi)凝血、顱內(nèi)出血等疾病，對(duì)預(yù)后形成不良影響[5]。血小板特異性抗原作為血小板膜結(jié)構(gòu)的一部分，其主要分布于血小板膜糖蛋白上，反復(fù)輸血引起機(jī)體產(chǎn)生的血小板抗體可誘發(fā)血小板抗原抗體免疫反應(yīng)。固相凝集法可及時(shí)檢測(cè)血小板抗原抗體及血小板相關(guān)抗原抗體，向臨床提示患者出現(xiàn)血小板輸注無(wú)效情況，有助于采取相應(yīng)措施，減輕反復(fù)輸血對(duì)患者的影響[6]。

本研究中，觀察組血小板抗體陽(yáng)性率為31.03％，較對(duì)照組的0.00％高（P<0.05）；C組血小板抗體陽(yáng)性率為66.67％，較A組的16.67％、B組的26.32％高（P<0.05）。表明血小板抗體陽(yáng)性率與輸血次數(shù)呈正相關(guān)。人類(lèi)白細(xì)胞抗原-Ⅰ類(lèi)不屬于血小板特異性抗原，其具有豐富的表達(dá)，在白細(xì)胞表面可使供受雙方產(chǎn)生抗原差異，通過(guò)刺激血小板和白細(xì)胞，促使人類(lèi)白細(xì)胞抗原-Ⅰ類(lèi)抗體產(chǎn)生[7]。血小板特異性抗原屬于血小板特異性抗原，其在白細(xì)胞表面不表達(dá)，不會(huì)刺激血小板和白細(xì)胞產(chǎn)生血小板特異性抗體[8]。白血病患者接受多次血小板、紅細(xì)胞懸液等血液制品輸注治療，此類(lèi)物質(zhì)中含有白細(xì)胞，在紅細(xì)胞懸液中的白細(xì)胞與供者血小板中的白細(xì)胞、供者血小板間發(fā)生免疫作用，使機(jī)體產(chǎn)生人類(lèi)白細(xì)胞抗原-Ⅰ類(lèi)抗體和血小板特異性抗體[9]。血小板特異性抗體和人類(lèi)白細(xì)胞抗原-Ⅰ類(lèi)抗體對(duì)機(jī)體反復(fù)刺激，促使免疫系統(tǒng)產(chǎn)生血小板抗體，導(dǎo)致血小板抗體陽(yáng)性率升高。由于健康體檢者不會(huì)接受血液制品輸注，故其血小板抗體均為陰性。劉柱深等[10]研究顯示，反復(fù)輸血白血病患者的血小板抗體陽(yáng)性率為34.67％，較健康者的0.00％高（P<0.05）；輸血次數(shù)≥7次白血病患者血小板抗體陽(yáng)性率為64.71％，均較輸血次數(shù)<3次的白血病患者的16％、輸血次數(shù)3～6次的白血病患者的22.22％高（P<0.05），與本研究相似。表明輸血次數(shù)多者發(fā)生血小板抗體陽(yáng)性的概率高。為提高白血病患者血小板輸注治療的安全性，應(yīng)對(duì)輸血次數(shù)較多的患者行血小板抗體篩查。

本研究中，觀察組血小板抗體陽(yáng)性輸注總有效率較血小板抗體陰性低（P<0.05），表明血小板輸注無(wú)效與血小板抗體陽(yáng)性具有相關(guān)性。移植同種異體細(xì)胞的過(guò)程與血小板的輸注過(guò)程相似，血小板經(jīng)重復(fù)輸注后，血小板特異性抗體和人類(lèi)白細(xì)胞抗原-Ⅰ類(lèi)抗體易對(duì)機(jī)體產(chǎn)生刺激，導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)血小板抗體或產(chǎn)生免疫反應(yīng)，對(duì)血小板的正常生理功能造成影響，加速血小板衰亡，導(dǎo)致輸血無(wú)效。同時(shí)人類(lèi)白細(xì)胞抗原-Ⅰ類(lèi)抗體可在輸血過(guò)程中產(chǎn)生，經(jīng)反復(fù)輸血后，輸注的血小板中的人類(lèi)白細(xì)胞抗原-Ⅰ類(lèi)與機(jī)體內(nèi)的人類(lèi)白細(xì)胞抗原-Ⅰ類(lèi)抗體結(jié)合，作用于網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞，對(duì)血小板形成清除和破壞，也可導(dǎo)致輸血無(wú)效。張振周[11]研究顯示，在白血病患者中，血小板抗體陽(yáng)性者血小板輸注總有效率為15.8％，較血小板抗體陰性者的87.3％低（P<0.05），與本研究相似。表明血小板輸注無(wú)效與血小板抗體陽(yáng)性具有相關(guān)性。提示對(duì)多次輸血者行血小板輸注治療時(shí)可通過(guò)血小板抗體篩查，以便及時(shí)調(diào)整治療方案。

本研究中，交叉配型組注輸1 h、24 h后血小板計(jì)數(shù)增高指數(shù)均較隨機(jī)輸注組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。表明于輸注前進(jìn)行交叉配型試驗(yàn)?zāi)軌蛱嵘斪⑿Чｊ惓畹萚12]研究顯示：交叉配型組輸注1 h、24 h后血小板計(jì)數(shù)增高指數(shù)均高于隨機(jī)輸注組（P<0.05），與本研究相似。為保障治療效果，降低輸注后血小板抗體陽(yáng)性發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，建議多次輸血的白血病患者在接受輸血治療前應(yīng)堅(jiān)持進(jìn)行血液交叉配型試驗(yàn)，依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果選擇血小板。

綜上所述，多次輸血的白血病患者應(yīng)用血小板抗體篩查發(fā)現(xiàn)血小板輸注無(wú)效與血小板抗體陽(yáng)性具有相關(guān)性，血小板抗體陽(yáng)性率與患者輸血次數(shù)呈正相關(guān)，于輸注前進(jìn)行交叉配型試驗(yàn)?zāi)軌蛱嵘斪⑿Ч?/p>

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（收稿日期：2023-01-26）