四川遂寧地區(qū)呼吸道主要分離菌分布和耐藥性監(jiān)測(cè)

黎 昆,楊 雪,李 龍,王明霞,劉紅萍,支 嵐,高 燦,王 潔

遂寧市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科,四川遂寧 629000

社區(qū)獲得性呼吸道感染(CARTI)是導(dǎo)致重大疾病和死亡的最常見(jiàn)感染之一,引起CARTI最常見(jiàn)的病原體是流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和卡他莫拉菌,有研究表明,全國(guó)范圍內(nèi)肺炎鏈球菌的青霉素耐藥性、流感嗜血桿菌和卡他莫拉菌的產(chǎn)β內(nèi)酰胺酶比例呈逐年上升趨勢(shì),影響臨床初始抗菌藥物的經(jīng)驗(yàn)治療[1-3]。本研究回顧性分析了2018-2020年本院呼吸道分離常見(jiàn)的3種病原菌,即流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和卡他莫拉菌體外藥敏試驗(yàn)結(jié)果,以期為臨床經(jīng)驗(yàn)用藥提供參考依據(jù),現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2018年1月1日至2020年12月31日本院臨床送檢呼吸道標(biāo)本分離獲得的流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌、卡他莫拉菌(剔除重復(fù)菌株)773株。其中肺炎鏈球菌355株,流感嗜血桿菌357株,卡他莫拉菌61株。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2儀器與試劑 流感嗜血桿菌、卡他莫拉菌的藥敏培養(yǎng)基均使用HTM瓊脂,肺炎鏈球菌的藥敏培養(yǎng)基使用含有5%脫纖維羊血的MH瓊脂[4],上述培養(yǎng)基均購(gòu)自廣州迪景微生物科技有限公司。K-B法藥敏試驗(yàn)紙片和青霉素E試驗(yàn)(E-test)條均購(gòu)自溫州市康泰生物科技有限公司。嗜血桿菌和布蘭漢球菌藥敏試劑盒(比色法ATB HAEMO)購(gòu)自法國(guó)生物梅里埃公司。

1.3方法 參照2020年美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)[4]推薦的藥敏試驗(yàn)方法進(jìn)行檢測(cè),卡他莫拉菌藥敏折點(diǎn)判讀參考CLSI-M45,質(zhì)控菌株為肺炎鏈球菌ATCC49619和流感嗜血桿菌ATCC49247。采用頭孢硝噻吩紙片(購(gòu)自重慶龐通醫(yī)療器械有限公司)檢測(cè)流感嗜血桿菌和卡他莫拉菌的β內(nèi)酰胺酶。采用E-test條測(cè)定不敏感肺炎鏈球菌最低抑菌濃度[4]。年齡組分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)[5]:未成年人為<18歲,成年人為≥18歲。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用WHONET5.6軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或百分率表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和卡他莫拉菌來(lái)源分布情況 流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌、卡他莫拉菌門(mén)診分離株分別占同種總分離菌株的84.9%、67.6%、85.2%;住院分離株分別占同種總分離菌株的15.1%、32.4%、14.8%。見(jiàn)表1。

2.2流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和卡他莫拉菌人口學(xué)分布情況 女性流感嗜血桿菌和卡他莫拉菌檢出率分別為58.5%、57.4%,男性流感嗜血桿菌和卡他莫拉菌檢出率分別為41.5%、42.6%,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);女性肺炎鏈球菌檢出率(64.8%)高于男性的35.2%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。未成年人流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌檢出率均高于成年人,卡他莫拉菌檢出率低于成年人,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表2 流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和卡他莫拉菌的人口學(xué)分布情況[n(%)]

2.3流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和卡他莫拉菌季節(jié)分布情況 流感嗜血桿菌和卡他莫拉菌春季分布比例分別為25.5%和31.1%、冬季為63.6%和37.7%,均高于夏季的5.6%和4.9%、秋季的5.3%和26.2%,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。肺炎鏈球菌秋季分布比例為27.0%、冬季分布比例為37.7%,均高于春季的23.1%和夏季的12.1%,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和卡他莫拉菌季節(jié)分布情況[n(%)]

2.4未成年人和成年人對(duì)3種細(xì)菌的耐藥率及敏感率比較 355株肺炎鏈球菌中未成年人分離出208株,成年人分離出147株;青霉素耐藥肺炎鏈球菌(PRSP)檢測(cè)出16株,青霉素中介肺炎鏈球菌(PISP)檢測(cè)出13株,青霉素敏感肺炎鏈球菌(PSSP)檢測(cè)出326株。肺炎鏈球菌對(duì)紅霉素、克林霉素、甲氧芐啶-磺胺甲噁唑均具有較高的耐藥性,未分離出對(duì)萬(wàn)古霉素和利奈唑胺具有耐藥性的肺炎鏈球菌。見(jiàn)表4。357株流感嗜血桿菌中未成年人分離出319株,成年人分離出38株。流感嗜血桿菌對(duì)氯霉素、四環(huán)素耐藥率均低于10%,未分離出對(duì)頭孢噻肟、美羅培南、左氧氟沙星具有耐藥性的流感嗜血桿菌。見(jiàn)表5。61株卡他莫拉菌中未成年人分離出23株,成年人分離出38株,且卡他莫拉菌對(duì)所測(cè)抗菌藥物均保持較高敏感性。見(jiàn)表6。

表4 分離自未成年人和成年人肺炎鏈球菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率及敏感率比較(%)

表5 分離自未成年人和成年人流感嗜血桿菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率及敏感率比較(%)

表6 分離自未成年人和成年人卡他莫拉菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率及敏感率比較(%)

2.5流感嗜血桿菌和卡他莫拉菌的β內(nèi)酰胺酶檢出情況 357株流感嗜血桿菌中未成年人、成年人分別檢測(cè)出β內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性株171、18株,陽(yáng)性率分別為53.6%(171/319)、47.4%(18/38)。61株卡他莫拉菌中未成年人、成年人分別檢測(cè)出β內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性株17株、30株,陽(yáng)性率分別為73.9%(17/23)、78.9%(30/38)。

3 討 論

本研究結(jié)果顯示,2018年1月1日至2020年12月31日本院分離的流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和卡他莫拉菌大部分來(lái)自門(mén)診患者,提示本院呼吸道感染患者以社區(qū)感染為主。

流感嗜血桿菌是一種革蘭陰性細(xì)菌,可導(dǎo)致各種氣道黏膜感染和侵襲性疾病,如細(xì)菌性腦膜炎[6]。有研究表明,流感嗜血桿菌可通過(guò)黏附侵入呼吸道上皮細(xì)胞,從而長(zhǎng)期定植于呼吸道內(nèi)[7]。本研究結(jié)果顯示,未成年人流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌檢出率高于成年人,卡他莫拉菌檢出率低于成年人,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與劉策等[8]、呂志勇等[9]研究結(jié)果一致。幼兒鼻腔內(nèi)無(wú)鼻毛,鼻黏膜弱而富于血管,易受感染,且氣管和支氣管的管腔狹窄,黏液分泌少,纖毛運(yùn)動(dòng)差,肺彈力組織發(fā)育差,易引起致病菌的蔓延[10]。老年人免疫系統(tǒng)功能下降,且患有基礎(chǔ)性疾病,因此這兩類(lèi)易感人群需要重點(diǎn)關(guān)注。本研究中,流感嗜血桿菌季節(jié)分布比例分別為春季25.5%、冬季63.6%,均高于夏季的5.6%、秋季的5.3%,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與蔣小麗等[11]報(bào)道的四川簡(jiǎn)陽(yáng)地區(qū)流感嗜血桿菌分布以春季、冬季檢出為主相符。β內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素目前常用于流感嗜血桿菌的臨床治療,在多個(gè)國(guó)家,這些經(jīng)驗(yàn)性藥物已被發(fā)現(xiàn)具有耐藥性[12]。本研究結(jié)果顯示,未成年人流感嗜血桿菌對(duì)氨芐西林的耐藥率為53.6%,與中國(guó)細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)網(wǎng)(CHINET)報(bào)告的59.7%相似,而成年人的50.0%低于CHINET報(bào)告的70.2%[13]。流感嗜血桿菌氨芐西林耐藥率在一些地區(qū)為5%～67.9%[14]。其對(duì)氨芐西林的耐藥性主要通過(guò)兩種機(jī)制產(chǎn)生。一種涉及在流感嗜血桿菌中產(chǎn)生β內(nèi)酰胺酶水解β內(nèi)酰胺抗生素獲得β內(nèi)酰胺酶基因的菌株,另一種機(jī)制涉及β內(nèi)酰胺酶陰性的氨芐西林耐藥菌株,是ftsI基因突變引起青霉素結(jié)合蛋白3(PBP3)改變,導(dǎo)致β內(nèi)酰胺酶抗生素對(duì)PBP3的親和力降低,獲得β內(nèi)酰胺酶基因的菌株[15]。本研究中,流感嗜血桿菌對(duì)氨芐西林的耐藥率與其β內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性率相近,提示本地區(qū)流感嗜血桿菌對(duì)氨芐西林的耐藥作用機(jī)制為β內(nèi)酰胺酶水解抗菌藥物作用。同時(shí)成年人和未成年人流感嗜血桿菌對(duì)甲氧芐啶-磺胺甲噁唑的耐藥率分別為57.5%和74.2%,與其他研究結(jié)果的64.9%相似[16],提示磺胺類(lèi)藥物不適合作為治療感染流感嗜血桿菌的經(jīng)驗(yàn)用藥。成年人株對(duì)頭孢呋辛耐藥率為36.8%,而未成年人株耐藥率為36.1%,因此在選擇第2代頭孢菌素時(shí)要根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果,有針對(duì)性地進(jìn)行治療。未檢出對(duì)頭孢噻肟、美羅培南、左氧氟沙星的耐藥菌株,提示本地區(qū)經(jīng)驗(yàn)用藥仍可選用第3代頭孢菌素。

本研究結(jié)果顯示,355株肺炎鏈球菌中未成年人檢出208株,高于成年人的147株,這與既往流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)一致[17]。β內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素是治療肺炎鏈球菌疾病的一線選擇,但來(lái)自不同地區(qū)和國(guó)家的肺炎鏈球菌的β內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的耐藥率存在較大差異[18]。本研究結(jié)果顯示,PRSP占4.5%,肺炎鏈球菌對(duì)紅霉素、克林霉素、甲氧芐啶-磺胺甲噁唑均具有較高的耐藥性,未分離出對(duì)萬(wàn)古霉素和利奈唑胺具有耐藥性的肺炎鏈球菌。提示本地區(qū)治療肺炎鏈球菌引起的感染時(shí)可以首選青霉素,不宜選用紅霉素與甲氧芐啶-磺胺甲噁唑。同時(shí)女性檢出率(64.8%)高于成年男性的35.2%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。提示本地區(qū)女性較男性易感肺炎鏈球菌。但對(duì)男、女性肺炎鏈球菌疾病發(fā)病率差異尚有待于進(jìn)一步研究。

本研究中,61株卡他莫拉菌對(duì)阿莫西林/克拉維酸敏感率為100%,提示本地區(qū)臨床治療卡他莫拉菌感染可首選阿莫西林/克拉維酸。61株卡他莫拉菌中未成年人、成年人分別檢測(cè)出β內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性株17、30株,陽(yáng)性率分別為73.9%、78.9%。低于龔萍等[19]報(bào)道的86.8%。提示卡他莫拉菌產(chǎn)β內(nèi)酰胺酶存在地區(qū)差異。

綜上所述,目前尚不能將氨芐西林作為本地區(qū)流感嗜血桿菌感染的首選藥物,青霉素仍對(duì)肺炎鏈球菌非腦脊液分離株保持較高的敏感性,治療卡他莫拉菌可將阿莫西林/克拉維酸作為首選藥物。在經(jīng)驗(yàn)性抗感染治療時(shí)需要考慮本地區(qū)病原菌的特殊性,要繼續(xù)做好細(xì)菌耐藥性的監(jiān)測(cè)工作,有助于科學(xué)管理和合理應(yīng)用臨床抗菌藥物,減少耐藥菌的產(chǎn)生。