不同濃度茉莉酸甲酯對(duì)妮娜皇后果實(shí)著色與品質(zhì)形成的影響

金歡淳，張培安，張濤，金聯(lián)宇，董天宇，胡丹*，房經(jīng)貴

(1.溫州市農(nóng)技推廣中心，浙江 溫州 325000；2.浙江省亞熱帶作物研究所，浙江 溫州 325000；3.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 園藝學(xué)院，江蘇 南京 210095；4.溫州樂清市聯(lián)宇葡萄研究所，浙江 溫州 325611)

妮娜皇后(Queen Nina)是由日本農(nóng)研機(jī)構(gòu)果樹研究所選育的四倍體歐美雜交種葡萄，其豐產(chǎn)性良好，成熟時(shí)果皮色澤紅艷，果粒大、肉脆，高糖低酸無澀感，且具有濃烈的果香[1]，已在浙江、江蘇、四川、福建等地廣泛種植。我國南方葡萄產(chǎn)區(qū)夏季高溫多濕，且部分設(shè)施栽培光照條件不佳，易造成妮娜皇后果實(shí)著色不良，同時(shí)糖分積累也受到較大影響，因此，目前亟待研發(fā)能夠高效改善妮娜皇后品質(zhì)的栽培措施。

茉莉酸(jasmonic acid，JA)及其甲酯(methyl jasmonate，MeJA)廣泛存在于高等植物體內(nèi)，其由亞麻酸經(jīng)脂氧合酶、丙二烯氧化物合成酶等一系列酶促反應(yīng)而生成[2]。許多研究表明，茉莉酸類物質(zhì)具有抑制植物生長、促進(jìn)葉片衰老、促進(jìn)脫落、促進(jìn)氣孔關(guān)閉等類似于脫落酸的生理效應(yīng)[3]。目前已在蘋果[4]、葡萄[5]、草莓[6]、李[7]等多種果樹中開展了MeJA的應(yīng)用研究，發(fā)現(xiàn)MeJA能夠激活苯丙烷代謝途徑，提高作物體內(nèi)總酚、類黃酮等次生代謝物的含量，促進(jìn)果實(shí)中花色苷的積累，改善果實(shí)色澤與品質(zhì)[8]。盡管已在克瑞森無核、新郁、蛇龍珠等葡萄品種上開展了外源噴施MeJA處理的相關(guān)研究，并發(fā)現(xiàn)MeJA能夠促進(jìn)果皮著色與果實(shí)品質(zhì)的形成[8-10]，但相關(guān)研究開展的地區(qū)均為我國北方產(chǎn)區(qū)，試驗(yàn)所處的生態(tài)條件、栽培模式及葡萄品種均不同，潛在的產(chǎn)業(yè)問題也不盡相同。關(guān)于MeJA應(yīng)用于浙江等南方產(chǎn)區(qū)的妮娜皇后，以改善其著色及果實(shí)品質(zhì)的研究尚未報(bào)道。

本研究于著色前對(duì)妮娜皇后噴施不同濃度MeJA，比較不同濃度MeJA對(duì)妮娜皇后著色及果實(shí)品質(zhì)的影響，旨在為MeJA在浙江乃至南方產(chǎn)區(qū)妮娜皇后上的應(yīng)用提供技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)于2022年6—8月進(jìn)行，試驗(yàn)品種為妮娜皇后，試驗(yàn)地位于浙江省樂清市聯(lián)宇葡萄研究所試驗(yàn)基地(地理坐標(biāo)為121.11°E，28.28°N)。葡萄植株種植于連棟溫室內(nèi)，為南北行向，株行距2 m×3 m，Y形架，植株生長健壯且長勢(shì)一致，生長結(jié)果正常，按常規(guī)栽培措施統(tǒng)一管理。當(dāng)果實(shí)開始變軟且尚未轉(zhuǎn)色時(shí)(E-L 34)，選擇果穗相同位置(東側(cè))、長勢(shì)一致、無明顯病蟲害的果穗作為試驗(yàn)對(duì)象。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2.1 不同濃度茉莉酸甲酯處理妮娜皇后果穗

選擇陰天傍晚時(shí)對(duì)果穗進(jìn)行處理，處理組采用25 mg·L-1MeJ(L)、50 mg·L-1MeJ(M)、100 mg·L-1MeJA(H)，以噴清水為對(duì)照(CK)，各處理均加入體積分?jǐn)?shù)0.1%的吐溫-80(非離子型表面活性劑，用作展開劑)，采用常規(guī)噴霧法施藥，使果粒表面均勻附著，每組處理30穗果。

1.2.2 樣品采集

處理開始時(shí)取第1次樣，記為DS0。之后每隔25 d拍照取樣 1 次，至果實(shí)完全成熟，共取2次樣，分別記為DS1與DS2。從5串果穗向陽側(cè)的上、中、下部位各采5粒，試驗(yàn)期間每穗果僅取一次樣。每個(gè)處理共 15個(gè)果粒，用于測(cè)定相關(guān)性狀指標(biāo)后，將皮、肉、種子分離后利用液氮速凍，儲(chǔ)存于-80 ℃，用于進(jìn)一步試驗(yàn)。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 果實(shí)外觀指標(biāo)

單粒重、縱橫徑、果形指數(shù)。選取10粒果實(shí)進(jìn)行測(cè)定。單粒重采用1/100 g電子天平測(cè)定。果粒縱徑、橫徑用0.01 mm游標(biāo)卡尺測(cè)定。果形指數(shù)為果粒縱徑除以果粒橫徑。

果穗著色等級(jí)。隨機(jī)選5串果穗，參照表1中著色等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)果穗著色程度進(jìn)行評(píng)價(jià)。

表1 果穗著色等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

果實(shí)著色指數(shù)。選取10粒果實(shí)，用CR-400手持色差計(jì)(Konica Minolta，日本)測(cè)定每個(gè)果實(shí)赤道部位4個(gè)方位的色澤指標(biāo)L、a、b。利用a和b值可計(jì)算出色澤飽和度(chroma，C)，C=(a2+b2)0.5，并計(jì)算出色調(diào)角(hue angle，h)，h=arctangentb/a。葡萄果實(shí)色澤指數(shù)(ICIRG)，ICIRG=(180-h)/(L+C)，該指數(shù)評(píng)價(jià)果實(shí)外觀色澤的標(biāo)準(zhǔn)為：ICIRG<2為黃綠，26為藍(lán)黑色[11]。

1.3.2 果實(shí)理化指標(biāo)

果實(shí)硬度。選取10粒果實(shí)，采用數(shù)顯式拉力計(jì)(HG-2000，Grows，中國)測(cè)定拉力計(jì)探頭刺破果皮時(shí)的拉力數(shù)值。

可溶性固形物(TSS)含量。選取10粒果實(shí)，使用手持式折光儀(ATAGO，PAL-36S，日本)測(cè)定。

總花色苷含量。采用pH示差法測(cè)定。首先稱取0.5 g果皮用液氮磨成粉末，使用10 mL 0.1%的鹽酸-甲醇(V/V)溶液4 ℃萃取12 h，其間用渦旋儀渦旋2～3次。最后將提取液12 000 r·min-1離心20 min，獲得上清液。分別用pH值為1.0的緩沖液(25 mmol·L-1KCl，用濃HCl調(diào)節(jié)pH值至1.0)和pH值為4.5的緩沖液(400 mmol·L-1NaAc，用冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至4.5)按照相同的倍數(shù)對(duì)提取液進(jìn)行稀釋，使用紫外分光光度計(jì)(UV-5200，Metash，中國)測(cè)定2種稀釋后的溶液在520和700 nm處的吸光度。每個(gè)處理樣品測(cè)定3次生物學(xué)重復(fù)。花色苷的計(jì)算公式為：

花色苷含量(mg·g-1)=(D×449.2×PF×1 000)/26 900/0.5。

式中，D表示吸光度，其計(jì)算公式為D=(D520-D700)pH1-(D520-D700)pH4.5；449.2為Cy-3-glu的分子量；PF為組織提取液的稀釋倍數(shù)；26 900為Cy-3-glu的消光系數(shù)。

可溶性糖和有機(jī)酸含量。取0.5 g果肉用液氮磨成粉末，加入1.5 mL 80%乙醇，80 ℃水浴30 min，12 000 r·min-1離心10 min，收集上清。再重復(fù)提取1次，收集兩次上清液定容至5 mL。經(jīng)-80 ℃冷凍干燥，加15 mL超純水溶解(或加1.5 mL，過濾后稀釋10倍)，利用0.22 μm水系過濾頭進(jìn)行過濾。采用超高效液相色譜(UPLC，Water，美國)測(cè)定果肉中可溶性糖和有機(jī)酸含量，色譜條件參考Zheng等[12]。每個(gè)處理樣品測(cè)定3次生物學(xué)重復(fù)。

揮發(fā)性有機(jī)物(volatile organic compounds，VOCs)含量。葡萄果實(shí)揮發(fā)性有機(jī)物的提取采用頂空固相微萃取(HS-SPME)技術(shù)：將葡萄果肉用液氮充分研磨，取2 g裝于20 mL頂空瓶中，同時(shí)加入1 g NaCl與4 μL濃度為82.2 mg·L-1的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)3-Octanol(3-辛醇)/乙醇溶液，密封上樣。采用氣相質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS，Thermo Fisher，美國)對(duì)揮發(fā)性有機(jī)物進(jìn)行定性和定量分析，測(cè)定的條件與方法參考Zheng等[12]。每個(gè)處理樣品測(cè)定3次生物學(xué)重復(fù)。

1.4 果實(shí)品質(zhì)綜合評(píng)價(jià)

選取與妮娜皇后果實(shí)成熟期(DS2)品質(zhì)關(guān)系密切的13個(gè)指標(biāo)，采用隸屬函數(shù)法[8]進(jìn)行果實(shí)品質(zhì)綜合評(píng)價(jià)。

與果實(shí)品質(zhì)呈正相關(guān)的指標(biāo)果穗著色程度、CRIG、單果重、縱徑、橫徑、果實(shí)硬度、TSS、果皮花色苷含量、果實(shí)可溶性固形物含量、果肉可溶性糖與揮發(fā)性有機(jī)物質(zhì)(包括酯類和萜烯類)含量計(jì)算如下：

U(Xij)=(Xij-Xmin)/(Xmax-Xmin)。

與果實(shí)品質(zhì)呈負(fù)相關(guān)的有機(jī)酸含量計(jì)算如下：

U(Xij)=1-(Xij-Xmin)/(Xmax-Xmin)。

式中，U(Xij)表示各指標(biāo)的隸屬度值，且U(Xij)∈[0，1]；Xij表示第i個(gè)處理第j個(gè)指標(biāo)的測(cè)定值；Xmax、Xmin為所有處理第j項(xiàng)指標(biāo)的最大值和最小值。計(jì)算13項(xiàng)指標(biāo)隸屬度的平均值作為比較不同濃度MeJA處理妮娜皇后果實(shí)品質(zhì)優(yōu)劣的指標(biāo)。

1.5 RNA提取與熒光定量PCR

葡萄果皮RNA提取采用Biofit RNA提取試劑盒(V1.5，成都百菲特科技有限公司，中國)。RNA反轉(zhuǎn)錄采用Hifair? Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit(翌圣生物科技有限公司，中國)。RT-qPCR采用Hieff Unicon? Universal TaqMan multiplex qPCR master mix(翌圣生物科技有限公司，中國)，具體方法參照說明書。試驗(yàn)過程中每個(gè)樣品設(shè)立3個(gè)重復(fù)，VvUBQ被用作內(nèi)參基因。各基因的定量水平采用2-ΔΔCT方法計(jì)算，以對(duì)照樣品在DS0階段時(shí)該基因的表達(dá)水平作為參照。本論文所用基因的登錄號(hào)及定量引物如表2所示。

表2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物序列

1.6 數(shù)據(jù)分析方法

數(shù)據(jù)分析方法用軟件SAS 9.2(SAS Institute Inc.，Cary，NC，USA)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。采用Duncan多重比較檢驗(yàn)(P<0.05)分析顯著性水平。數(shù)據(jù)圖由Excel 2019(Microsoft，WA，USA)繪制。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度MeJA對(duì)果實(shí)外觀性狀的變化

2.1.1 果穗著色程度

不同濃度MeJA處理較對(duì)照均顯著促進(jìn)妮娜皇后果實(shí)的著色，其中100 mg·L-1MeJA效果最佳，25與50 mg·L-1MeJA次之(圖1中A)。著色等級(jí)變化同樣表明，MeJA處理能夠顯著促進(jìn)果穗著色。在DS1時(shí)，100 mg·L-1MeJA著色等級(jí)顯著高于其他處理，25與50 mg·L-1表現(xiàn)相當(dāng)，也同樣高于對(duì)照。在DS2時(shí)，50與100 mg·L-1處理的果穗均已完成著色，25 mg·L-1處理的果穗著色等級(jí)為3.90，而對(duì)照僅為2.89(圖1中B)。

A—著色情況，B—著色等級(jí)。L、M、H分別表示25、50、100 mg·L-1MeJA處理，圖2、4～5同。同時(shí)期數(shù)據(jù)無相同小寫字母表示不同處理間差異顯著(P<0.05)。圖1 不同濃度MeJA處理妮娜皇后果穗后著色情況與著色等級(jí)的變化

通過果實(shí)著色指數(shù)進(jìn)一步比較發(fā)現(xiàn)，在DS1時(shí)僅100 mg·L-1MeJA處理的L值顯著低于對(duì)照，而至DS2時(shí)不同濃度MeJA處理后均顯著低于對(duì)照。a值在DS1時(shí)不同濃度MeJA處理后均顯著高于對(duì)照，其中100 mg·L-1MeJA處理顯著高于25與50 mg·L-1MeJA，前者為4.87，后兩者分別為3.84和2.76。b值在DS1時(shí)不同濃度MeJA處理后均顯著低于對(duì)照，而至DS2時(shí)僅有100 mg·L-1MeJA處理顯著低于對(duì)照。DS1時(shí)100 mg·L-1MeJA處理后CRIG值為3.58，顯著高于其他處理組，25與50 mg·L-1MeJA次之，分別為2.52和2.82，而對(duì)照僅為1.87，DS2時(shí)100 mg·L-1處理后果實(shí)的CRIG值率先達(dá)到紅色標(biāo)準(zhǔn)為4.21，25與50 mg·L-1MeJA及對(duì)照此時(shí)依舊為粉紅色，其中50 mg·L-1MeJA處理為3.03，顯著高于25 mg·L-1MeJA與對(duì)照處理，而25 mg·L-1MeJA與對(duì)照分別為2.76和2.37(表3)。

表3 不同濃度MeJA處理后果實(shí)著色指數(shù)的變化

2.1.2 果實(shí)單粒重

不同處理組從DS0至DS2果實(shí)單粒重均逐漸增加，不同濃度MeJA處理后表現(xiàn)出隨著濃度增加，單粒重增加程度減少，其中25 mg·L-1MeJA處理后單粒重增加最為明顯，至DS2時(shí)單粒重為17.09 g，較對(duì)照增加了34.04%。50 mg·L-1MeJA處理促進(jìn)果實(shí)單粒重增加至14.60 g。但100 mg·L-1MeJA處理后，各時(shí)期果實(shí)單粒重均較對(duì)照較為接近(表4)。

表4 不同濃度MeJA處理后果實(shí)形態(tài)發(fā)生的變化

2.1.3 果實(shí)徑橫徑與果形指數(shù)

各處理組中果實(shí)橫徑的變化與單粒重變化的趨勢(shì)相似，即隨MeJA處理濃度的增加，果實(shí)橫徑增加程度減少。DS2時(shí)25和50 mg·L-1MeJA處理較對(duì)照分別增加了2.22與0.78 mm，而100 mg·L-1MeJA處理的果實(shí)橫徑較對(duì)照無顯著差異(表4)。

果實(shí)縱徑在處理后的變化則不盡相同，在DS1時(shí)僅25 mg·L-1MeJA處理較對(duì)照顯著增加，且增加了3.30 mm。至DS2時(shí)，不同濃度MeJA處理后果實(shí)縱徑較對(duì)照均顯著增加，且濃度由低到高分別增加了4.11、4.61和3.91 mm(表4)。

由于縱橫徑的差異性變化勢(shì)必導(dǎo)致各處理間果形指數(shù)存在差異，其中在DS1時(shí)25 mg·L-1MeJA處理后果形指數(shù)顯著高于其他處理達(dá)1.22，而DS2時(shí)50、100 mg·L-1MeJA處理后果形指數(shù)顯著高于其他處理，分別為1.17和1.19(表4)。

2.2 不同處理后果實(shí)理化性狀的變化

2.2.1 果實(shí)硬度

隨著果實(shí)成熟各處理組果實(shí)硬度均逐漸減少，其中DS1時(shí)各處理組不存在顯著差異。而至DS2時(shí)，不同濃度MeJA處理后果實(shí)硬度均較對(duì)照顯著增加，從低至高濃度分別為1.39、1.43和1.38 kg·cm-2，但此時(shí)對(duì)照的果實(shí)硬度僅為1.26 kg·cm-2(表5)。

表5 不同濃度MeJA處理后果實(shí)硬度、TSS與果皮中花色苷含量的變化

2.2.2 果實(shí)TSS含量

不同處理后果實(shí)中TSS含量變化與果實(shí)色澤截然不同。在DS1時(shí)25 mg·L-1MeJA處理后TSS含量最高為18.55%，50 mg·L-1MeJA次之為17.40%，而100 mg·L-1MeJA與對(duì)照間差異不顯著，分別為16.10%和16.04%。而至DS2時(shí)100 mg·L-1MeJA與對(duì)照間依舊差異不顯著，分別為17.25%和17.05%，而25和50 mg·L-1MeJA處理后TSS含量顯著高于對(duì)照，分別為17.90%和18.22%(表5)。

2.2.3 果皮花色苷含量

不同處理后果皮中花色苷含量變化情況與果實(shí)色澤變化相似。在DS1時(shí)100 mg·L-1MeJA處理后花色苷含量顯著高于其他處理，為0.18 mg·g-1；50 mg·L-1MeJA處理則次之為0.13 mg·g-1；25 mg·L-1MeJA與對(duì)照處理含量相對(duì)較少，且差異不顯著，分別為0.09和0.07 mg·g-1。至DS2時(shí)50與100 mg·L-1MeJA兩者處理后含量相對(duì)較高，分別為0.23和0.25 mg·g-1。25 mg·L-1MeJA與對(duì)照處理依舊含量相對(duì)較少，且差異不顯著，均為0.09 mg·g-1(表5)。

2.2.4 果肉可溶性糖含量

妮娜皇后果肉中未檢測(cè)到蔗糖，僅檢測(cè)到葡萄糖和果糖2種可溶性糖，且兩者含量相當(dāng)。在DS1時(shí)50和100 mg·L-1MeJA處理后果肉中可溶性糖含量顯著高于25 mg·L-1MeJA和對(duì)照，前兩者分別為129.67和132.75 mg·g-1，而后兩者分別僅為71.58和69.60 mg·g-1。至DS2時(shí)，50和100 mg·L-1MeJA處理后果肉中可溶性糖含量變化相對(duì)較小，分別為131.42和129.27 mg·g-1，而25 mg·L-1MeJA和對(duì)照處理則顯著增加，但依舊顯著低于50和100 mg·L-1MeJA處理，分別為112.64、115.13 mg·g-1(圖2)。

同一指標(biāo)不同處理間沒有相同字母表示差異達(dá)顯著水平(P<0.05)。圖3、圖4同。圖2 不同濃度MeJA處理后果肉中可溶性糖(葡萄糖、果糖)含量的變化

2.2.5 果肉有機(jī)酸含量

本研究檢測(cè)了妮娜皇后果肉中酒石酸、蘋果酸和檸檬酸3種葡萄主要有機(jī)酸含量。在DS0至DS1期間，各處理組中蘋果酸含量顯著降低，而酒石酸與檸檬酸含量變化程度相對(duì)較小。DS1至DS2期間，3種有機(jī)酸含量均未呈現(xiàn)顯著的差異，且2個(gè)時(shí)期果肉中酒石酸含量相對(duì)較多，蘋果酸和檸檬酸含量相當(dāng)且較少(圖3)。

圖3 不同濃度MeJA處理后果肉中有機(jī)酸(酒石酸、蘋果酸、檸檬酸)含量的變化

2.2.6 果肉揮發(fā)性有機(jī)物(VOCs)含量

香氣亦是評(píng)判葡萄果實(shí)風(fēng)味與品質(zhì)性狀的重要指標(biāo)，因此，本研究通過氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS)測(cè)定了DS2時(shí)期各處理果肉中酯、醛、烴、醇、萜烯、酮、酚、酸等VOCs的含量，其中妮娜皇后果肉中酯、醛、烴含量相對(duì)較高，25 mg·L-1MeJA處理后酯類含量低于其他處理，但醛類含量高于其他處理，100 mg·L-1MeJA處理后烴類含量低于其他處理。各處理組中VOCs總含量均高于對(duì)照，其中50 mg·L-1MeJA處理后含量最高為32.63 μg·g-1，25與100 mg·L-1MeJA處理的含量相當(dāng)，分別為31.18與31.55 μg·g-1，而對(duì)照果肉中僅為29.04 μg·g-1(圖4中A)。

A—不同類型揮發(fā)性有機(jī)物(VOCs)在不同處理組中含量的差異，B-F分別為乙酸乙酯、丁酸乙酯、己醛、甲苯、反式-2-己烯醇等主要VOCs在不同處理組中含量的差異。圖4 不同濃度MeJA處理后果肉中揮發(fā)性有機(jī)物含量的變化

乙酸乙酯是妮娜皇后果肉中含量最高的VOC，50和100 mg·L-1MeJA處理的含量顯著高于25 mg·L-1MeJA和對(duì)照，而丁酸乙酯在各處理組的含量截然不同，其中對(duì)照中含量顯著高于各處理組，50和100 mg·L-1MeJA處理的含量亦顯著高于25 mg·L-1MeJA(圖4 中B和C)。25 mg·L-1MeJA處理后果肉中己醛和甲苯的含量顯著高于其他處理(圖4 中D和E)。50 mg·L-1MeJA處理后萜烯類物質(zhì)含量最高(圖4中A)，其中反式-2-己烯醇是妮娜皇后果肉檢測(cè)到含量最高的萜烯類物質(zhì)，其在50 mg·L-1MeJA處理后含量達(dá)0.74 μg·g-1，顯著高于其他處理，100 mg·L-1MeJA處理含量也相對(duì)較高為0.19 μg·g-1，25 mg·L-1MeJA與對(duì)照中含量相對(duì)較少，且彼此間無顯著差異，二者分別為0.024和 0.032 μg·g-1(圖4中F)。

2.3 果皮中花色苷合成相關(guān)基因表達(dá)水平的變化

VvCHS、VvCHI、VvF3H、VvUFGT、VvDFR、VvLDOX均為花色苷合成的結(jié)構(gòu)基因，VvMYB90則是花色苷合成的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，這些基因在花色苷合成過程發(fā)揮著關(guān)鍵的作用。由圖5可知，在DS1和DS2時(shí)MeJA處理后VvCHS、VvCHI、VvF3H、VvUFGT、VvDFR、VvLDOX的表達(dá)水平較對(duì)照顯著增加，其中100 mg·L-1MeJA處理表達(dá)水平最高，25和50 mg·L-1MeJA處理表達(dá)水平次之。VvMYB90在DS1和DS2時(shí)則同樣表現(xiàn)為100 mg·L-1MeJA處理表達(dá)水平最高，并隨著處理濃度的降低表達(dá)水平逐漸降低，且均顯著高于對(duì)照。

同一取樣日期不同處理間沒有相同字母表示差異顯著(P<0.05)。圖5 果皮中花色苷合成相關(guān)基因的表達(dá)水平

2.4 不同濃度處理后果實(shí)品質(zhì)的綜合評(píng)價(jià)

根據(jù)不同濃度MeJA處理果實(shí)在成熟期多個(gè)性狀表現(xiàn)進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)分析(表 6)，對(duì)照的隸屬度函數(shù)平均值僅為0.10，其與處理組的差異較大，MeJA處理濃度由低至高的平均值分別為0.52、0.75、0.64。其中隸屬度函數(shù)值最高為50 mg·L-1MeJA處理，僅有機(jī)酸1項(xiàng)指標(biāo)值為0，且在縱徑、硬度、TSS、VOC、萜烯等指標(biāo)均為各處理中最高。

3 討論

葡萄優(yōu)質(zhì)果由果皮色澤、果實(shí)含糖量、形狀、粒重、香氣等諸多外觀與品質(zhì)指標(biāo)綜合評(píng)定而成[13]。研究表明，光照環(huán)境、晝夜溫差、品種特性等諸多因素均會(huì)影響葡萄果實(shí)著色[14-16]，而南方避雨棚內(nèi)光照不足與轉(zhuǎn)色期晝夜溫差小是導(dǎo)致具有諸多優(yōu)良性狀的妮娜皇后在部分南方產(chǎn)區(qū)著色不良、糖分積累緩慢等潛在環(huán)境因素[17]，極大地限制了該品種在此地區(qū)的推廣。本研究中不同濃度MeJA處理后均能提高妮娜皇后果皮中花色苷含量，且顯著提高了果皮中VvCHS、VvCHI、VvF3H、VvUFGT、VvDFR、VvLDOX等類黃酮和花色苷合成相關(guān)基因的表達(dá)水平，利用MeJA處理桃、葡萄、草莓等亦能夠促進(jìn)相關(guān)基因的表達(dá)水平[5，18]。另有研究表明，MeJA通過介導(dǎo)MYB基因的表達(dá)，進(jìn)而調(diào)控類黃酮和花色苷合成相關(guān)基因表達(dá)[19-20]，本研究中MeJA處理后VvMYB90的表達(dá)量顯著增加，且隨著濃度的增加表達(dá)量逐漸增加。因此，可推測(cè)在葡萄中MeJA可能也是通過介導(dǎo)VvMYB90的表達(dá)以促進(jìn)果皮中花色苷的合成。

盡管MeJA已在諸多果樹中被證明能夠提高果實(shí)花色苷含量，降低葉綠素含量，進(jìn)而改善果實(shí)品質(zhì)[4-7]，然而在不同樹種或品種中使用MeJA的最佳噴施濃度存在不同結(jié)論[8-10]。本研究中盡管100 mg·L-1MeJA處理能夠更好地促進(jìn)妮娜皇后果皮中花色苷積累與果穗整體著色，但在果實(shí)大小、TSS與VOCs含量等方面效果不及50 mg·L-1MeJA處理，且50 mg·L-1MeJA處理在成熟時(shí)果穗著色程度已與100 mg·L-1MeJA相當(dāng)，而使用更高濃度的植物生長調(diào)節(jié)劑也將成倍增加生產(chǎn)成本。因此，結(jié)合隸屬度函數(shù)平均值綜合考慮，建議生產(chǎn)中可使用50 mg·L-1MeJA在果實(shí)轉(zhuǎn)色前噴施妮娜皇后果穗，能夠解決南方部分產(chǎn)區(qū)果實(shí)著色不佳的問題，并且能夠促進(jìn)果實(shí)中糖分積累、增加果實(shí)大小、硬度與VOCs的含量。