尿路上皮癌組織中PAX-8、GATA-3的表達與臨床病理特征的相關性

章達桂

福建省福鼎市醫院病理科 355200

膀胱癌在泌尿系統惡性腫瘤中十分常見,男性發病率明顯高于女性,根據其組織來源可分為膀胱尿路上皮癌、膀胱鱗狀細胞癌、膀胱小細胞癌等,其中以膀胱尿路上皮癌最為多見[1]。尿路上皮癌主要以浸潤的方式生長,具有多灶發生、復發率高等特點,因其臨床癥狀無特異性,早期檢出率較低,目前仍缺乏敏感而特異性的預測指標[2]。GATA結合蛋白3(GATA-binding protein 3,GATA-3)主要來源于轉錄因子GATA家族,可對細胞的生長進行調控,同時還能促使細胞分化,一般認為在驅動2型輔助T細胞分化方面具有較高的特異性,同時也認為該轉錄因子可直接參與到尿路上皮癌的發生發展中,其陽性表達與膀胱癌預后存在關聯[3]。配對盒基因8(Paired box gene 8,PAX-8)主要來源于蛋白轉錄因子配對盒家族,可直接參與到甲狀腺、腎臟、米勒管的胚胎發育過程中,一般認為其表達與癌癥的發生發展存在一定關聯[4]。基于此,本文就尿路上皮癌組織中PAX-8、GATA-3的表達與臨床病理特征的相關性進行分析,報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 納入標準:病理學檢查確診為尿路上皮癌;首次確診入院治療者;石蠟組織切片完整;自愿參與且已簽署知情同意書。排除標準:近期接受放化療干預者;合并其他惡性腫瘤;合并免疫性或代謝性疾病;石蠟組織切片中腫瘤組織不完整或免疫組織化學染色不均勻。根據納入、排除標準,選取本院2020年1月—2022年1月收治的144例尿路上皮癌患者的石蠟標本作為觀察組,其中男95例,女49例;年齡37～87歲,平均年齡(54.58±5.34)歲;淋巴結轉移12例,未見淋巴結轉移132例。另選取同期100例患者的癌旁正常尿路上皮組織標本作為對照組,其中男70例,女30例;年齡36～86歲,平均年齡(53.54±5.65)歲。

1.2 方法 免疫組化方法:取石蠟標本3μm重新切片,經過二甲苯、乙醇梯度脫蠟至水、內源性過氧化物酶阻斷,并采用抗原熱修復,封閉組織蛋白,加入稀釋濃度為1∶50的一抗孵育過夜,再加入稀釋濃度為1∶50的二抗孵育15min,DAB顯色、復染、封片,隨后采用顯微鏡觀察。GATA-3兔單克隆抗體(ab199428)購自美國Abcam公司。PAX-8鼠單抗(ZM-0468)購自北京中杉金橋生物有限公司。均嚴格按照相關說明書操作。

1.3 觀察指標 (1)比較兩組患者的PAX-8、GATA-3表達陽性率。PAX-8陽性判定:染色后,細胞核內有棕黃色或黃褐色顆粒表示陽性。GATA-3陽性判定:按陽性細胞數在腫瘤細胞中的占比判斷,陽性細胞數占比≥10%表示陽性,<10%表示陰性。(2)分析尿路上皮癌組織中PAX-8、GATA-3表達與臨床病理特征的關系,包括性別、年齡(<65歲、≥65歲)、病變部位(上尿路、下尿路)、組織學分級(高級別、低級別)、有無組織浸潤、有無淋巴結轉移、有無復發、分期(T1～T2、T3～T4)、腫瘤直徑(<3cm、≥3cm)、有無脈管癌栓、有無遠處轉移。(3)分析尿路上皮癌組織中PAX-8、GATA-3與臨床病理特征的相關性。

2 結果

2.1 兩組PAX-8、GATA-3表達陽性率比較 觀察組患者PAX-8表達陽性率明顯高于對照組,GATA-3表達陽性率明顯低于對照組(P<0.05),見表1。

表1 兩組PAX-8、GATA-3表達陽性率對比[n(%)]

2.2 尿路上皮癌組織中PAX-8表達與臨床病理特征的關系 PAX-8陽性與陰性的性別、年齡、病變部位、組織學分級、有無組織浸潤、有無淋巴結轉移、有無復發、腫瘤直徑、有無脈管癌栓比較無統計學差異(P>0.05);PAX-8陽性與陰性的遠處轉移、分期比較存在顯著差異(P<0.05),見表2。

表2 尿路上皮癌組織中PAX-8表達與臨床病理特征的關系[n(%)]

2.3 尿路上皮癌組織中GATA-3表達與臨床病理特征的關系 GATA-3陽性與陰性的性別、年齡、病變部位、有無組織浸潤、有無淋巴結轉移、有無復發、腫瘤直徑、有無脈管癌栓、有無遠處轉移比較無統計學差異(P>0.05);GATA-3陽性與陰性的組織學分級、分期比較存在顯著差異(P<0.05),見表3。

表3 尿路上皮癌組織中GATA-3表達與臨床病理特征的關系[n(%)]

2.4 尿路上皮癌組織中PAX-8、GATA-3與臨床病理特征的相關性 PAX-8表達與分期、遠處轉移呈正相關性(r=0.964、0.764,P<0.05);GATA-3表達與組織學分級、分期呈負相關性(r=-0.849,-0.684,P<0.05)。

3 討論

尿路上皮癌的發病機制較為復雜,臨床目前尚未完全明確,考慮與遺傳、藥物、脂肪攝入量高等因素有關[5]。相較于其他膀胱腫瘤而言,尿路上皮癌具有獨特性,例如診斷時浸潤的發生率高達60%,盡管近幾年臨床診療技術和設備不斷提升,但尿路上皮癌的預后相較于其他膀胱癌而言仍比較差,且目前關于尿路上皮癌預后指標的研究尚未成熟,還需進一步尋找敏感性和特異性高的預測指標[6]。

GATA-3在甲狀旁腺、T淋巴細胞和尿路上皮等多種正常發育的細胞或組織中均有表達,而在相同腫瘤中,GATA-3的免疫組化陽性表達率也受到相當的限制,可見GATA-3表達在腫瘤細胞組織中具有較高的特異性[7]。PAX基因是一個發育調控基因家族,PAX-8含有成對結構域和八聚體,大量研究認為PAX家族編碼的轉錄因子與細胞增殖、分化及腫瘤的發生發展存在關聯[8]。既往研究發現,PAX-8在卵巢癌、腎細胞癌及所有腎源性肌瘤中均具有陽性表達,一般轉錄因子多在胚胎時呈現出高表達,器官成熟后表達將會逐漸減弱,但PAX-8在胚胎組織和成熟的Mullerian’s上皮中均出現高表達的情況,可見PAX-8不僅參與到胚胎的發育過程中,在成熟組織中也能發揮出至關重要的作用[9]。本研究發現,相較于對照組而言,觀察組患者的PAX-8、GATA-3表達陽性率更高。提示PAX-8、GATA-3表達在尿路上皮癌鑒別診斷中存在一定價值。目前有大量研究證實GATA-3表達與尿路上皮癌pT分期存在明顯相關性,也有研究認為GATA-3的陽性表達與上尿路上皮癌的臨床病理特征不存在相關性,爭議性較大[10]。GATA-3可直接參與到腫瘤細胞的增殖、分化和凋亡過程中,能夠通過下調轉移基因和上調轉移抑制基因的方式抑制腫瘤的轉移性生長,因此GATA-3表達多處于正常組織中[11]。隨著腫瘤的分期、分級的增加,GATA-3表達將會出現逐漸降低的情況,可作為免疫組化標志物判斷腫瘤的進展情況[12]。在尿路上皮癌中,PAX-8在高分期、有遠處轉移中一般呈低表達;GATA-3在高級別、高分期中一般呈高表達。本次研究發現,GATA-3陽性多為高級別和T3～T4期患者;PAX-8陽性多為T3～T4期、有遠處轉移患者。由此可見,PAX-8、GATA-3陽性表達與PAX-8、GATA-3在尿路上皮癌中的表達情況存在一定關聯,可作為尿路上皮癌的預測因子。本次研究還發現,GATA-3與組織學分級、分期呈負相關性。提示GATA-3表達與尿路上皮癌的發生發展存在一定關聯。目前,已有大量研究證實GATA-3低表達與尿路上皮癌的臨床病理特征存在相關性,但對于PAX-8表達與尿路上皮癌的臨床病理特征相關性的研究較少[13]。PAX-8作為轉錄因子的一員,與胚胎的發育有關,PAX基因表達的蛋白質均會在胚胎發育中調控組織和器官的分化,可有效加快器官發育和腫瘤的發生發展速度[14]。PAX-8具有獨特的組織特異性,在正常腎集合管上皮細胞中出現彌漫強陽性,其高表達多來源于中腎管各組織器官或原發、轉移性腫瘤中,與腫瘤轉移存在密切關聯[15]。腫瘤轉移與分期存在密切關聯,分期越晚,癌細胞轉移越廣泛,PAX-8陽性表達率也會隨之增高,說明尿路上皮癌組織標本PAX-8表達越高,腫瘤的惡性程度越高,預后相對而言較差[16-17]。本研究發現,PAX-8高表達在T3～T4期、有遠處轉移中的占比更高,PAX-8表達與分期、遠處轉移呈正相關性。提示PAX-8高表達與尿路上皮癌遠處轉移及分期情況密切相關。

綜上所述,尿路上皮癌組織中的PAX-8、GATA-3表達與其分期、遠處轉移等臨床病理特征存在一定的關聯。但本研究仍存在樣本量少、未考慮腫瘤異質性等其他因素,還需進一步探索與研究,才能保障結果的真實性、可靠性。